自身抗體檢測(cè)是自身免疫病診治中的重要工具，隨著早期診斷、規(guī)范化治療的開(kāi)展，自身抗體檢測(cè)在疾病診斷、監(jiān)測(cè)及預(yù)后評(píng)估中發(fā)揮的作用也日益受到重視。 但是，由于目前自身抗體檢測(cè)缺乏統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)化檢驗(yàn)方法，加上工作條件、傳統(tǒng)診療習(xí)慣、結(jié)果判讀以及醫(yī)療保險(xiǎn)限制等因素的影響，導(dǎo)致自身抗體檢測(cè)在臨床應(yīng)用上存在著不統(tǒng)一、不規(guī)范現(xiàn)象。因此，制定適合我國(guó)國(guó)情的臨床應(yīng)用建議十分必要，可為廣大臨床醫(yī)師和檢驗(yàn)醫(yī)師提供參考。 《自身抗體檢測(cè)在自身免疫病中的臨床應(yīng)用專家建議》（以下簡(jiǎn)稱為《建議》）形成分 3 步進(jìn)行。首先由來(lái)自全國(guó)大型教學(xué)醫(yī)院風(fēng)濕免疫科醫(yī)師通過(guò)檢索國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)并結(jié)合中國(guó)實(shí)際情況起草《建議》草案，然后將該草案提交由風(fēng)濕免疫科、檢驗(yàn)科、消化科、血液科、神經(jīng)內(nèi)科等組成的專家組討論，補(bǔ)充和提出修改意見(jiàn)，修改后的草案再次由起草成員討論，形成初步建議，并對(duì)每項(xiàng)建議條目進(jìn)行解讀。 最后提交由中國(guó)免疫學(xué)會(huì)臨床免疫分會(huì)專家進(jìn)行投票評(píng)分（Delphi 評(píng)分，分值 0—10 分，0 分表示完全不贊同，10 分表示完全贊同），計(jì)算所有專家打分的 x s 作為每條建議的專家認(rèn)可度。《建議》包括 13 條，每一條都附有基于 GRADE 法的證據(jù)分級(jí)、證據(jù)質(zhì)量和專家認(rèn)可度及其 95% 可信區(qū)間（95%CI）。 1 自身免疫病概述 自身免疫病是由于免疫功能紊亂，機(jī)體產(chǎn)生針對(duì)自身抗原的病理性免疫應(yīng)答反應(yīng)而引起器官或系統(tǒng)損傷的一類疾病。根據(jù)臨床表現(xiàn)和病變累及的范圍，自身免疫病可以分為系統(tǒng)性和器官特異性，前者以 SLE、SSc、RA、APS 等為代表；后者包括自身免疫性肝炎（AIH）、PBC、自身免疫性甲狀腺炎、胰島素依賴性糖尿病等。 自身免疫病的發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚，目前認(rèn)為是遺傳易感個(gè)體在環(huán)境因素如感染、紫外線、腫瘤及藥物等多種因素共同作用下發(fā)生。自身免疫病通常伴隨免疫系統(tǒng)功能紊亂、自身反應(yīng)性 T 細(xì)胞、B 細(xì)胞的活化和自身抗體、炎性因子的產(chǎn)生。由于自身抗體的產(chǎn)生是自身免疫病的基本特征之一，因而，自身抗體本身就成為大多數(shù)自身免疫病的血清學(xué)標(biāo)記物。 2 自身抗體的分類、臨床意義和檢測(cè)方法 2.1 系統(tǒng)性自身免疫病相關(guān)自身抗體 2.1.1 ANA：ANA 是一組將自身真核細(xì)胞的各種成分脫氧核糖核蛋白、DNA、可提取核抗原和 RNA 等作為靶抗原的自身抗體的總稱，是自身免疫病最重要的診斷指標(biāo)之一。ANA 的檢測(cè)方法很多，目前間接免疫熒光法（IIF）仍然是 ANA 檢測(cè)首選方法。ANA 陽(yáng)性提示體內(nèi)存在一種或多種自身抗體，應(yīng)結(jié)合其他臨床資料判定其意義。 2.1.2 抗 ENA 抗體譜：ANA 的靶抗原眾多，采用鹽析法從細(xì)胞核中提取出來(lái)，且不含 DNA 的一類抗原統(tǒng)稱為 ENA。臨床常用抗 ENA 抗體主要包括抗 Sm、U1-RNP、SSA、SSB、Jo-l、Scl-70 和核糖體 P 蛋白抗體等。抗 U1-RNP 抗體可在多種風(fēng)濕性疾病出現(xiàn)，但高滴度抗 U1-RNP 抗體對(duì) MCTD 有診斷意義。 