導(dǎo)讀：

多數(shù)自身免疫病患者血清中都會(huì)出現(xiàn)自身抗體。雖然有些自身抗體在疾病中的確切意義尚未得到嚴(yán)格的證實(shí)，但其與疾病的相關(guān)性已得到認(rèn)可，所以這些自身抗體在自身免疫病的診斷和療效評(píng)價(jià)方面都具有重要的意義。

一、抗核抗體

抗核抗體（antinuclearantibodies，ANA）泛指抗各種核成分的抗體，是一種廣泛存在的自身抗體。ANA的性質(zhì)主要是IgG，也有IgM和IgA，甚至IgD和IgE。ANA可以與不同來(lái)源的細(xì)胞核起反應(yīng)，無(wú)器官特異性和種屬特異性。ANA主要存在于血清中，也可存在于其他體液如滑膜液、胸水和尿液中。

ANA在SIE患者的滴度較高，但也出現(xiàn)在其他許多自身免疫病中，在許多研究報(bào)告中，都將檢出ANA作為自身免疫甚至自身免疫病存在的依據(jù)。這種現(xiàn)象的機(jī)制尚未明了，有待于進(jìn)一步研究。

（一）ANA的類型及意義

由于細(xì)胞核成分的復(fù)雜性，不同成分的抗原性也不同；因此就會(huì)有多種不同的ANA。

1．抗核蛋白抗體核蛋白抗原（DNP）由DNA和組蛋白組成。由于DNP抗原存在不溶性和可溶性兩個(gè)部分，可分別產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。不溶性DNP抗體通常不完全被DNA和組蛋白所吸收，它是形成狼瘡細(xì)胞的因子；可溶性抗原存在于各種關(guān)節(jié)炎病人的滑膜液中，其相應(yīng)抗體也出現(xiàn)于RA病人的滑膜液中。

2．抗DNA抗體可以分為兩大類：①抗天然DNA（nDNA）抗體，或稱抗雙鏈DNA（dsDNA）抗體；②抗變性DNA抗體，或稱抗單鏈DNA（ssDNA）抗體。抗dsDNA抗體對(duì)SLE有較高的特異性，70％～90％的活動(dòng)期SLE病人該抗體陽(yáng)性，效價(jià)較高，并與病情有關(guān)?？箂sDNA抗體可見于多種疾病中，特異性較差。

3．抗ENA抗體可提取性核抗原（ENA）多從動(dòng)物的胸腺中提取。先將胸腺勻漿并破碎細(xì)胞，分離出細(xì)胞核；再經(jīng)鹽水或磷酸鹽緩沖液處理后，很容易從胞核中提取出來(lái)。ENA不含DNA，對(duì)核糖核酸酶敏感。近年來(lái)的研究表明，ENA可分為十幾種，現(xiàn)僅介紹幾種主要的ENA及其相應(yīng)抗體。

（1）抗PNP抗體：PNA即核糖核蛋白，對(duì)核糖核酸酶和胰蛋白酶敏感，加熱561h變性。抗PNP抗體多見于混合性結(jié)締組織病。高效價(jià)的抗PNP抗體對(duì)混合性結(jié)締組織病有診斷意義，

而低效價(jià)的抗PNP抗體可在SIE患者中發(fā)現(xiàn)。

（2）抗Sm抗體：該抗體在一名Smith姓的患者血中首次發(fā)現(xiàn)，便以其名字的前兩個(gè)字母命名。Sm抗原系非核酸性糖蛋白，對(duì)DNase及RNase均不敏感，但經(jīng)碘酸鹽及胰蛋白酶處理后可被水解?？筍m抗體是SLE的特異性標(biāo)志之一，但陽(yáng)性率偏低，約為30％～4％；可能是SIE的一種回憶性抗體，故在非活動(dòng)期亦可檢出。若將抗dsDNA和抗Sm抗體同時(shí)檢測(cè)，可提高SLE的診斷率。

