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二十四型第一型，增殖 如何用實(shí)驗(yàn)手段知道是否增殖呢？可以這么干。。。。 分子層面，可以檢測(cè)和增殖有關(guān)的分子標(biāo)志物，比如MCM，ki-67，PCNA等。 MCM比較新研究室了十幾年，而且假陽(yáng)性少。PCNA在細(xì)胞DNA修復(fù)的時(shí)候也會(huì)增加所以會(huì)有假陽(yáng)性，ki-67在營(yíng)養(yǎng)不足的時(shí)候也會(huì)增加也會(huì)有假陽(yáng)性，這倆家伙上升不一定有細(xì)胞增殖。腫瘤干細(xì)胞分子標(biāo)志物比如胰腺癌的CD44可以間接反映腫瘤細(xì)胞的增殖能力是否上升。抑癌基因的表達(dá)降低也可以間接反映腫瘤細(xì)胞的增殖能力上升，比如P53和PTEN。 細(xì)胞層面，可以選用MTT比色法和Brde染色法，這兩種都是一種染色的方法，Brde使用標(biāo)記了的胸腺嘧啶代替普通胸腺嘧啶，DNA合成后整合入DNA，再用單克隆抗體免疫熒光就可以知道細(xì)胞在增值。RTCA是實(shí)時(shí)細(xì)胞分析法，可以實(shí)時(shí)知道細(xì)胞的增值情況，別的就只能知道開(kāi)始和結(jié)束的兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)。 普通細(xì)胞增殖受到別的細(xì)胞信號(hào)調(diào)控，但是腫瘤細(xì)胞不受調(diào)控，可以獨(dú)自由一個(gè)腫瘤細(xì)胞增殖為一個(gè)細(xì)胞克隆，稱為克隆形成能力?？梢允褂每寺⌒纬蓪?shí)驗(yàn)檢測(cè)。可以評(píng)估腫瘤細(xì)胞的增殖。 組織層面，也還是MCM，ki-67，PCNA等等。。。還有形態(tài)學(xué)。。 動(dòng)物層面，先做個(gè)成瘤模型，記錄瘤子的大小和重量。然后可以切下來(lái)做勻漿后跑WB或?qū)崟r(shí)熒光定量PCR來(lái)檢測(cè)分子標(biāo)志物是否上升，也可以切片做免疫組化，還可以觀察形態(tài)學(xué)變化。
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