抗 Sm 抗體是 SLE 高度特異性的血清學(xué)標(biāo)記物，在一些檢測(cè)方法中常與抗 U1-RNP 抗體相伴出現(xiàn)，目前由于重組抗原的應(yīng)用，可以出現(xiàn)單獨(dú)抗 Sm 抗體陽(yáng)性?？?SSA 抗體和（或）抗 SSB 抗體陽(yáng)性是診斷 SS 的血清學(xué)標(biāo)準(zhǔn)?？?SSA 抗體的靶抗原由相對(duì)分子質(zhì)量為 60000 和 52000 的 2 種蛋白質(zhì)組成，抗 SSA-52 000 可出現(xiàn)在多種自身免疫病中，一般不作為診斷依據(jù)；抗 SSA-60000 抗體與 SS 密切相關(guān)。 抗 SSB 抗體是 SS 的特異性抗體。抗 Scl-70 抗體是 SSc 分類標(biāo)準(zhǔn)中的血清學(xué)標(biāo)記物，與預(yù)后不良、肺纖維化、心臟病變有關(guān)?？怪z粒蛋白（CENP）抗體是局限型 SSc 特異性的血清學(xué)標(biāo)記物，提示預(yù)后良好。 抗 Jo-l 抗體屬于抗氨基酰 tRNA 合成酶抗體群，在 DM 或 PM 患者中的陽(yáng)性率約為 25%～30%，該自身抗體群還包括抗 PL-7、PL-12、EJ 等?？?Mi-2 抗體幾乎只出現(xiàn)于 DM 患者，陽(yáng)性率約為 20%?？?PM-1 抗體是 PM 較特異的自身抗體，在 PM 患者中陽(yáng)性率約為 13%。目前，這些自身抗體的常用檢測(cè)方法是 ELISA 和免疫印跡法。 2.1.3 抗 dsDNA 抗體：該自身抗體對(duì)診斷 SLE 有較高的特異性（95%），是 SLE 分類標(biāo)準(zhǔn)之一。其抗體滴度在多數(shù) SLE 患者中與病情活動(dòng)程度相關(guān)，可作為治療監(jiān)測(cè)和預(yù)后評(píng)價(jià)的指標(biāo)，并與 SLE 患者的 I 腎損害相關(guān)。目前公認(rèn)的檢測(cè)方法為 IIF、放射免疫法（Farr 法）和 ELISA 法。 2.1.4 抗核小體抗體（AnuA）：AnuA 可出現(xiàn)于 SLE 的早期，并且敏感性、特異性均較高。在 SLE 患者中陽(yáng)性率為 50%~90%，特異性 >90%。常用的檢測(cè)方法為 ELISA。 2.1.5 抗 Clq 抗體：抗 Clq 抗體除與低補(bǔ)體血癥蕁麻疹性血管炎、RA 等相關(guān)外，與 SLE 患者并發(fā) LN 及其活動(dòng)性也密切相關(guān)。常用的檢測(cè)方法是 ELISA。 2.1.6 抗磷脂抗體譜：抗磷脂抗體譜主要包括狼瘡抗凝物（LA）、抗心磷脂（CL）抗體、抗β2 糖蛋白 I（β2GP I）抗體、抗凝血酶原（PT）抗體和抗磷脂酰絲氨酸（PS）抗體等，在我國(guó) SLE 患者中檢出率約為 20%~30%，是 SLE 預(yù)后不良的重要標(biāo)志。檢測(cè) LA 或抗 CL-IgG/lgM 或抗β2GP I -IgG/lgM 是診斷 APS 的血清學(xué)標(biāo)準(zhǔn)。LA 通過(guò)體外凝血時(shí)間來(lái)定性測(cè)定，其他抗體常通過(guò) ELISA 的方法進(jìn)行定量檢測(cè)。 2.1.7 ANCA：ANCA 的靶抗原有十余種，與臨床最相關(guān)的是蛋白酶 3（PR3）和髓過(guò)氧化物酶（MPO），兩者與 ANCA 相關(guān)血管炎，即肉芽腫性多血管炎（GPA）、嗜酸性肉芽腫性多血管炎（EGPA）、顯微鏡下多血管炎（MPA），以及這些疾病的腎臟表現(xiàn)密切相關(guān)。IIF 和 ELISA 聯(lián)合應(yīng)用是檢測(cè) ANCA 的最佳方法。 2.1.8 抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體（AECA）：AECA 與血管炎和多種風(fēng)濕病中的血管內(nèi)皮損傷有關(guān)，如白塞病、肉芽腫性多血管炎、SLE、SSc、過(guò)敏性紫癜腎炎（HSPN）等?？贵w滴度與病情活動(dòng)性具有相關(guān)性。目前檢測(cè) AECA 常用的方法是 ELISA 和 IIF。 