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cGAS-STING通路的發(fā)現(xiàn)之旅 自上次稍稍搜索了一番HBV和STING之間的關(guān)聯(lián)，我突然對這條通路很感興趣，業(yè)余的時間總?cè)滩蛔∠肟纯催@條通路是如何被發(fā)現(xiàn)的。很巧，看到一篇“ZheMa（University of North Carolina at Chapel Hill）”寫的綜述文章，直覺告訴我：他有可能是我實驗室的師兄。就像去年看到一篇文章的作者中有“Hongyan Guo,Emory University”我一眼看出她就是小郭！話不多說，簡而言之，這條通路可感知細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的DNA，并且無需免疫細(xì)胞的傳遞或間接的調(diào)節(jié)，可直接影響IFN的表達(dá)，還有一點是該通路直接和機體的先天性免疫相關(guān)，和癌癥、病毒感染、免疫性疾病等有直接關(guān)聯(lián)。 至此還是有很多老問題：該通路如何發(fā)現(xiàn)的？為何沒有更早的被挖掘？與免疫有何緊密關(guān)系？目前研究熱點是什么？和藥物研發(fā)有何關(guān)系？研究技術(shù)和方法有哪些？其中有哪些有趣的故事？還有哪些猜測沒有被證實？等等。故事就是這樣，若是對此一無所知，也就無法產(chǎn)生興趣；若是對之一知半解，卻又無用；唯有專注一段時間，才會觸及奧妙的邊緣，讓你好奇萬分。曾經(jīng)公司內(nèi)部的一門課“Career development”中CSO提及了讀書的三境界，幾次課都反復(fù)強調(diào)： Understand the conclusion,without knowing the reason;--A book slaver Understand the conclusion, knowingthe reason; Understand the conclusion, knowingits limits;--A book owner 我感覺自己所追求的也是提高自己讀書的境界，我不希望自己只是知道一些知識，聽說過一些內(nèi)容，目前我的階段性目的是了解問題的背后和未來，希望自己能提出前沿的問題并給出解決方案。但也有一個限制：我只對自己感興趣的言語、話題、新聞稍稍上點心，大多時候?qū)ξ淖置庖撸瑹o法刺激我的神經(jīng)，在我的腦中未曾留下片刻足跡。 ——題記 過去的十多年人們圍繞細(xì)胞質(zhì)DNA與免疫刺激因子開展了許多創(chuàng)新性的研究，自2008年起諸多的DNA sensor被相繼發(fā)現(xiàn)，并且進(jìn)一步解釋了DNA誘導(dǎo)I型IFN的表達(dá)、抗病毒效應(yīng)以及自身免疫等現(xiàn)象的分子機制。至今人們已發(fā)現(xiàn)十余種DNSsensor，在他們的下游有一個關(guān)鍵的分子——STING，作為樞紐向下繼續(xù)傳遞信號。容我徐徐道來其中的細(xì)節(jié)。 Immune Sensing of DNA 先天免疫，換句話說就是本身具有的免疫，與針對特異抗原產(chǎn)生特異性的抗體和活化T細(xì)胞有著明顯的不同，他能過通過某種方式直接識別“外來物”并活化免疫系統(tǒng)對之加以攻擊。與軍事上的應(yīng)急處理方式類似，未及中央給予回復(fù)便可適時反擊。很早以前人們發(fā)現(xiàn)了先天免疫會利用一種天生的受體，俗稱模式識別受體（patternrecognize receptors, PPRs），這些受體可以識別一些非自我、來自病原生物的產(chǎn)物（也稱病原相關(guān)分子模式，pathogen-associatedmolecular patterns, PAMPs）或帶有自我傷害性質(zhì)的宿主分子（damage-associatedmolecular patterns, DAMPs），之后激活自身免疫系統(tǒng)來清除外來物或者對自身有損害的分子。最早被發(fā)現(xiàn)的、也是被研究最為透徹的就是Toll樣受體（Toll-like receptors, TLRs。TLRs表達(dá)在細(xì)胞表面或是內(nèi)體膜上，以便識別細(xì)胞外和細(xì)胞內(nèi)的PAMPs或DAMPs。 