實驗技術(shù)貼第一彈 - 如何選擇消化酶/解離試劑？

生物_醫(yī)藥_科研 2019-09-11

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圖片來源于Worthington's

從弱到強依次為：脫氧核糖核酸酶 I，中性蛋白酶（Dispase），膠原酶 III，膠原酶 IV，膠原酶 II，透明質(zhì)酸酶，彈性蛋白酶，木瓜蛋白酶，胰蛋白酶

無酶解離試劑

無酶消化通常適用于hPSCs的傳代和維持培養(yǎng)。對hPSCs使用消化酶如膠原酶Collogenase（產(chǎn)品號 #07909）或分散酶Dispase（產(chǎn)品號 #07923）進行傳代，這些消化酶雖然很有效，但由于消化能力過強，容易在消化中出現(xiàn)大量單細胞，影響鋪板后的細胞的貼壁能力和細胞活性，使用前需要對它們進行稀釋或滅活。因此，對hPSCs的傳代，我們通常推薦使用無酶的解離試劑。

產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品號	驗證過的物種
ReLeSR?	05872 05873	人
應(yīng)用：無需手動挑選或刮擦，對hPSCs進行聚集體傳代。
GCDR（溫和細胞解離試劑）	07174	人，小鼠
應(yīng)用：對hPSCs進行常規(guī)聚集體傳代或制備單細胞懸液。
STEMdiff? Neural Rosette Selection Reagent	05832	人
應(yīng)用：用于STEMdiff?神經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)基中誘導(dǎo)分化的hPSCs中的神經(jīng)玫瑰花環(huán)選擇性的解離下來。
NeuroCult? 機械解離試劑盒（小鼠）	05707	小鼠
應(yīng)用：推薦用于源自胚胎或成年小鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)組織的神經(jīng)球的解離。

消化酶

產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品號	驗證過的物種
ACCUMAX?	07921	人，非人靈長類，大鼠，小鼠和其他
應(yīng)用：用于細胞計數(shù)時從細胞團塊中制備單細胞懸液，從原代組織中解離細胞和常規(guī)培養(yǎng)時從塑料器皿或具有粘附涂層的塑料器皿中解離細胞。
ACCUTASE?	07920	人，非人靈長類，大鼠，小鼠和其他
應(yīng)用：推薦用于常規(guī)培養(yǎng)時從塑料器皿或具有粘附涂層的塑料器皿中解離細胞。
無動物源成分細胞解離試劑盒（曾用名：MesenCult? ACF 解離試劑盒）	05426	人
應(yīng)用：優(yōu)化用于人MSCs的解離和傳代。
NeuroCult? 酶解試劑盒（成年小鼠/大鼠CNS組織）	05715	小鼠，大鼠
應(yīng)用：優(yōu)化用于成年小大鼠的中樞神經(jīng)（CNS）組織的有酶解離，制備具有高細胞活力的細胞懸液。
膠原酶I（0.25%）	07902	人，非人靈長類，大鼠，小鼠和其他
應(yīng)用：推薦用于解離組織制備細胞懸液，解離小鼠類胚體（EBs）和溶解膠原蛋白膠。
膠原酶IV（1 mg/mL）	07909	人，非人靈長類，大鼠，小鼠和其他
應(yīng)用：推薦用于在feeder上培養(yǎng)的hPSCs轉(zhuǎn)移至feeder-free的環(huán)境下。
膠原酶/透明質(zhì)酸酶，10X，3000 U/mL膠原酶，1000 U/mL透明質(zhì)酸酶	07912	人，非人靈長類，大鼠，小鼠和其他
應(yīng)用：用于人和小鼠乳腺組織的酶解離。
分散酶，Dispase（1 U/mL）	07923	人，非人靈長類，大鼠，小鼠和其他
應(yīng)用：用于多種組織的解離，也適用于對hPSCs的酶解離傳代。
分散酶，Dispase（5 U/mL）	07913	人，非人靈長類，大鼠，小鼠和其他
應(yīng)用：適用于一系列組織的解離
DNase I 溶液（1 mg/mL）	07900	人，非人靈長類，大鼠，小鼠和其他
應(yīng)用：用于減少高密度細胞懸液或解凍后的細胞懸液的細胞成團現(xiàn)象。
溫和膠原酶/透明質(zhì)酸酶，10X，10 mg/mL膠原酶，1000 U/mL透明質(zhì)酸酶	07919	小鼠
應(yīng)用：用于小鼠乳腺組織的過夜酶解離。
脾臟解離試劑	07915	小鼠，大鼠
應(yīng)用：推薦用于小鼠脾臟細胞解離。
0.25% Trypsin 檸檬酸鹽溶液	07400	人，非人靈長類，大鼠，小鼠和其他
應(yīng)用：推薦用于貼壁細胞的解離。
Trypsin-EDTA（0.05%）	07910	人，非人靈長類，大鼠，小鼠和其他
應(yīng)用：可用于獲得單細胞懸液，包括hPSCs。比常規(guī)0.25%的Trypsin-EDTA溫和。
Trypsin-EDTA（0.25%）	07901	人，非人靈長類，大鼠，小鼠和其他
應(yīng)用：將貼壁細胞，細胞聚集體或組織解離為單細胞懸液。