（3）抗SS-A抗體：SS-A為干燥綜合征（SS）的A抗原，可從動(dòng)物胸腺的胞漿中提取。抗SS-A抗體主要見于SS，但也可見于其他自身免疫病如SLE中。

（4）抗SS-B抗體：SS-B為SS的B抗原，亦可從動(dòng)物胸腺或小鼠肝細(xì)胞漿中提取，可被胰蛋白酶、輕度加熱或改變?nèi)芤簆H而破壞。13％的SLE及30％的SS患者有抗SS-B抗體。

（5）抗組蛋白抗體（AHA）：組蛋白是一種堿性蛋白質(zhì)，含有大量的賴氨酸及精氨酸。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)組蛋白抗原可分為5個(gè)亞單位：H-1、H2A、H-2B、H-3、H-4?？菇M蛋白抗體及其抗亞單位抗體見于SLE及藥物誘發(fā)的LE。SLE病人血清中的抗組蛋白亞單位抗體檢出率順序?yàn)椋嚎笻-2B、抗H-1、抗H-3、抗H-2A及抗H-4，以抗H-2B和抗H-1為主，并與SLE的活動(dòng)性有關(guān)。

（二）ANA的檢測(cè)方法

由于ANA的復(fù)雜性及多樣性，故測(cè)定方法繁多。目前ANA常用的方法有免疫熒光法、放射免疫法、ELISA、免疫雙擴(kuò)散、對(duì)流免疫電泳及免疫印跡技術(shù)等。

1．免疫熒光法檢測(cè)血清總ANA最常用的方法是熒光免疫組化法。多用小鼠肝切片或印片作為細(xì)胞核基質(zhì)，結(jié)果比較穩(wěn)定可靠，在熒光顯微鏡下見到的細(xì)胞核有熒光著色為陽(yáng)性反應(yīng)。如將患者血清先進(jìn)行不同比例的稀釋，可以做大致的定量試驗(yàn)，在1:80稀釋仍然雖陽(yáng)性時(shí)，對(duì)SLE的診斷有較大的參考價(jià)值。在油鏡下觀察結(jié)果，可以將ANA陽(yáng)性的熒光現(xiàn)象分成4種主要的熒光核型，核型的確定對(duì)臨床診斷有進(jìn)一步的參考價(jià)值。①周邊型表示抗DNA抗體存在；②均質(zhì)型表示有抗DNP抗體；③斑點(diǎn)（顆粒）型多為抗ENA抗體；④核仁型多為抗核小體抗體。SLE患者常出現(xiàn)周邊型、勻質(zhì)型或混合型，斑點(diǎn)型多見于混合結(jié)締組織病，而硬皮病多為核仁型；周邊型對(duì)SLE有較高的特異性。

近年有人用錐蟲或血鞭毛蟲（例如綠蠅短膜蟲試驗(yàn)）作基質(zhì)測(cè)定抗dsDNA抗體，因?yàn)檫@些血寄生蟲的動(dòng)基體內(nèi)含大量的純dsNDA，無(wú)其他抗原干擾；在陽(yáng)性結(jié)果時(shí)，可見鞭毛一端的動(dòng)基體顯示清晰的熒光。因此該試驗(yàn)用于測(cè)定抗dsDNA抗體具有特異性強(qiáng)和敏感性高的優(yōu)點(diǎn)。另外，短膜蟲對(duì)人畜無(wú)害，可以人工養(yǎng)殖，來(lái)源方便，值得推廣。

2．放射免疫法常用檢測(cè)抗DNA抗體，有Farr法及過(guò)濾法。①Farr法的原理為用同位素標(biāo)記DNA，被標(biāo)記的DNA和被檢血清的抗DNA抗體結(jié)合，經(jīng)50％硫酸銨飽和液沉淀，然后比較沉淀物和上清液中的放射活性，從而得出DNA結(jié)合活性，一般結(jié)合率大于20％為陽(yáng)性。②過(guò)濾法是在分離結(jié)合物時(shí)用纖維素酯薄膜濾器（孔徑為0.45μm）進(jìn)行過(guò)濾，游離的DNA被濾去而與抗體結(jié)合的復(fù)合物被阻留在濾膜上。

