本篇文章我們主要對Worthington細(xì)胞分析試劑盒（PDS Kit, Inhibitor Vial）進行詳細(xì)說明。

Worthington細(xì)胞分析試劑盒（PDS Kit, Inhibitor Vial）說明書

名稱：PDS Kit, Inhibitor Vial

貨號：WBC-LK003182

用途介紹：Worthington Papain Dissociation System 是一套試劑，旨在用于 Huettner 和 Baughman 的神經(jīng)細(xì)胞分離方法 ( J. Neurosci., 6 , 3044, 1986)。這些材料是為了方便和簡單而設(shè)計的，對偶爾使用的用戶以及更有經(jīng)驗和經(jīng)常使用的用戶都很有用。每個批次都經(jīng)過大鼠脊髓神經(jīng)細(xì)胞分離性能測試，該試劑盒為每次解離提供新鮮制備的酶溶液。

穩(wěn)定性/儲存： 試劑在環(huán)境溫度下在正常運輸程序中預(yù)期的一段時間內(nèi)是穩(wěn)定的，但包裝在到達(dá)時應(yīng)冷藏。使用前，內(nèi)容物可在 2-8°C 下保存 4-6 個月。儲存在 2-8°C。

Worthington細(xì)胞分析試劑盒（PDS Kit, Inhibitor Vial）構(gòu)成：

該包裝包含足夠的材料，可以分離五份最多 0.3-0.4 cm 3的單獨組織等分試樣。對于較大的組織樣本，在每個步驟中按比例準(zhǔn)備較大體積的試劑，并按照協(xié)議中所述的相同比例將它們組合起來。

1、（Worthington）小瓶1： 含有鈣、鎂、碳酸氫鹽和酚紅的無菌厄爾平衡鹽溶液(EBSS)，每包一瓶，100 毫升。該小瓶的等分試樣用于重構(gòu)其他小瓶并制備稀釋的抑制劑溶液。在使用之間冷藏并在每次使用前用無菌 O 2 :CO 2平衡。

2、（Worthington）小瓶2：含有L-半胱氨酸和EDTA 的木瓜蛋白酶，每包5 x 100 單位一次性小瓶。該材料經(jīng) 0.22 微米膜過濾并在高壓滅菌的小瓶中凍干。用 5ml EBSS（小瓶 1）重構(gòu)的小瓶在 1mM L-半胱氨酸和 0.5mM EDTA 中產(chǎn)生每毫升 20 單位木瓜蛋白酶的溶液。需要在 37°C 下短暫孵育以確保完全溶解和活性。

3、（Worthington）小瓶3：脫氧核糖核酸酶I (DNase)，每包5 x 2000 單位一次性小瓶。
該材料經(jīng)過 0.22 微米膜過濾并在高壓滅菌小瓶中凍干。用 0.5ml EBSS（小瓶 1）復(fù)溶的小瓶產(chǎn)生每毫升 2000 單位脫氧核糖核酸酶的溶液。避免劇烈混合。

4、（Worthington）小瓶4：含有牛血清白蛋白的卵類粘蛋白蛋白酶抑制劑，每包一瓶，重構(gòu)后32ml。
該材料經(jīng)過 0.22 微米膜過濾并在高壓滅菌小瓶中凍干。用 32ml EBSS（小瓶 1）復(fù)溶的小瓶產(chǎn)生的溶液的有效濃度為每毫升 10mg 的卵類粘蛋白抑制劑和 10mg 白蛋白。該小瓶的等分試樣用于每次解離。在使用之間冷藏并在每次使用前用無菌 O 2 :CO 2平衡。在 2-8°C 儲存時，重構(gòu)后穩(wěn)定。還包括一張將顏色與 pH 值關(guān)聯(lián)起來的卡片，用作 O 2 :CO 2平衡的指南。