在2006年到2012年間，人們報道了PRRs可以識別細(xì)胞質(zhì)內(nèi)和細(xì)胞核內(nèi)的部分核酸。注意：是核酸！我估摸早期人們認(rèn)為抗原主要應(yīng)該是外來物的一些特別的成分，也就是宿主細(xì)胞沒有的成分，比如微生物的LPS，蛋白等，可核酸，大千世界都（幾乎）一樣??！如何區(qū)分?jǐn)澄夷?？隨即這個新發(fā)現(xiàn)好比一塊石頭，“噗通”一聲跳入平靜的水面，人們感知到先天性免疫即將發(fā)生革命性的轉(zhuǎn)變。（現(xiàn)在看來，和CRIPSR/Cas9又一次驚人的相似：核酸竟然可以靶向編輯基因組？竟然除了DNA結(jié)合蛋白意外，核酸也可以哦?。┙酉聛砣藗冴懤m(xù)揭示了細(xì)胞內(nèi)DNAsensor，相繼闡明介導(dǎo)免疫系統(tǒng)應(yīng)答的分子機制，發(fā)現(xiàn)DNA可以誘導(dǎo)I型IFN的表達(dá)、炎癥因子的釋放，引發(fā)自噬、凋亡、焦亡等過程。[1] 那么問題來了：細(xì)胞質(zhì)中的DNA 哪里來的？與“良民”有何區(qū)別？細(xì)胞如何識別？ 其實對于外源DNA能刺激機體免疫水平的了解早在1960s就開始，稍稍想象一下當(dāng)時發(fā)現(xiàn)DNA是遺傳物質(zhì)不久，當(dāng)時的研究手段不乏排除法，比如發(fā)現(xiàn)病毒能誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生IFNs后開始研究直接的刺激因子，是蛋白組分呢？DNA還是RNA？等等，A. Isaacs等人早期的探索揭示了外源的核酸可以誘導(dǎo)IFN的表達(dá)。[2]現(xiàn)在我們會說真核細(xì)胞中的DNA長居于細(xì)胞核中，因此會認(rèn)為不老實的DNA是破壞分子，若DNA悄然來到細(xì)胞質(zhì)、內(nèi)體等地方，細(xì)胞絕對不允許。（可，真的如此嗎？那么原核細(xì)胞中的DNA又是如何存活的呢？難道細(xì)菌內(nèi)部沒有DNAsensor？先把疑問放在這兒）。由此看你來，細(xì)胞核獲得了胞內(nèi)免疫的某種特權(quán)，內(nèi)部的DNA被視為良民，而細(xì)胞核以外的DNA則會被格殺勿論，被貼上DNA PAMPs或DNA DAMPs的標(biāo)簽。其實，外源的DNA確實有些不一樣，比如無甲基化的CpG DNA模序（unmethylatedCpG DNA motifs）常見于病原體的基因組、富含AT環(huán)結(jié)構(gòu)的單鏈DNA等。 談到細(xì)胞如何識別核酸就會讓人想到OAS（2’5’-oligoadenylatesynthase）和cGAS（cyclic GMP-AMPsynthase）、 TLR和STING。我想這里主要的發(fā)現(xiàn)依然是來自人們對病毒的研究，病毒來源的核酸會被一些特別的模序（motif）識別或感知，比如未經(jīng)修飾的完全互補的5’三磷酸的RNA（unmodified full base-paired 5’-triphosphorylated RNAs, 5’PPP-RNA）可活化細(xì)胞內(nèi)的RNA解旋酶RIG-I（retinoicacid-inducible gene I）、長鏈的RNA可被MDA5（melanoma differentiation-associated gene 5 ）檢測，而TLRs可以識別多種RNA和DNA分子。[3]
The three mammalian RLRs are superfamily 2 DExD/H-box RNA helicases[3] OAS和cGAS的名稱看似姊妹，實際上二者也有許多共性，但分工不同。簡單來說，OAS可以感知細(xì)胞質(zhì)中的RNA，而cGAS可感知細(xì)胞質(zhì)中的DNA。其中cGAS通過典型的PRR的通路被激活，通過STING上調(diào)IFNs的表達(dá)，進(jìn)而誘發(fā)抗病毒的活性；與之不同，OAS和下游的RNase L一同觸發(fā)更為激烈、及時的反應(yīng)來降解病毒的RNA，抑制病毒蛋白的翻譯。