誘導(dǎo)劑

工作濃度

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二磷酸腺苷

低劑量：

1.0-5.0uM; 

高劑量：

10.0 uM

• 二磷酸腺苷(ADP)與血小板表面的ADP受體結(jié)合，致鈣內(nèi)流和血小板變形，從而促成第一相聚集波。第二相聚集波則反映了血小板貯存顆粒中ADP的釋放。

• 低劑量ADP只誘導(dǎo)第一相聚集，其作用是可逆的。ADP和腎上腺素被認(rèn)為是弱血小板激動劑。

• ADP與兩個G蛋白偶聯(lián)受體：P2Y1和P2Y12結(jié)合。ADP與P2Y1受體結(jié)合后通過動員鈣離子，誘導(dǎo)變形并引發(fā)第一相血小板聚集。P2Y12受體被認(rèn)為是主要的ADP受體，通過抑制腺苷酸環(huán)化酶而導(dǎo)致血小板的完全聚集。

• P2Y12受體也是氯吡格雷的靶點。而阿司匹林等非甾體抗炎藥會抑制ADP誘導(dǎo)的第二相聚集。

膠原

1-4 ug/mL

• 膠原與GPVI和GPIa/IIa受體結(jié)合，誘導(dǎo)顆粒釋放、TXA2生成，并參與血小板粘附，然后持續(xù)激活GPIIb-IIIa。

• 在PRP中加入膠原激動劑后可出現(xiàn)滯后期，通常<1分鐘。

• 低濃度可用于檢測阿司匹林和其他COX-1抑制劑導(dǎo)致的血小板功能受損。如果低濃度顯示聚集性受損，則再使用較高濃度。

瑞斯托霉素

低劑量：

0.5-0.6mg/mL;

高劑量：

1.5-5.0 mg/mL

• 瑞斯托霉素（通常不是低劑量）主要通過VWF和GPIb-IX-V復(fù)合物引起血小板凝集（而不是聚集）。【血小板聚集需要通過GpIIb-IIIa復(fù)合物將纖維蛋白原與血小板結(jié)合?！?/p>

腎上腺素

5-10 uM

• 腎上腺素與血小板表面的α2腎上腺素能受體結(jié)合，導(dǎo)致腺苷酸環(huán)化酶的抑制和鈣離子的釋放。腎上腺素對血小板的聚集作用與ADP相似：首先誘導(dǎo)第一相聚集、繼而ADP從血小板致密體釋放并促進(jìn)第二相持續(xù)聚集。與ADP一樣，阿司匹林和非甾體抗炎藥可抑制第二相聚集。腎上腺素被認(rèn)為是一種弱激動劑。然而，α2腎上腺素能信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的缺陷與出血性疾病有關(guān)。

• 由于腎上腺素受體數(shù)量的自然變化，一小部分人的血小板并不總是表現(xiàn)出對腎上腺素的完全聚集，但這些人沒有血小板缺陷。

花生四烯酸

500ug/mL

• 花生四烯酸是血小板內(nèi)血栓素A2[TXA2]的前體。花生四烯酸通過環(huán)氧化酶和血栓素合成酶轉(zhuǎn)化為TXA2。TXA2是一種強(qiáng)效血小板聚集誘導(dǎo)劑，可導(dǎo)致顆粒釋放及更多TXA2生成，從而持續(xù)激活GPIIb-IIIa。

凝血酶

低劑量：

50 nmol/L; 

高劑量：

100 nmol/L

• 凝血酶是血小板最有效的生理活化劑，蛋白酶激活受體1（PAR1）和4（PAR4）被凝血酶激活。PAR1和PAR4是G蛋白偶聯(lián)受體的7跨膜組的成員，其由N-末端結(jié)構(gòu)域中的單個裂解激活，以產(chǎn)生新的N-末端，其激活G亞基和細(xì)胞內(nèi)信號。

• 凝血酶在低濃度[50nmol/L]時誘導(dǎo)血小板聚集，但在此劑量下，凝血酶不足以誘導(dǎo)完全聚集而是與血小板結(jié)合并誘導(dǎo)其形狀改變。在較高濃度（100nmol/L）時，凝血酶可誘導(dǎo)完全聚集。

U46619（TXA2類似物）

1nM

• U46619是一種強(qiáng)效且穩(wěn)定的TXA2激動劑。

典型疾病/臨床狀況

血小板聚集試驗特征

血小板無力癥/無纖維蛋白原血癥

• 除瑞斯托霉素外，所有激動劑均無聚集或明顯受損。瑞斯托霉素誘導(dǎo)的凝集反應(yīng)可發(fā)生，但由于與纖維蛋白原不能結(jié)合，不能誘導(dǎo)血小板聚集，因此最大聚集率會低于正常對照（如下圖1）。
  

• 無纖維蛋白原血癥也有類似的結(jié)果。

Bernard  Soulier綜合征或VWD

• 瑞斯托霉素誘導(dǎo)的血小板凝集缺乏或顯著降低。（如下圖2）
  

貯存池病或血小板釋放功能缺陷

• ADP、腎上腺素和膠原僅能誘發(fā)第一相聚集，瑞斯托霉素僅能部分誘導(dǎo)凝集，提示血小板顆粒缺乏或釋放障礙。（如下圖3）
  

阿司匹林效應(yīng)（或COX通路缺陷）

• 花生四烯酸不能誘導(dǎo)聚集，ADP僅能誘導(dǎo)第一相聚集，膠原不能誘導(dǎo)聚集或聚集率降低。

氯吡格雷

• ADP不能誘導(dǎo)聚集

2B型VWD或血小板型VWD

• 低劑量瑞斯托霉素可誘導(dǎo)聚集。