3．ELISA臨床上主要是應(yīng)用間接ELISA檢測(cè)抗dsDNA抗體，其重復(fù)性及敏感性均較對(duì)流免疫電泳及雙擴(kuò)散為高。目前已有試劑盒供應(yīng)。

4．免疫印跡（immunoblotting）先將混合抗原作凝膠電泳，分離開不同的區(qū)帶，然將這些帶轉(zhuǎn)印到硝酸纖維素膜上，最后用酸標(biāo)抗體或放射性同位素標(biāo)記抗體進(jìn)行檢測(cè)和分析。由于該試驗(yàn)不需純化的單個(gè)抗原，可在同一固相上作多項(xiàng)分析檢測(cè)，靈敏度高，特異性強(qiáng)。故目前已廣泛用于自身免疫病患者血清中多種自身抗體的檢測(cè)，如檢測(cè)抗Sm抗體、抗RNP抗體、抗SS-A抗體及SS-B抗體等。

另外，還可用傳統(tǒng)的瓊脂雙向擴(kuò)散法、對(duì)流免疫電泳法、間接血凝法和補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)等。

這些試驗(yàn)要求的實(shí)驗(yàn)條件比較低，但敏感性也比較低。

二、類風(fēng)濕因子

類風(fēng)濕因子（RF）是抗變性IgG的自身抗體，主要為19S的IgM，也可見7S的IgG及IgA。它能與人或動(dòng)物的變性IgG結(jié)合，而不與正常IgG發(fā)生凝集反應(yīng)。RF主要出現(xiàn)在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者，約70％～90％的血清中和約60％的滑漠液中可檢出IgG類RF，這很可能是自身IgG變性所引起的一種自身免疫應(yīng)答的表現(xiàn)。

IgG是感染等原因誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答中的主干抗體，這些抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合時(shí)會(huì)發(fā)生變性；此外，在炎癥等病理?xiàng)l件下滑漠或其他部位可能產(chǎn)生不正常的IgG；這些變性IgG就構(gòu)成自身抗原，刺激免疫系統(tǒng)產(chǎn)生各種抗IgG抗體?；ひ褐械腎gG類RF與變性IgG結(jié)合而形成中等大小的免疫復(fù)合物，比血清中的IgM類RF更具有致病意義，因?yàn)檫@一類免疫復(fù)合物易于沉積在關(guān)節(jié)滑膜等部位，可激活補(bǔ)體，形成慢性漸進(jìn)性免疫炎癥性損傷。

RF的檢測(cè)最初是用致敏綿羊紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)（Rose-Waaler法）進(jìn)行檢測(cè)，目前最常采用IgG吸附的膠乳顆粒凝集試驗(yàn)；但此法的靈敏度和特異性均不高，而且只能檢出血清中的IgM類RF。IgG類和IgA類RF則需要用RIA或ELISA等方法檢測(cè)。

RF在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者中的檢出率很高，RF陽(yáng)性支持早期RA的傾向性診斷，如對(duì)年輕女性應(yīng)進(jìn)行RA和風(fēng)濕熱間的鑒別；而對(duì)非活動(dòng)期RA的診斷，需參考病史。但RF也象ANA一樣，并不是RA獨(dú)有的特異性抗體。在SLE病人均有50％RF陽(yáng)性，在其他結(jié)締組織病如SS、硬皮病、慢性活動(dòng)性肝炎及老年人中均可有不同程度的陽(yáng)性率。

