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結(jié)核病是嚴(yán)重威脅人類健康的傳染性疾病，2020年全球約新發(fā)1000萬例結(jié)核病，中國新發(fā)結(jié)核病約80萬例，約20%-30%的人口感染結(jié)核分枝桿菌。目前結(jié)核病的診斷技術(shù)主要有痰涂片染色、細(xì)菌培養(yǎng)法、免疫學(xué)檢測及結(jié)核分枝桿菌PCR擴(kuò)增法等，但是病原學(xué)陽性率在臨床上仍受到一定限制。由于在臨床中部分患者少痰、無痰或是痰內(nèi)無法檢測到結(jié)核桿菌，菌陰性肺結(jié)核在結(jié)核病患者中占有很大比例。在全國第五次肺結(jié)核流行病學(xué)調(diào)查中，痰菌陰性的肺結(jié)核患者占肺結(jié)核患者的60%。依據(jù)2017年發(fā)布的肺結(jié)核診斷行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，無病原學(xué)證據(jù)的疑似患者需要依靠臨床診斷給出治療依據(jù)，結(jié)核分枝桿菌特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)等免疫學(xué)檢測技術(shù)已成為結(jié)核病診斷的重要輔助手段。γ-干擾素釋放試驗(yàn)（Interferon Gamma Release Assays, IGRAs）其原理是以結(jié)核特異性抗原ESAT-6、CFP-10和（或）其它特異性抗原刺激外周血中特異致敏 T 細(xì)胞，通過檢測釋放 γ-干擾素（IFN-γ）的特異性淋巴細(xì)胞數(shù)量或直接檢測IFN-γ水平來判斷機(jī)體是否感染結(jié)核分枝桿菌，已經(jīng)成為結(jié)核病輔助診斷的重要工具.但在老年人、免疫低下人群中的敏感性尚待提高，而且該技術(shù)存在檢測周期長、無法當(dāng)天出結(jié)果以及檢測過程中人工操作較多等缺點(diǎn)。因此尋找新的診斷方法在菌陰性肺結(jié)核早期診斷或是在特殊人群（如免疫力低下患者）中快速發(fā)現(xiàn)結(jié)核感染有重要意義。近年來，越來越多的科研學(xué)者不斷研究除IFN-γ之外的其他靶標(biāo)在結(jié)核分枝桿菌特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)中的應(yīng)用，其中對于IP-10的研究取得了最顯著的進(jìn)展。而且隨者對分子檢測技術(shù)其快速靈敏的特質(zhì)研究，將分子檢測應(yīng)用到細(xì)胞免疫反應(yīng)檢測對提高結(jié)核感染檢測的靈敏度，打破傳統(tǒng)細(xì)胞免疫技術(shù)在時(shí)間和操作上的客觀限制，有重要研究價(jià)值。IP-10作為靶標(biāo)的產(chǎn)生機(jī)制和表達(dá)特點(diǎn)：干擾素誘導(dǎo)蛋白-10（Interferon gamma-induced protein 10, IP-10）一種高表達(dá)的趨化因子，在結(jié)核抗原刺激下IP-10表達(dá)量顯著高于IFN-γ。自2007年開始，IP-10逐漸成為一種新的結(jié)核病診斷標(biāo)識物。 IP-10 mRNA 是結(jié)核細(xì)胞免疫反應(yīng)更理想的靶標(biāo) 既往研究都是應(yīng)用ELISA方法直接檢測外周血或經(jīng)過結(jié)核特異抗原刺激后的外周血中的IP-10蛋白含量，尚未有基于IP-10在mRNA水平的瞬時(shí)表達(dá)量在結(jié)核分枝桿菌感染和結(jié)核病診斷中的應(yīng)用。研究發(fā)現(xiàn)游離γ-干擾素激活JAK/STAT1通路后IP-10 mRNA大量表達(dá)，結(jié)核抗原刺激2.5-8小時(shí)內(nèi)，IP-10在轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)量能夠上調(diào)百倍左右，因此IP-10 mRNA的高表達(dá)量可能有助于提高診斷敏感性。蘇州創(chuàng)瀾生物科技有限公司全新自主研發(fā)的IP-10.TB產(chǎn)品在分子檢測平臺上設(shè)計(jì)采用了產(chǎn)生更快，表達(dá)量更高的IP-10 mRNA 為檢測靶標(biāo)，優(yōu)化結(jié)核特異性的刺激抗原肽段，使用靈敏度更高的QPCR檢測方法來保證結(jié)果更準(zhǔn)確。