OAS和cGAS在結(jié)構(gòu)上有類似的折疊，或許進(jìn)化與同一起點；二者結(jié)合雙鏈核酸的方式類似；都產(chǎn)生2’5’相的磷酸二酯鍵；二者實屬同一個大的家族，稱為核苷酸轉(zhuǎn)移酶（nucleotidyltransferase）。 The OAS-RNase L system 正如其名，OAS可以產(chǎn)生2’5’相連的寡聚腺苷酸（2’5’-linkedoligoadenylates, 2'-5'A），在人源細(xì)胞中存在四個同源的蛋白：OAS1、OAS2、OAS3和OASL（OAS like protein），前三者可以產(chǎn)生2’-5’A，OASL缺乏這種能力，但有報道顯示他可以通過RIG-I發(fā)揮抗病毒的功能。之后2’-5’A作為第二信使會通過誘導(dǎo)RNase L二聚化并使其活化。RNase L是細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的一種核酸酶，又稱RibonucleaseL、ribonuclease 4 或OAS-dependentribonuclease，可直接切割細(xì)胞內(nèi)源的或病毒的RNA，進(jìn)而抑制病毒的復(fù)制；RNaseL也是一種可被IFN誘導(dǎo)表達(dá)的一種蛋白，可以通過MDA5誘導(dǎo)IFN的表達(dá)，上調(diào)OAS的表達(dá)后來增強抗病毒的活性。細(xì)胞十分危急時刻，也會選擇寧為玉碎不為瓦全的手段摧毀病毒的感染。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)病毒的RNA過量時，RNase L的長時間活化也會破壞細(xì)胞本身的正常運轉(zhuǎn)，抑制細(xì)胞蛋白的表達(dá)、誘發(fā)凋亡，阻止病毒的進(jìn)一步增殖。
RNase L activation pathway (From Wikipedia) TLR9 早期人們發(fā)現(xiàn)細(xì)菌的DNA可以活化哺乳類動物的免疫細(xì)胞，主要由于細(xì)菌的DNA存在未經(jīng)修飾的CpG（又稱CG site），而哺乳類細(xì)胞中的CpG出現(xiàn)的頻率比較低且多數(shù)被甲基化（70-80%），正因如此，細(xì)菌來源的CpG常用作疫苗治療癌癥時的佐劑。在2000年，Shizuo Akira的團隊揭示了這個感知細(xì)菌DNA的受體，通過序列比對分析他們發(fā)現(xiàn)一個基因與之前的TLR基因比較類似，故按序命名為TLR9。他們利用BLAST、DNA探針雜交以及基因敲除的小鼠在體內(nèi)和體外確認(rèn)了TLR9感知細(xì)菌DNA的作用。[4]（當(dāng)時人們只知道TLR有8位成員）現(xiàn)在人們已知細(xì)菌的、病毒來源的DNA均可以被漿類樹突細(xì)胞（plasmacytoid dendritic cells）、單核細(xì)胞（monocytes）、NK細(xì)胞和B細(xì)胞等內(nèi)定位在內(nèi)溶酶體（endolysosomalcompartment）中的TLR-9識別。
CpG on one DNA strand (left), and complementary C-Gbase-paring on two DNA strands (right). (From Wikipedia) 發(fā)現(xiàn)了識別外源DNA的受體，人們瞬間感覺疑惑頓開，希望盡快揭示其中隱藏的分子機制。過了五年左右，有人發(fā)現(xiàn)TLR9缺失的細(xì)胞被外源DNA刺激后依然具有抗病毒免疫的能力。[5]后續(xù)有人提出一種解釋：富含AT序列的DNA在細(xì)胞質(zhì)中經(jīng)RNA Pol III（真核細(xì)胞中的一種RNA聚合酶，用于轉(zhuǎn)錄核糖體5S rRNA、tRNA和一些小分子RNA）轉(zhuǎn)錄后產(chǎn)生的RNA可以激活RIG-I通路，進(jìn)而活化免疫系統(tǒng)。然而大多數(shù)DNA分子，包括微生物來源的DNA，并不能起始RNA pol III介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄。這也就是意味著一定存在某種和TLR9不同的通路，能夠感知細(xì)胞質(zhì)中的DNA。 