2.1.9 RF：lgM-RF 是 RF 主要類型，在 RA 患者中的陽(yáng)性率為 70%~90%，是 2010 年 ACR/EULAR 頒布的 RA 分類標(biāo)準(zhǔn)中的血清學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目之一。另外，IgA-RF 和 IgG-RF 對(duì) RA 的診斷也可能有一定提示意義。免疫比濁法、ELISA 和化學(xué)發(fā)光法是目前常用的 RF 定量檢測(cè)方法。除 RA 外，RF 也可見(jiàn)于其他自身免疫病、多種感染以及腫瘤性疾病等。 2.1.10 抗瓜氨酸化蛋白 / 肽抗體（ACPA）：ACPA 是一組對(duì) RA 高度特異的自身抗體。AKA/APF 屬于抗絲聚蛋白抗體（AFA）群，可出現(xiàn)在 RA 早期，同時(shí)與 RA 病情活動(dòng)性指標(biāo)呈正相關(guān)，目前常用檢測(cè)方法為 IIF。抗 CCP 抗體是 RA 最新的分類標(biāo)準(zhǔn)中的血清學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目之一，敏感性、特異性均較好。抗瓜氨酸化波形蛋白抗體對(duì) RA 也有一定的診斷價(jià)值。目前，抗 CCP 抗體和抗瓜氨酸化波形蛋白抗體檢測(cè)的最常用方法是 ELISA。 2.2 自身免疫性肝病相關(guān)自身抗體 2.2.1 AIH 和 PBC 相關(guān) ANA 譜：ANA 在 AIH 患者中陽(yáng)性率可高達(dá) 70%~80%，是疾病診斷評(píng)分的指標(biāo)之一，但是缺乏疾病特異性。PBC 患者 ANA 陽(yáng)性率為 50% 左右，在抗線粒體抗體（AMA）陰性 PBC 患者中的陽(yáng)性率可達(dá) 85%?？?Spl00 抗體和抗 PML 抗體在 PBC 患者中的陽(yáng)性率分別可達(dá) 30% 和 20%?？?gp210 抗體和抗 p62 抗體在 PBC 患者中的陽(yáng)性率分別是 17%~35% 和 20%~30%，是 PBC 高度特異性的標(biāo)記物（特異性 >95%）。 2.2.2 AIH-1 型和 AIH-2 型相關(guān)的自身抗體：抗平滑肌抗體（ ASMA）和 ANA 與 AIH-1 型相對(duì)應(yīng)。IIF 是檢測(cè) ASMA 獲得最佳特異性和敏感度的方法?？垢文I微粒體 -1（LKM-1）抗體、抗肝細(xì)胞溶質(zhì) -1（LC-1）抗體用來(lái)定義 AIH-2 型，通常用 ELISA 或免疫印跡法來(lái)檢測(cè)?？箍扇苄愿慰乖?/ 肝，胰腺（SLAILP）抗體是 AIH 的特異性抗體，一般不作為 AIH 分型依據(jù)，可通過(guò) ELISA 或免疫印跡法來(lái)檢測(cè)。 2.2.3 抗線粒體抗體（AMA）：AMA 是 PBC 的標(biāo)志性抗體，陽(yáng)性率 90%~95%。根據(jù)靶抗原不同分為 9 個(gè)亞類，即 M1~M9，與 PBC 緊密相關(guān)的是 M2、M4、M8 和 M9。AMA-M2 是 PBC 特異性和敏感性最強(qiáng)的診斷指標(biāo)，M4 常與 M2 并存，而 M9 陽(yáng)性常提示患者處于 PBC 的早期。IIF 法用于 AMA 篩查，區(qū)分亞型常用 ELISA 和免疫印跡法。 2.3 中樞神經(jīng)系統(tǒng)自身免疫病相關(guān)抗體 2.3.1 抗 N- 甲基 -D- 天冬氨酸受體（NMDAR）抗體：是用來(lái)定義“抗 NMDAR 抗體腦炎”的標(biāo)志性抗體。此外，抗 NMDAR 抗體可能與 SLE 患者神經(jīng)精神的異常狀況相關(guān)。 2.3.2 抗水通道蛋白 4（AQP4）抗體：是視神經(jīng)脊髓炎（NMO）的標(biāo)志性抗體?？捎糜?NMO 與多發(fā)性硬化的鑒別，在 NMO 患者中的敏感性約為 58%~76%，特異性可達(dá) 85%~99%。IIF 或基于靶抗原轉(zhuǎn)染細(xì)胞的檢測(cè)（CBA）是首選檢測(cè)方法。 