作為將IP-10 mRNA檢測靶標(biāo)運(yùn)用到商業(yè)化中的結(jié)核分枝桿菌特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)檢測試劑盒，IP-10.TB有以下優(yōu)勢： ·受免疫狀態(tài)影響較小，在免疫低下（受損）人群中有更優(yōu)異的臨床表現(xiàn) ·創(chuàng)新性的使用IP-10 mRNA為檢測靶標(biāo)，優(yōu)效檢測結(jié)果： 特異性：>98% 臨床靈敏度：>90% ·待檢測靶標(biāo)IP-10 mRNA刺激后瞬時(shí)高倍數(shù)表達(dá)，排除本底干擾，不受基礎(chǔ)細(xì)胞因子分泌水平的影響，并長時(shí)間保持穩(wěn)定 ·全自動(dòng)PCR檢測平臺，大幅度降低人員依賴性 ·當(dāng)日即得結(jié)果，打破傳統(tǒng)IGRA檢測隔日等待的局限 ·結(jié)果判讀客觀準(zhǔn)確，無主觀因素影響 ·不確定結(jié)果比例極低，檢測人群覆蓋廣泛 除了菌陰肺結(jié)核外，在臨床中結(jié)核病患者病原學(xué)陽性依然是實(shí)驗(yàn)室診斷金標(biāo)準(zhǔn)，但是由于痰培養(yǎng)時(shí)間周期長（4-8周），痰涂片敏感性低于30%，遠(yuǎn)不能滿足國家“十三五結(jié)核病防治規(guī)劃“肺結(jié)核患者病原學(xué)陽性率達(dá)到50%以上的需求。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，結(jié)核病分子流行病學(xué)的研究，分子生物學(xué)技術(shù)在結(jié)核病研究中廣泛的應(yīng)用，2017年肺結(jié)核診斷行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中分子生物學(xué)陽性可作為結(jié)核診斷確診依據(jù)。PCR技術(shù)已在結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室診斷開展應(yīng)用，將結(jié)核病和耐藥結(jié)核病的診斷從幾周減少到幾小時(shí)。耐藥結(jié)核病傳播是耐藥結(jié)核病流行的主要驅(qū)動(dòng)因素，而傳播預(yù)防的基礎(chǔ)是對所有耐藥結(jié)核患者進(jìn)行早期診斷和迅速開始有效治療。當(dāng)患者感染利福平耐藥或耐多藥( 同時(shí)對利福平和異煙肼耐藥) 的結(jié)核分枝桿菌時(shí)，患者的臨床管理將更為復(fù)雜，但是全球僅有 33% 的新發(fā)菌陽結(jié)核患者開展了抗結(jié)核藥物敏感性檢測。傳統(tǒng)藥物敏感實(shí)驗(yàn)（DST）培養(yǎng)時(shí)間長時(shí)間較長（約4-6周），且結(jié)果容易受含MTB接種量、細(xì)菌活力等多方面影響。相比于傳統(tǒng)的培養(yǎng)和表型耐藥方法，使用快速分子方法檢測可以快速診斷結(jié)核/耐藥結(jié)核，采取有效治療后可以消除傳染性，并有效縮短培養(yǎng)轉(zhuǎn)化時(shí)間，提升治療效果具有重要的臨床價(jià)值，對降低結(jié)核和耐藥結(jié)核的發(fā)病率具有重要意義。如何應(yīng)用分子診斷技術(shù)快速高效的檢測出結(jié)核桿菌并在第一時(shí)間判讀是否耐藥，是阻斷結(jié)核病傳播的重要手段，也是目前科研的主要研究方向。為了更快的在結(jié)核病早期發(fā)現(xiàn)傳染源，確診結(jié)核病，明確結(jié)核病耐藥情況，幫助臨床更好的實(shí)施治療，創(chuàng)瀾生物研發(fā)的全新產(chǎn)品Innowave MTB-RIF：結(jié)核分枝桿菌和利福平耐藥突變檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）采用熒光定量PCR方法可以實(shí)現(xiàn)一次痰標(biāo)本取樣對結(jié)核分枝桿菌和利福平耐藥同時(shí)檢測，有效提升結(jié)核病病原學(xué)陽性率、報(bào)告利福平耐藥結(jié)果同時(shí)預(yù)測耐多藥結(jié)核，并且達(dá)到國家“十三五”規(guī)劃的結(jié)核病患者病原學(xué)陽性檢出率50%以上的要求。結(jié)核病的診斷是結(jié)核病防治工作的重點(diǎn)，結(jié)核分枝桿菌特異性細(xì)胞免疫檢測與結(jié)核分枝桿菌病原體聯(lián)合檢測可顯著提高結(jié)核病檢測的敏感性和特異性，并縮短了檢測時(shí)間, 同步發(fā)現(xiàn)結(jié)核耐藥，為臨床診療提供有效證據(jù)有著重要意義。作為專注于感染性疾病診斷的創(chuàng)新公司，創(chuàng)瀾生物在結(jié)核病檢測中不斷探索，提供多方面檢測平臺，滿足臨床需求。相信在不久的將來，在分子檢測領(lǐng)域中，創(chuàng)瀾生物會在更廣泛的感染領(lǐng)域檢測提供更多更好的診斷產(chǎn)品，為臨床檢測提供更多的幫助！文章內(nèi)容由蘇州創(chuàng)瀾生物科技有限公司提供 
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