STING 究竟會是什么呢？如何尋找呢？確實非常的吸引人，一個應(yīng)該是廣泛存在的通路，還和先天免疫相關(guān)，我想沒有人愿意在這里放慢腳步，這也許可以看成是科學(xué)的自我進(jìn)化。沒過多久，三個課題組先后報道了發(fā)現(xiàn)新的DNA sensor可以介導(dǎo)DNA引起的免疫波動：一篇的切入點時尋找誘導(dǎo)IFN表達(dá)的蛋白，他們選用了一個融合了IFN-β啟動子的報告基因，篩選了5500個人源的和9000個鼠源的基因，后來發(fā)現(xiàn)了STING（stimulator of interferon genes）；[6]一篇的入手處是尋找調(diào)節(jié)NFκB和IRF3活性的蛋白，在刺激IFN表達(dá)的上游通路中，也是用過表達(dá)文庫的實驗進(jìn)行篩選，使用的報告基因是融合了IRF3響應(yīng)的特異序列（ISG54啟動子中的IRF-E），前后篩選了約200,000個克隆，后來發(fā)現(xiàn)了MITA（Mediator of IRF3 Activation）；[7]（稍稍看了一下作者，原來是病毒所的舒紅兵教授的課題組完成的工作）另一篇利用鼠骨髓來源的巨噬細(xì)胞的cDNA文庫進(jìn)行篩選，報告基因也是IFN-β-Luciferase，希望找到能夠上調(diào)IFN-β的蛋白。后來他們發(fā)現(xiàn)了ERIS（endoplasmicreticulum IFN stimulator），并揭示該分子的二聚化對免疫系統(tǒng)活化至關(guān)重要。[8]再后來人們發(fā)現(xiàn)，這三個蛋白其實是同一個，最終統(tǒng)稱為STING。 到此，人們只是打開了一扇門，看到了細(xì)胞識別細(xì)胞質(zhì)中的RNA和DNA的多種方式，應(yīng)該還有更多種，亟待被科學(xué)家解開他們的面紗。沒用幾年的時間，人們先后發(fā)現(xiàn)了DNA sensor-STING-TBK1-IRF3-TypeI IFNs的通路中的關(guān)鍵成員，DNA sensor也接連走到人們面前，比如DAI、DHX9、DDX41等等，可是這些發(fā)現(xiàn)還是暴風(fēng)雨來臨的前奏，因為缺失任何一個DNAsensor都無法向缺失STING那樣阻斷DNA誘導(dǎo)的免疫活化。這又一次表明，在這些DNA sensor之外，還存在著一種或更多的DNAsensor能夠?qū)⑿盘杺鬟f給STING。那么，這又會是誰姍姍來遲呢？
Cytosolic RNA Sensing and Intracellular DNA Sensorspost virus infection[3] The cGAS-STING axis 2009年到2011年間，人們陸續(xù)發(fā)現(xiàn)細(xì)菌里的第二信使環(huán)鳥苷二磷酸（cyclindi-GMP, c-di-GMP）可激活STING依賴的免疫系統(tǒng)，誘導(dǎo)IFNs的表達(dá)。2011年8月，RussellE. Vance等人用同位素標(biāo)記的方法發(fā)現(xiàn)在動物細(xì)胞中STING本身是可以直接感知c-di-GMP的DNA sensor，并且初步用缺失的方法發(fā)現(xiàn)幾處重要的位點，比如STINGR231A則無法繼續(xù)響應(yīng)c-di-GMP的刺激。[9]（我很好奇作者做了多少工作才發(fā)現(xiàn)這一突變？當(dāng)時還沒有晶體結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)的支持，該如何設(shè)計突變呢？還是參考前人發(fā)現(xiàn)的關(guān)鍵位點小試一下而已呢？）后續(xù)的晶體解析工作顯示c-di-GMP結(jié)合在STING經(jīng)二聚化在C端形成的V型口袋。不過當(dāng)時人們還不確定STING是否可以直接與DNA結(jié)合。 到2013年（文章接收時間是2012年圣誕節(jié)前夕），陳志堅教授的團隊在Science期刊連續(xù)發(fā)表兩篇重量級文章報道環(huán)鳥苷酸-腺苷酸（cyclin GMP-AMP, cGAMP）作為第二信使可直接活化STING，[10]（這也是首次發(fā)現(xiàn)哺乳動物細(xì)胞中存在cGAMP）并且發(fā)現(xiàn)cGAMP上游關(guān)鍵合成酶——cGAS。