不同的組織分離試劑,可以滿足不同的組織樣本(如內(nèi)皮細(xì)胞、結(jié)腸、神經(jīng)系統(tǒng)等)的解離需求,本文就主要針對以下幾種酶及試劑盒產(chǎn)品,為大家介紹不同的組織該選擇什么樣的酶: 膠原酶(Collagenase, type I/ type II/ type IIII/ type IV) 1. 膠原酶(Collagenase) 膠原酶(Collagenase)是一種蛋白酶,來源于溶組織梭菌的膠原酶,可以廣泛應(yīng)用于各種組織的解離,在細(xì)胞培養(yǎng)、間充質(zhì)干細(xì)胞的分離及獲取、3D及類器官培養(yǎng)、單細(xì)胞測序、腫瘤研究領(lǐng)域都有著重要的作用。 根據(jù)不同的酶活性,膠原酶可以被分為不同類型,主要包括:膠原酶I型、II型、III型、IV型,可以用做不同類型組織樣本的解離。 I型膠原酶含有比較均勻的酶活性(包括膠原酶,酪蛋白酶,梭菌蛋白酶,胰蛋白酶活性),通常用作上皮細(xì)胞、肝、肺、脂肪和腎上腺等組織來源的細(xì)胞的制備。 1.2膠原酶II型(Collagenase, type 2) II型膠原酶含有更高的梭菌蛋白酶活性,通常用于心臟、骨、肌肉、肝、甲狀腺和軟骨等組織來源的細(xì)胞制備。 1.3膠原酶III型(Collagenase, type 3) III型膠原酶,次要蛋白酶的含量最低,常用于乳腺細(xì)胞的制備。 1.4膠原酶IV型(Collagenase, type 4) 膠原酶部分產(chǎn)品清單:
優(yōu)寧維攜手Worthington,為廣大科研工作者帶來膠原酶團(tuán)購促銷福利,現(xiàn)貨產(chǎn)品,價格實(shí)惠!請點(diǎn)擊下方鏈接了解詳情: 2. 木瓜蛋白酶(Papain) 木瓜蛋白酶是一種半胱氨酸水解酶,在廣泛的條件下是穩(wěn)定和活躍的,甚至可以在高溫的條件下保持酶活性。 木瓜蛋白酶可以用于細(xì)胞培養(yǎng)中的組織解離成單細(xì)胞,用它來進(jìn)行的細(xì)胞分離時會比其他蛋白酶更溫和,因此更適用于皮質(zhì)神經(jīng)元、視網(wǎng)膜和平滑肌的組織分離,尤其適合對神經(jīng)組織進(jìn)行分解。 同時,它還可用于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)研究中的肽定位;抗體篩選或鑒定中紅細(xì)胞的表面修飾;用IgG和IgM抗體制備Fab片段抗體;對膜蛋白進(jìn)行整體增溶;從純化蛋白多糖中生產(chǎn)糖肽以及酶促傷口的清創(chuàng)。 木瓜蛋白酶部分產(chǎn)品清單:
3. 脫氧核糖核酸酶(Deoxyribonuclease I) 牛胰腺脫氧核糖核酸酶(DNase I)是一種內(nèi)切酶,它優(yōu)先分裂與嘧啶核苷酸相鄰的磷酸二酯鍵,產(chǎn)生5 ' -磷酸端多核苷酸,在3 '位置有一個游離羥基。DNase I由外分泌腺體分泌,在胰腺和腮腺中最為豐富。DNase參與細(xì)胞凋亡的過程,并被認(rèn)為在調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)肌動蛋白聚合中發(fā)揮作用。除了在分子生物學(xué)上的應(yīng)用外,DNase I還被用于治療囊性纖維化和系統(tǒng)性紅斑狼瘡 DNaseI通常有以下幾個用途:
4. 神經(jīng)組織分離試劑盒(Papain Dissociation System) Papain Dissociation System是基于美國科學(xué)家Huettner和Baughman對神經(jīng)細(xì)胞分離方法而研發(fā)出來的一套試劑(J. Neurosci., 6, 3044, 1986)。每個批次都在大鼠脊髓神經(jīng)細(xì)胞分離中進(jìn)行過性能測試,該試劑盒為每個實(shí)驗提供新鮮制備的酶溶液。 該包裝包含足夠的材料分離5個獨(dú)立的組織等分體,每個高達(dá)0.3-0.4立方厘米。對于較大的組織樣本,在每個步驟中按比例準(zhǔn)備較大體積的試劑,并按協(xié)議中所述的相同比例將其組合。 試劑盒內(nèi)容物包括: Vial 1:含有鈣,鎂,碳酸氫鹽和酚紅的EBSS溶液,此試劑的等分液用于重溶其他小瓶和制備稀釋的抑制劑溶液。 Vial 2:含有L-cysteine和EDTA的木瓜蛋白酶,每盒里包含5 × 100 unit可供一次性使用的小瓶。該試劑是0.22μm的膜過濾并在高壓滅菌瓶中凍干。用5ml EBSS溶液重溶(Vial 1)可得到每毫升 1mM的 L-cysteine和0.5mM EDTA中20units的木瓜蛋白酶溶液。 Vial 3:脫氧核糖核酸酶I (DNase I),5×2000單位,每盒里包含5 × 100 unit可供一次性使用的小瓶。該試劑是0.22μm的膜過濾并在高壓滅菌瓶中凍干。用0.5ml EBSS溶液重溶(Vial 1)可得到每毫升產(chǎn)生2000units的DNase I溶液。 Vial 4:類卵母細(xì)胞蛋白酶抑制劑Ovomucoid protease inhibitor,每包1瓶,重溶后體積為32ml。 該試劑是0.22μm的膜過濾并在高壓滅菌瓶中凍干。用32ml的 EBSS溶液重溶(Vial 1)生成的溶液的有效濃度為每毫升10mg類卵母細(xì)胞抑制劑和10mg白蛋白。 神經(jīng)組織分離試劑盒產(chǎn)品清單:
5. 組織分離廣譜酶試劑盒(Cell Isolation Optimizing System) Cell Isolation Optimizing System是一個完整的方法開發(fā)工具包,包含細(xì)胞培養(yǎng)/組織解離實(shí)驗中最常用的酶,并包含了操作、使用和優(yōu)化酶細(xì)胞分離方法的指導(dǎo)、參考資料和方法。適用于需要對不同的組織類型進(jìn)行分離獲得單細(xì)胞,并對科研經(jīng)費(fèi)有要求的實(shí)驗室。該試劑盒提供更經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的選擇 產(chǎn)品清單如下:
優(yōu)寧維也為大家提供了《組織分離指南》工具,幫助廣大科研工作者根據(jù)自己的研究樣本類型(如腸、腦、脊髓等),選擇合適的蛋白酶種類及濃度。 |
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