分子病理學(xué)技術(shù)之熒光原位雜交 分子病理學(xué)是病理學(xué)的一個(gè)重要分支，其在疾病的診斷、靶向治療及預(yù)后預(yù)測(cè)等方面的作用日益凸顯。

分子病理學(xué)技術(shù)主要包括三大類：

1.熒光原位雜交（Fluorescence in situ hybridization, FISH)；

2.測(cè)序技術(shù)（包括Sanger測(cè)序、二代測(cè)序等）；

3.基于PCR的技術(shù)（包括PCR、RT-PCR、實(shí)時(shí)定量PCR及數(shù)字PCR等）。

雖然以上每一類技術(shù)都有其特定的檢測(cè)特點(diǎn)及范圍，但作為與病理形態(tài)學(xué)聯(lián)系最為緊密的FISH技術(shù)，迄今為止，在淋巴瘤、白血病、乳腺癌、胃癌等疾病的臨床應(yīng)用中，依然無法替代。 FISH是一種基于核酸雙鏈互補(bǔ)的原則，將熒光標(biāo)記的核酸探針與細(xì)胞核內(nèi)靶DNA進(jìn)行雜交，通過熒光顯微鏡觀察熒光信號(hào)來判斷靶DNA數(shù)目和結(jié)構(gòu)變化的技術(shù)。其基本原理是：核酸變性-退火-復(fù)性。 

該技術(shù)有很高的敏感性和特異性，可用于檢測(cè)淋巴瘤、白血病及其它各種實(shí)體瘤細(xì)胞的染色體/基因數(shù)目和結(jié)構(gòu)的變化，包括染色體易位、非整倍體變化，基因缺失、擴(kuò)增等分子遺傳學(xué)改變，為臨床病理工作中疾病的診斷、分類、靶向治療及預(yù)后預(yù)測(cè)提供準(zhǔn)確的分子遺傳學(xué)信息。 

對(duì)醫(yī)院來說，F(xiàn)ISH是分子檢測(cè)領(lǐng)域技術(shù)和設(shè)備要求門檻最低的平臺(tái)，只需一臺(tái)雜交儀和一臺(tái)熒光顯微鏡即可開展。不像PCR需要認(rèn)證的實(shí)驗(yàn)室，也不像二代測(cè)序需要強(qiáng)大的數(shù)據(jù)分析能力。然而，'第三類體外診斷試劑管理?xiàng)l例'對(duì)于FISH探針的限定，曾經(jīng)在一定程度上有礙這一技術(shù)的應(yīng)用。 

近來，國(guó)家明文發(fā)布，對(duì)于非明確診斷意義或臨床指導(dǎo)用藥的體外診斷試劑，不再按第三類體外診斷試劑進(jìn)行管理，這也就意味著許多FISH探針不再需要'第三類體外試劑'的報(bào)證即可在醫(yī)院病理科應(yīng)用，這對(duì)臨床來說絕對(duì)是巨大的好消息！ 目前除了HER2 及ALK等少數(shù)探針外，絕大部分探針均無需'三類證'，這對(duì)于滿足臨床對(duì)FISH技術(shù)的迫切需求具有重大意義。 

分子病理診斷的高速發(fā)展也得益于國(guó)家的大力支持，從三、五年前無人知曉到現(xiàn)在的路人皆知，在國(guó)家的大力支持下，它必將為人民帶來更大的福音。十九大也明確提出，分子（基因）檢測(cè)將逐漸納入醫(yī)保范疇。 可以預(yù)見，不久的將來，F(xiàn)ISH技術(shù)將會(huì)迎來一個(gè)巨大的發(fā)展空間，也會(huì)普及到全國(guó)各地的三級(jí)甚至二級(jí)醫(yī)院！Are you ready ？ 那么問題來了，如果一個(gè)科室沒有開展FISH檢測(cè)，也沒有FISH經(jīng)驗(yàn)，又想開展這一檢測(cè)，該怎么辦呢？敬請(qǐng)期待下期內(nèi)容！