[11]他們的思路和實驗設(shè)計都比較巧妙：一方面抓住細(xì)胞質(zhì)DNA激活STING通路時序列不依賴的過程，表明存在某種更普遍的分子機制；一方面他們提取了細(xì)胞的亞組分，這和當(dāng)年利用排除法確認(rèn)DNA是遺傳物質(zhì)的過程類似，首先要確認(rèn)是哪種組分是激活STING的關(guān)鍵。首先選用一株易通過STING誘導(dǎo)表達(dá)IFN的細(xì)胞系（鼠纖維肉瘤細(xì)胞系L929），經(jīng)shRNA干擾STING的表達(dá)，在過轉(zhuǎn)DNA激活STING上游通路的某種因子，再與經(jīng)perfringolysin O（PFO，被穿孔的細(xì)胞膜被破壞，但亞細(xì)胞器不會流出細(xì)胞，包括ER上的STING）穿孔的人源單核細(xì)胞系THP1或鼠源巨噬細(xì)胞Raw264.7共孵育，若轉(zhuǎn)染的DNA刺激了STING上游因子的活化，所提取的細(xì)胞提取物會將信號傳遞到THP1或Raw264.7中的STING，進(jìn)而引發(fā)IRF3的活化，也就是會產(chǎn)生二聚化的IRF3。 Illustration of an activity assay forcellular factors that activa4te the STING pathway[10] 實驗中選用的DNA包括刺激IFN表達(dá)的DNA（interferonstimulatory DNA, ISD）、poly[dA:dT]、GC-rich的50bp長的dsDNA、poly[dI:dC]和herring testis DNA (HT-DNA)，結(jié)果顯示這些不同類的DNA均可誘導(dǎo)IRF3的活化，表明STING的活化對轉(zhuǎn)染的DNA并沒有選擇性；接下來驗證STING上游的因子是否是蛋白，作者利用95?C熱滅活的方法去除蛋白的影響，很快，人們驚奇的發(fā)現(xiàn)了二聚化的IRF3——表明STING上游的活化因子并非蛋白，比較而言是核酸的可能性更大，或者說可以興奮的猜測就是DNA還是RNA！顯然，要立刻驗證究竟是誰，這時核酸酶（Benzonase）、蛋白酶K、DNA酶和RNA（類似）結(jié)構(gòu)被派上來試探一下，Waoooh，結(jié)果清晰的顯示了STING上游活化的因子竟然是DNA！ 做到這里已經(jīng)是上一個臺階，需要通過不同的對照組反復(fù)驗證，比如其他細(xì)胞提取物如何、是否通過RNA pol III、是否依賴RIG-I、是否僅通過STING等等，結(jié)果沒有再出現(xiàn)意外的發(fā)現(xiàn)。接下來作者沒有停下腳步，而是繼續(xù)尋找STING上游的這個“DNA”活化分子到底是什么結(jié)構(gòu)，畢竟DNA的情況過于復(fù)雜：多長？多短？二級結(jié)構(gòu)？有何特征？不過前不久發(fā)現(xiàn)的c-di-GMP到是給了他們一些提示，可是利用色譜結(jié)合LC/MS的方法并未發(fā)現(xiàn)所測試的細(xì)胞中存在c-di-GMP，不過獲得的一些線索顯示細(xì)胞提取物種含有某種c-di-GMP和c-di-AMP雜交的結(jié)構(gòu)——也就是c-GMP-AMP(cGAMP)?。吹饺藗兎治龇肿咏Y(jié)構(gòu)時的圖譜，讓我想起Met-ID的工作，就是通過LC/MS的分子量反推代謝產(chǎn)物可能有哪些）
Expected fragmentation patterns of cGAMP[10] 看到這里好比身臨其境，這是多么讓人激動的結(jié)構(gòu)啊，過了午夜也無法停下來，希望看到后面的故事！ 暫且不說這個小分子的結(jié)構(gòu)多么簡單、精美，之前并沒有工作報道真核細(xì)胞中存在cGAMP的分子，這將引來多少創(chuàng)新的工作，定會吸引一批有干勁的年輕人，若是得以揭示cGAMP在真核細(xì)胞中也是一種第二信使，那后續(xù)的工作就更多了。閑話不多說，作者繼續(xù)驗證cGAMP能否直接活化STING，是否還存在其他可能的DNA分子？接下來Chemists上場了，直接合成cGAMP再刺激細(xì)胞，檢測IRF3和IFN的活化水平。