三、其他自身抗體

（一）抗甲狀腺球蛋白及微粒體抗體

這類抗體可以針對(duì)甲狀腺的多種成分，以甲狀腺球蛋白和微粒體為代表。抗體主要是IgG，可以介導(dǎo)ADCC活性，引起慢性淋巴細(xì)胞性甲狀腺炎，又稱喬本（Hashimoto）甲狀腺炎。檢測(cè)方法多用免疫熒光技術(shù)，以甲狀腺組織的冰凍切片作基質(zhì)。也可用RIA、ESISA等方法進(jìn)行檢查。強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)或高滴度抗體對(duì)喬本甲狀腺炎和原發(fā)性甲狀腺功能減退癥有診斷意義，抗體變化對(duì)于疾病治療轉(zhuǎn)歸的評(píng)價(jià)甚為重要，對(duì)喬本甲狀腺炎與甲狀腺功能亢進(jìn)的鑒別診斷也有較大價(jià)值。正常人血清中很少檢出甲狀腺抗體，或僅有5％～10％無(wú)疾病癥狀人群有低度反應(yīng)；女性和年齡較大的人群檢出率較高。檢出該抗體可提示既往患過(guò)自身病，也可能是自身免疫病的早期指標(biāo)。

在甲狀腺功能亢進(jìn)(Graves病)患者的血清中存在甲狀腺刺激抗體(TSAb)，包括長(zhǎng)效甲狀腺刺激素(LATS)和LATS者(LATS-P)。這些抗體作用于甲狀腺細(xì)胞表面的TSH受體，使受體活化并促進(jìn)甲狀腺素的釋放；過(guò)多的甲狀腺素引起機(jī)體的代謝亢進(jìn)。

（二）抗乙酰膽堿受體抗體

抗乙酰膽堿受體（AchR）抗體可結(jié)合到橫紋肌細(xì)胞的乙酰膽堿受體上，引起運(yùn)動(dòng)終板的破壞，使神經(jīng)－肌肉之間的信號(hào)傳導(dǎo)發(fā)生障礙，導(dǎo)致骨髓肌運(yùn)動(dòng)無(wú)力，稱為重癥肌無(wú)力（myastherniagravis，MG）。疾病可發(fā)于任何年齡，最先出現(xiàn)的癥狀常是眼肌無(wú)力，進(jìn)而累及其他部位，常呈進(jìn)行性加重。

抗AchR抗體多用較敏感的方法進(jìn)行檢測(cè)。①ELISA法：以α-銀環(huán)蛇毒素包被酶標(biāo)板，并與骨骼肌勻漿（含AchR）作用，再加入待測(cè)血清和對(duì)照血清，最后加酶標(biāo)抗體。試驗(yàn)的正常結(jié)果為陰性或≤0.03mmol/L。②放免法：將放射性同位素標(biāo)記的α-銀環(huán)蛇毒素與骨骼勻漿結(jié)合，再加入患者血清和抗人IgG使之沉淀，檢測(cè)沉淀物的放射性。

抗AchR抗體的檢測(cè)對(duì)MG具有診斷意義，且特異性和敏感性較高，大約90％的MG患者陽(yáng)性；伴有眼肌癥狀的病人，抗體效價(jià)低于普通癥狀的病人；同時(shí)還用來(lái)監(jiān)測(cè)對(duì)該疾病免疫抑制治療的效果。肌萎縮側(cè)索硬化癥患者用蛇毒治療后可出現(xiàn)假陽(yáng)性。

（三）抗平滑肌抗體

抗平滑肌抗體（ASMA）產(chǎn)生機(jī)制不明，但與肝和膽管的自身免疫疾病有關(guān)，尤其是慢性活動(dòng)性肝炎（狼瘡性肝炎）和原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）。該類疾病的發(fā)生與自身免疫性密切相關(guān)，試驗(yàn)結(jié)果有助于診斷以及與其他肝病的鑒別診斷。

ASMA的檢測(cè)用間接免疫熒光法，用大鼠胃大彎或小彎的冰凍切片作基質(zhì)；正常結(jié)果為陰性或≤1:20。檢出陽(yáng)性率較高的疾病有慢性活動(dòng)性肝炎和PBC；而在肝外性膽汁阻塞、藥物誘發(fā)性肝病、急性病毒性肝炎及肝細(xì)胞癌等時(shí)ASMA的檢出率極低。