2.3.3 其他中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病相關(guān)的自身抗體：抗神經(jīng)節(jié)苷脂抗體與吉蘭 - 巴雷綜合征（Guillain Barresyndrome）、多灶性運(yùn)動(dòng)神經(jīng)病、感覺(jué)神經(jīng)病、米 - 費(fèi)綜合征（Miller-Fisher syndrome）等脫髓鞘外周神經(jīng)系統(tǒng)病變有關(guān)；神經(jīng)腫瘤抗體如抗 Hu 抗體、抗 Yo 抗體、抗 Ri 抗體、抗 CV2 抗體等與神經(jīng)系統(tǒng)副腫瘤綜合征密切相關(guān)； 抗乙酰膽堿受體抗體是重癥肌無(wú)力確診的重要參考依據(jù)；抗電壓門控性鉀離子通道（VGKC）復(fù)合物抗體、抗電壓門控性鈣離子通道受體、抗 a- 氨基 -3- 羥基 -5- 甲基異噁唑 -4- 丙酸（AMPA）受體抗體、抗γ氨基丁酸 -B（GABAB）受體抗體、抗甘氨酸受體抗體等與邊緣性腦炎、腦脊髓炎、小腦性共濟(jì)失調(diào)等中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病相關(guān)。 抗髓磷脂堿性蛋白（MBP）抗體、抗髓磷脂少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白（MOG）抗體等可能與多發(fā)性硬化的致病機(jī)制有關(guān)。 2.4 其他自身抗體 2.4.1 甲狀腺相關(guān)自身抗體：抗甲狀腺球蛋白（TG）和抗甲狀腺過(guò)氧化物酶（TPO）抗體是橋本甲狀腺炎等自身免疫性甲狀腺炎的標(biāo)志性抗體，也可作為產(chǎn)后甲狀腺炎、無(wú)痛性格雷夫斯病等甲狀腺疾病診斷的參考指標(biāo)?？勾偌谞钕偎兀═SH）受體抗體是診斷格雷夫斯病的重要依據(jù)，敏感性約為 95%，特異性可達(dá) 99%。化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定（CLIA）、Farr 法和 ELISA 是目前檢測(cè)這些自身抗體的常用方法。 2.4.2 胰腺相關(guān)自身抗體：胰島細(xì)胞自身抗體（ICA）、抗胰島素自身抗體（IAA）、抗谷氨酸脫羧酶 65（GAD65）抗體和抗胰島瘤抗原 -2（IA-2）抗體是診斷 1 型糖尿病、成人隱匿性自身免疫性糖尿病（LADA）的重要參考指標(biāo)。靈長(zhǎng)類胰腺冰凍組織切片為基質(zhì)的 IIF 是檢測(cè) ICA 的標(biāo)準(zhǔn)方法，其他 3 種抗體的檢測(cè)常用 ELISA 和放射性免疫分析。 2.4.3 乳糜瀉（CD）相關(guān)抗體：抗肌內(nèi)膜抗體（EMA）、抗組織谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶（ tTG）抗體是診斷麩質(zhì)敏感性腸病或乳糜瀉的首選檢測(cè)項(xiàng)目?？谷ヵ０坊溎z蛋白肽（DGP）抗體檢測(cè)是乳糜瀉相關(guān)自身抗體譜的重要補(bǔ)充，尤其適用于 2 歲以下嬰幼兒乳糜瀉患者。EMA 采用 IIF 檢測(cè)，抗 tTG 抗體和抗 DGP 抗體的檢測(cè)方法為 ELISA。 2.4.4 生殖相關(guān)自身抗體：抗卵巢抗體與女性的卵巢功能早衰（POF）和自身免疫性不孕癥有關(guān)，檢測(cè)方法有 ELISA 和 IIF。抗精子抗體與男性及女性的不育不孕癥有關(guān)，這類抗體主要影響配子發(fā)育和受精，檢測(cè)方法有 ELISA、IIF、混合性抗免疫球蛋白反應(yīng)等。 3 自身抗體檢測(cè)在自身免疫病中的臨床應(yīng)用專家 建議 本《建議》可為廣大臨床醫(yī)生和檢驗(yàn)醫(yī)師在日常診療實(shí)踐中擬定檢測(cè)項(xiàng)目及檢測(cè)流程時(shí)提供參考。自身抗體檢測(cè)的合理應(yīng)用有賴于檢驗(yàn)醫(yī)生和臨床醫(yī)生的共同合作。 3.1 《建議》十三條 見(jiàn)表 1。 |
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來(lái)自： drwxj > 《非肝病文獻(xiàn)》