期間還發(fā)現(xiàn)HEK293T內(nèi)的STING的表達(dá)量過低（兩個月前的一篇文章顯示原代肝細(xì)胞中STING表達(dá)量較低，可能是易被HBV感染的原因之一[12]），不適合用分析cGAMP的效果，相比而言L929、THP1和巨噬細(xì)胞等更為合適，結(jié)果清晰明顯。文中涉及了三個實驗：1，過表達(dá)或穩(wěn)轉(zhuǎn)STING；2，KnockdownSTING的表達(dá)；3，分析STING是否可以與cGAMP直接結(jié)合。結(jié)果都顯示cGAMP可以作為細(xì)胞質(zhì)DNA激活免疫系統(tǒng)過程中的內(nèi)源第二信使。[10]
Cyclic dinucleotides in prokaryotes and metazoans [13] 不難猜測，作者一定在開展驗證實驗的同時也在尋找cGAMP上游的分子，這個難度應(yīng)該小了不少，并且作者在發(fā)現(xiàn)cGAMP的同時在體外實驗已經(jīng)看到ATP和GTP的必要性。在未找到相應(yīng)的合成酶之前，作者將之稱為cGAS。余下的過程就是將L929細(xì)胞中的亞組分用不同的方法分別純化，選用4步色譜技術(shù)分離，還有一組用生物素標(biāo)記的寡聚DNA進(jìn)行親和層析。分析收集到的不同分離組分對STING的激活能力（直接分析IRF3的二聚化），再聯(lián)合定量質(zhì)譜分析，發(fā)現(xiàn)3個蛋白經(jīng)三種路線純化后依然存在，比對序列后發(fā)現(xiàn)一個與人源OAS1催化結(jié)構(gòu)域同源的蛋白——他就是cGAS。后續(xù)的結(jié)果驗證了cGAS定位在細(xì)胞之中、可以起始I型IFN的表達(dá)、是轉(zhuǎn)染DNA或感染病毒后誘導(dǎo)IFNβ過程中必要的成員、體外酶學(xué)試驗也直接顯示cGAS可以結(jié)合DNA并且能催化ATP和GTP合成cGAMP；此外，作者還證實過表達(dá)其他DNA sensors時不會產(chǎn)生cGAMP，Knockdown以后也不會抑制cGAMP的產(chǎn)生等等。 Purification of cGAS and itsidentification by quantitative mass spectrometry[11] 到此，cGAS-cGAMP-STING通路閃耀登場，時值2013年伊始，那個時候我還在讀研二。沒想到幾年過去了，現(xiàn)在才發(fā)現(xiàn)這條和自己毫不相干的通路。現(xiàn)在看起來簡單雖說只是簡單的幾篇文章，可是他們的重要性是里程碑性的，好比同一時期的幾篇文章闡述了CRISPR/Cas9的工作機制。到現(xiàn)在已經(jīng)過去兩年多，該領(lǐng)域的成果如雨后春筍般展露，可見她的重要性。 從STING到DNA sensors 、從OAS到cGAS、從c-di-GMP到cGAMP，這段路走的并非漫長，若是站在當(dāng)時的情形之下，我想人們更關(guān)注的還是這條通路接下來能帶來哪些新奇。首次發(fā)現(xiàn)哺乳動物細(xì)胞中的cGAS和cGAMP，這就有很多工作可以開展；首次發(fā)現(xiàn)STING可以直接結(jié)合cGAMP，又給人們許多遐想的空間；STING和IFN和免疫，就會想到該通路在腫瘤、病毒、免疫等疾病中的角色；當(dāng)然，要是能直接了解她們的晶體結(jié)構(gòu)將會直接、便捷的提供重要的信息（估計目前的結(jié)構(gòu)早已被解出）。 如此新奇的發(fā)現(xiàn)，著實鼓舞人心！我想該是時候回頭看看TLR的過去和現(xiàn)在了。
OAS1–RNase L and cGAS–STING axes in innate immunesignalling and antiviral defence[13] TJ Pharmaron Sep. 07, 2016 Wed Reference 1. Paludan, S.R.and A.G. Bowie, Immune sensing of DNA.Immunity, 2013. 38(5): p. 870-80. |
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