（四）抗心肌抗體

在心肌受損（例如手術(shù)、感染或梗塞等）時(shí)，心肌細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)釋出，作為隱蔽抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體。這些抗體與心臟結(jié)合可導(dǎo)致新的免疫性損傷，例如心包切開綜合征、風(fēng)濕性心臟病等。

抗心肌抗體的檢測(cè)用胎兒或大鼠心肌的冰凍切片作抗原基質(zhì)，進(jìn)行免疫熒光檢測(cè)，正常值為陰性。陽(yáng)性結(jié)果相關(guān)的疾病有：心臟術(shù)后綜合征、心肌梗塞后綜合征和風(fēng)濕性心臟病等。

（五）抗線粒體抗體（AMA）檢測(cè)

抗線粒體抗體（AMA）所針對(duì)的抗原是內(nèi)層線粒體膜，無(wú)器官特異性和種屬特異性。該抗體主要是IgG，與PBC相關(guān)，但對(duì)肝細(xì)胞或膽管沒有直接的損傷效應(yīng)，在疾病中的作用尚不明確。

AMA用免疫熒光法進(jìn)行檢測(cè)，用大鼠腎的冰凍切片作基質(zhì)；也可用補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)來(lái)檢測(cè)。正常結(jié)果為陰性或效價(jià)在1:5以下。PBC患者可有79％～94％為陽(yáng)性反應(yīng)或效價(jià)≥1:160；長(zhǎng)期持續(xù)性肝阻塞、慢性活動(dòng)性肝炎；、原因不明性肝硬化等也可呈陽(yáng)性反應(yīng)。但是肝外性黃疸為陰性。

（六）抗胃壁細(xì)胞抗體

抗胃壁細(xì)胞抗體（APA）可以破壞胃粘膜的壁細(xì)胞，使內(nèi)因子產(chǎn)生障礙，有時(shí)也可發(fā)現(xiàn)抗內(nèi)因子抗體而使其功能受阻，從而導(dǎo)致惡性貧血的發(fā)生。患者可無(wú)前驅(qū)癥狀或患有胃炎。

APA常以間接免疫熒光法檢測(cè)，用人或家兔的胃冰凍切片作抗原基質(zhì)，正常成人為陰性反應(yīng)，正常兒童可有2％～20％的檢出率。惡性貧血患者能檢出抗胃壁細(xì)胞或抗內(nèi)因子抗體。而其他各種貧血患者不能檢出其中任何一種抗體。胃潰瘍或胃癌等極少該抗體陽(yáng)性。

（七）抗胰島素抗體

抗胰島素抗體在體內(nèi)可與胰島素結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物，使胰島素的活性明顯降低甚至無(wú)效；從而導(dǎo)致胰島素依賴性糖尿病，必需注入大量胰島素才能有療效。該抗體主要為IgG，其他4類Ig也存在；其中IgE類抗體可引起病人的變應(yīng)性反應(yīng)，IgM類可能引起胰島素耐受。

檢測(cè)抗胰島素抗體及其免疫球蛋白類別可用各種瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、間接血凝和ELISA等方法，試驗(yàn)結(jié)果會(huì)有助于糖尿病的分型診斷及適當(dāng)治療。此外，還可用于監(jiān)測(cè)病人的胰島素耐量。

（八）抗腎小球基底膜抗體

抗腎小球基底膜（GBM）抗體多產(chǎn)生在鏈球菌感染后，為共同抗原交叉誘導(dǎo)產(chǎn)生。抗GBM抗體可引起GBM損傷，導(dǎo)致腎小球腎炎的發(fā)生。

