住院醫(yī),不租房吃盒飯,除了查房、寫病歷和助刀,忙完就可以趟進(jìn)值班室的小床,住房也帶不來此等安逸。每個(gè)月多數(shù)工資可以用來加餐,雞腿、鹵蛋和紅燒牛肉面。若要寫國(guó)自然和做實(shí)驗(yàn),一不小心變成主治,立即落入買房買車結(jié)婚的人生陷阱中,何苦呢?
我的朋友老王,目前就陷入了這樣的陷阱中。前兩年國(guó)自然搭上自噬熱點(diǎn),現(xiàn)在每天愁著做實(shí)驗(yàn)發(fā)文章,萬一文章發(fā)出來還可能升成主治,哪有我這種住院醫(yī)雞腿、鹵蛋和紅燒牛肉面的日子舒坦? 自從獲得諾獎(jiǎng)之后,自噬研究就一直灰常熱門,它參與生命活動(dòng)的方方面面,比如腫瘤、炎癥、免疫應(yīng)答、氧化應(yīng)激等。除了研究自噬現(xiàn)象本身,大家更多的是將自噬與各種生命活動(dòng)或者疾病結(jié)合起來,把自噬作為這些方向的一個(gè)機(jī)制來研究。 今天先來為大家劃一下自噬研究思路的重點(diǎn)??! 在一篇近年發(fā)表的Cell論文中(文章名:Fusobacterium nucleatum Promotes Chemoresistance to Colorectal Cancer by Modulating Autophagy),也是運(yùn)用了這一思路。 自噬關(guān)鍵基因的人為干預(yù) 自噬關(guān)鍵基因變化的分子機(jī)制以及跟對(duì)應(yīng)表型的關(guān)系 自噬表型研究中,我們倡導(dǎo)的“自噬研究的金指標(biāo)”----包括LC3剪切的變化、電鏡直接觀察到自噬囊泡、熒光蛋白標(biāo)記的LC3監(jiān)測(cè)自噬流。 衡量自噬的三個(gè)“黃金標(biāo)準(zhǔn)”,分別是LC3的翻譯后加工及脂化修飾(圖A)、利用電鏡直接觀察自噬小體和自噬溶酶體的多少(圖B)、熒光蛋白標(biāo)記的LC3監(jiān)測(cè)自噬流(圖C)。 熒光蛋白標(biāo)記的LC3監(jiān)測(cè)自噬流,即用漢恒生物的mRFP-GFP-LC3融合蛋白的腺病毒,感染細(xì)胞。mRFP 用于標(biāo)記及追蹤LC3,GFP 的減弱可指示溶酶體與自噬小體的融合形成自噬溶酶體,即由于GFP 熒光蛋白對(duì)酸性敏感,當(dāng)自噬體與溶酶體融合后GFP 熒光發(fā)生淬滅,此時(shí)只能檢測(cè)到紅色熒光 就像這樣: 通過以上解析,是不是研究思路清晰了很多!當(dāng)然,除了LC3之外,還有其他很多基因參與了自噬過程,例如自噬囊泡形成的相關(guān)基因ATG家族等,我們也整理了一些基因的相關(guān)功能,協(xié)助大家進(jìn)一步研究: 漢恒生物可提供:自噬LC3雙標(biāo)、單標(biāo)病毒,以及自噬相關(guān)基因的病毒、質(zhì)粒。 別溜別溜,福利來了! happy 福利NO.1 雙12只砍價(jià),不砍手! 漢恒生物王牌產(chǎn)品:mGFP-RFP-LC3自噬雙標(biāo)腺病毒、慢病毒,終于可以砍價(jià)了?。?!(上文的Cell就使用了漢恒的自噬雙標(biāo)腺病毒)。還有500元優(yōu)惠券,等你來搶! |
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