長(zhǎng)的非編碼RNA（lncRNA）在各種癌癥類(lèi)型的腫瘤發(fā)生和轉(zhuǎn)移中極為復(fù)雜。盡管如此，lncRNA在非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）中的詳細(xì)分子機(jī)制仍不是不確定。

　　2020年9月2日，武漢大學(xué)健康學(xué)院孫承操副教授、李得加教授和何啟強(qiáng)教授課題組題共同合作在Genome Medicine 在線發(fā)表題為“FOXC1-mediated LINC00301 facilitates tumor progression and triggers an immune-suppressing microenvironment in non-small cell lung cancer by regulating the HIF1α pathway”的研究論文，該研究揭示了LINC00301在NSCLC臨床標(biāo)本、細(xì)胞和動(dòng)物水平中的致癌作用，詳細(xì)闡述了LINC00301在NSCLC腫瘤發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移和免疫抑制微環(huán)境形成中的具體作用和分子調(diào)控機(jī)制，為NSCLC的腫瘤發(fā)生和免疫治療提供了新的認(rèn)識(shí)。結(jié)合LNA技術(shù)， LINC00301具備作為NSCLC診斷治療靶點(diǎn)的潛能。

　　非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）是全球癌癥死亡的首要誘因，因此，闡明NSCLC的發(fā)生和發(fā)展機(jī)制，提高NSCLC的診斷和治療迫在眉睫。長(zhǎng)鏈非編碼RNA（lncRNA）是一類(lèi)長(zhǎng)度大于200個(gè)核苷酸單位（nt）的不具備完整蛋白編碼能力的RNA，長(zhǎng)期以來(lái)被認(rèn)為是基因“噪音”。隨著人類(lèi)基因組計(jì)劃和二代測(cè)序的興起，lncRNA在人類(lèi)疾病尤其是癌癥中所扮演的角色正被逐漸揭露。最近的研究發(fā)現(xiàn)它們廣泛參與了多種癌癥的病理生理過(guò)程，并有望作為臨床預(yù)后或診斷標(biāo)志物。隨著鎖核酸（Locked Nucleic Acid, LNA）技術(shù)的發(fā)展，lncRNA同時(shí)具備成為臨床治療靶標(biāo)的潛能。

　　LINC00301與EZH2蛋白之間相互結(jié)合位點(diǎn)的確定

　　在本次研究中，研究組首次發(fā)現(xiàn)并報(bào)道了一個(gè)全新的lncRNA, LINC00301，其在NSCLC腫瘤樣本和細(xì)胞系中特異性顯著高表達(dá)，并與NSCLC病人的預(yù)后密切相關(guān)。體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明，LINC00301在NSCLC中促進(jìn)細(xì)胞增殖、遷移和侵襲，抑制細(xì)胞周期阻滯、凋亡。

　　機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)錄因子FOXC1特異性地介導(dǎo)了NSCLC中LINC00301的表達(dá)。通過(guò)RNA原位雜交實(shí)驗(yàn)（FISH）發(fā)現(xiàn)LINC00301同時(shí)存在于NSCLC的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中，但細(xì)胞核中LINC00301的比值高于細(xì)胞質(zhì)中所占的比值，故而推測(cè)LINC00301將同時(shí)在胞漿和胞核處發(fā)揮調(diào)控作用。

　　通過(guò)生物信息學(xué)預(yù)測(cè)和RNA分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)LINC00301的第83-123 核苷酸位點(diǎn)可直接與調(diào)味增強(qiáng)子同源物2 (EZH2)的第612-727氨基酸位點(diǎn)特異性的結(jié)合，LINC00301將與EZH2形成復(fù)合體并募集后者富集于ELL蛋白相關(guān)因子2 (EAF2)的啟動(dòng)子上，促進(jìn)EAF2基因啟動(dòng)子的第1395-1388 核苷酸位點(diǎn)發(fā)生H3K27me3，從而抑制EAF2的轉(zhuǎn)錄表達(dá)。而考慮到EAF2能夠直接結(jié)合穩(wěn)定von Hippel-Lindau (pVHL) 蛋白，因此，在NSCLC細(xì)胞中，下調(diào)的EAF2通過(guò)調(diào)控pVHL增加HIF1α的表達(dá)。

　　此外，LINC00301在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)還可以作為miR-1276的競(jìng)爭(zhēng)內(nèi)源性RNA (ceRNA)，緩解miR-1276對(duì)HIF1α的翻譯抑制，最終也起到上調(diào)NSCLC細(xì)胞中HIF1α的表達(dá)。與此同時(shí)， LINC00301通過(guò)上調(diào)HIF1α信號(hào)途徑促進(jìn)NSCLC細(xì)胞分泌TGF-β, 后者募集并增加調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cell, Treg)在腫瘤微環(huán)境的富集，降低效應(yīng)性CD8+ Granzyme B+ T細(xì)胞在腫瘤中的數(shù)量，在NSCLC中形成免疫抑制微環(huán)境。

　　綜上所述，本研究揭示了LINC00301在NSCLC臨床標(biāo)本、細(xì)胞和動(dòng)物水平中的致癌作用，詳細(xì)闡述了LINC00301在NSCLC腫瘤發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移和免疫抑制微環(huán)境形成中的具體作用和分子調(diào)控機(jī)制，為NSCLC的腫瘤發(fā)生和免疫治療提供了新的認(rèn)識(shí)。結(jié)合LNA技術(shù)， LINC00301具備作為NSCLC診斷治療靶點(diǎn)的潛能。

　　長(zhǎng)鏈非編碼RNA LINC00301在非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）中的作用模式圖

　　文章受到國(guó)家自然科學(xué)基金（81802285）、博士后創(chuàng)新人才支持計(jì)劃（BX201700178）、中國(guó)博士后科學(xué)基金（2017M620340）、湖北省衛(wèi)計(jì)委醫(yī)學(xué)科研基金（WJ2019Q039）、中央高校專(zhuān)項(xiàng)基礎(chǔ)研究基金（2015305020202，2042018kf0025）、武漢市衛(wèi)計(jì)委醫(yī)學(xué)科研基金（WG18Q01）、武漢大學(xué)人才啟動(dòng)基金、武漢大學(xué)健康學(xué)院自主科研基金(ZZKY0014)以及職業(yè)危害識(shí)別與控制湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)放基金（OHIC2017Y02）的支持。健康學(xué)院孫承操副教授、2017級(jí)博士研究生朱偉和武漢市職業(yè)病防治院李淑雋醫(yī)師為共同第一作者，孫承操副教授、李得加教授和何啟強(qiáng)教授為共同通訊作者。本研究同時(shí)受到了德克薩斯大學(xué)M.D. Anderson腫瘤中心Liuqing Yang教授和Chunru Lin教授的重要指導(dǎo)意見(jiàn)。

　　參考消息：

　　https://genomemedicine./articles/10.1186/s13073-020-00773-y