慢性膽汁淤積性肝病，如原發(fā)性膽汁性膽管炎（PBC）和原發(fā)性硬化性膽管炎（PSC），通常會導(dǎo)致終末期肝病，如肝硬化和肝臟惡性腫瘤。這些疾病的臨床管理具有挑戰(zhàn)性，因為它們是不斷進展的，對其發(fā)病機理的了解不足，診斷通常已是晚期，以及缺乏肝移植以外的有效治療選擇。膽管內(nèi)襯的膽管細胞是膽管病發(fā)病過程中的主要源頭。之前的研究表明，在膽汁淤積條件下，積累的膽汁酸，特別是結(jié)合的膽汁酸，通過鞘氨醇-1磷酸受體2（S1PR2）促進膽管細胞增殖。長鏈非編碼RNA（lncRNA）H19（一種印記和母系表達的基因）的異常表達在雄性和雌性Mdr2^-/-小鼠中被顯著誘導(dǎo)，這是一種模仿人類PSC廣泛使用的小鼠模型，并且導(dǎo)致Mdr2缺乏誘發(fā)肝損傷的性別差異。H19主要在膽管細胞中表達，響應(yīng)于綴合的膽汁酸介導(dǎo)的S1PR2活化。然而，H19表達對膽汁淤積性肝病的促進作用的潛在機制仍不清楚。

在過去的十年中，外泌體介導(dǎo)的細胞間通訊已經(jīng)被很好地描述了其在疾病進展中的重要性，特別是在癌癥發(fā)展中。外泌體是在生理或病理條件下由幾乎所有類型的細胞分泌的小細胞外囊泡（直徑~100 nm），并且已經(jīng)在幾乎所有種類的體液中被鑒定。外泌體成分包括非編碼RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)，與各種肝臟疾病有關(guān)。最近的研究表征了膽管細胞衍生的外泌體，并進一步證明了lncRNA H19是膽汁淤積條件下這些外泌體的重要成分。膽管細胞來源的外泌體H19通過抑制肝細胞中的小異二聚體伴侶（SHP）表達來破壞膽汁酸穩(wěn)態(tài)，這進一步促進Mdr2^-/-小鼠中的膽汁淤積性肝損傷。然而，在了解膽管細胞來源的外泌體H19如何影響其他肝細胞，特別是肝星狀細胞（HSC）方面，仍然有很多需要探究；HSC在肝纖維化的進展中起著重要作用。

美國弗吉尼亞聯(lián)邦大學(xué)周慧萍（Huiping Zhou）教授近期在Hepatology雜志上發(fā)表文章，使用H19 KO膽管結(jié)扎（BDL）和Mdr2和H19雙敲除（DKO）小鼠模型以及人PSC和PBC肝臟樣本，探究了膽管細胞來源的外泌體H19在HSC活化和膽汁淤積性肝纖維化進展中的作用。結(jié)果表明，肝臟H19表達水平與小鼠膽汁淤積性肝損傷模型，人PSC和PBC患者血清外泌體H19水平和肝纖維化嚴(yán)重程度相關(guān)。此外，膽管細胞分泌的外泌體是肝H19的主要來源，并且在體外和體內(nèi)促進HSC活化和增殖中起關(guān)鍵作用。

膽管細胞來源的外泌體H19對膽汁淤積性肝纖維化過程中HSC活化和增殖的促進作用機制示意圖。HSC：肝星狀細胞；ECM：細胞外基質(zhì)

該研究首次通過外泌體介導(dǎo)的通訊在膽汁淤積性肝纖維化的發(fā)病機制中建立了膽管細胞和HSC之間的直接聯(lián)系。研究結(jié)果表明，膽管細胞來源的外泌體可被所有肝細胞攝取，但優(yōu)先被靜息和活化的HSC攝取。模擬膽管細胞和HSC之間近端通信的體外原代細胞培養(yǎng)研究進一步表明，膽管細胞衍生的外泌體被靜止和活化的HSC迅速吸收。最近的研究表明，從纖維化Mdr2^-/-小鼠中純化的血清外泌體主要靶向腎臟和肝臟，在尾靜脈注射后在腸、脾和心臟中具有最小量。然而，膽管細胞來源的外泌體主要靶向肝臟和腎臟，然后是腸和肺，并且在心臟和脾臟中幾乎檢測不到。這些數(shù)據(jù)表明，在血清外泌體中，非膽管細胞衍生的外泌體可能被腎臟、心臟和脾臟吸收，但膽管細胞衍生的外泌體主要靶向肝臟。腎臟中血清外泌體和膽管細胞衍生的外泌體的富集表明腎臟可能是這些小尺寸細胞外囊泡的主要清除位點。流式細胞術(shù)測定進一步顯示，在尾靜脈注射后3小時，超過50％的靜止HSC和超過70％的活化的HSC快速加載膽管細胞衍生的外泌體。與此同時，只有約20％的肝細胞和肝臟炎癥細胞攝取了膽管細胞衍生的外泌體。這些結(jié)果進一步表明，靜息和活化的HSC都是膽管細胞衍生的外泌體的主要受體細胞。然而，膽管細胞衍生的外泌體靶向特異細胞類型的潛在機制仍不清楚。外泌體內(nèi)化可以通過直接融合、吞噬作用或配體-受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用介導(dǎo)。外泌體的細胞特異性內(nèi)化取決于外泌體表面粘附蛋白（包括膜聯(lián)蛋白、整合素和糖蛋白）與受體細胞上的表面分子之間的相互作用。值得注意的是，先前的研究表明，α6β4和α6β1整合素介導(dǎo)肺駐留成纖維細胞選擇性攝取腫瘤來源的外泌體，以促進腫瘤的肺轉(zhuǎn)移。同時，富含αvβ5整合素的外泌體靶向Kupffer細胞，從而介導(dǎo)肝臟靶向性。然而，由HSC和成纖維細胞攝取膽管細胞衍生的外泌體所涉及的潛在粘附和內(nèi)化機制仍有待鑒定。

總之，本研究表明，在膽汁淤積條件下，膽管細胞來源的外泌體優(yōu)先被HSCs攝取。外泌體H19增強HSC活化和增殖，從而促進肝纖維化。與之前的研究結(jié)果一致，本研究表明，膽管細胞來源的外泌體H19可用作膽汁淤積性肝纖維化的潛在診斷標(biāo)志物和治療靶點。

參考文獻：

Liu R1,Li X1, Zhu W1, Wang Y, Zhao D, Wang X, Gurley EC, Liang G, Chen W, Lai G,Pandak WM, Lippman HR, Bajaj JS, Hylemon PB, Zhou H. Cholangiocyte-derived exosomal LncRNA H19 promotes hepatic stellate cell activation and cholestatic liver fibrosis. Hepatology. 2019 Apr 15. doi: 10.1002/hep.30662. [Epubahead of print]

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