抗GBM抗體的檢測(cè)也是用熒光或酶免疫組化法，用動(dòng)物或人的腎組織冰凍切片作抗原基質(zhì)。陽(yáng)性反應(yīng)可見與腎小球血管走行相一致的熒光染色或酶底物染色；這與免疫復(fù)合物時(shí)斑塊狀分布的染色現(xiàn)象完全不同。試驗(yàn)正常值為陰性。該試驗(yàn)主要用于腎小球腎炎的分型診斷與鑒別診斷。約5％的腎小球腎炎由抗GBM抗體引發(fā)，為自身免疫性。

（九）抗精子抗體

正常情況下精細(xì)胞是隱蔽抗原，但當(dāng)外傷、手術(shù)或感染時(shí)，精子可與免疫系統(tǒng)接觸，誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗精子抗體。高滴度的抗精子抗體可使精細(xì)胞的活力下降甚至數(shù)量減少，是導(dǎo)致男子不育癥的原因之一。在部分女性也可檢出抗精子抗體，可能與不孕癥相關(guān)。

抗精子抗體的檢測(cè)方法很多，例如精子制動(dòng)試驗(yàn)、精子凝集試驗(yàn)、免疫熒光法、ELISA法和免疫珠結(jié)合法等。抗精子抗體陽(yáng)性相關(guān)的疾病有實(shí)驗(yàn)性輸精管阻塞和輸精管切斷等，一部分婦女和孕婦也可檢出抗精子抗體。

（十）抗血細(xì)胞抗體

抗紅細(xì)胞抗體主要涉及ABO的Rh血型抗體及自身免疫性抗體，與輸血、新生兒溶血癥和自身免疫性溶血性貧血等相關(guān)。抗血小板和抗白細(xì)胞抗體等均與自身免疫性血液病相關(guān)。

四、其他免疫學(xué)檢測(cè)

（一）淋巴細(xì)胞檢測(cè)

雖然自身免疫病多與自身抗體有關(guān)，但仍有部分疾病不存在相關(guān)的自身抗體，而與致敏淋巴細(xì)胞有關(guān)，還可能與免疫調(diào)節(jié)異?；蚱渌蛩赜嘘P(guān)。這些相關(guān)因素的檢測(cè)對(duì)疾病的診斷有一定的參考意義。

1．特異性致敏淋巴細(xì)胞在潰瘍性結(jié)腸炎、外周神經(jīng)炎及實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎等疾病，可能與自身反應(yīng)性致敏淋巴細(xì)胞有關(guān)。雖然這些淋巴細(xì)胞在疾病中的確切作用要比自身抗體的作用更難證實(shí)，但相關(guān)性本身也具有一定參考價(jià)值。檢測(cè)致敏淋巴細(xì)胞可用器官特異性抗原作誘導(dǎo)劑，進(jìn)行淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)或吞噬細(xì)胞移動(dòng)抑制試驗(yàn)等；皮膚試驗(yàn)也能反映機(jī)體致敏情況，但有誘導(dǎo)致敏性或誘發(fā)變態(tài)反應(yīng)的危險(xiǎn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果需結(jié)合臨床或其他檢查進(jìn)行綜合分析。

2．在免疫缺陷病或免疫失調(diào)時(shí)容易發(fā)生自身免疫病，所以進(jìn)行淋巴細(xì)胞數(shù)量及亞群比例的檢查也有一定意義。檢測(cè)內(nèi)容包括淋巴細(xì)胞總數(shù)、T和B細(xì)胞分類計(jì)數(shù)及CD4/CD8亞群比例測(cè)定等。

（二）狼瘡細(xì)胞試驗(yàn)

 狼瘡（LE）細(xì)胞是胞漿內(nèi)含有大塊狀聚合DNA的中性粒細(xì)胞。狼瘡病人血清中的抗核抗體可誘導(dǎo)LE細(xì)胞的形成，因此稱為L(zhǎng)E因子。用病人血清與正常人中性粒細(xì)胞一起培養(yǎng)，可使后者變成LE細(xì)胞。該試驗(yàn)稱為狼瘡細(xì)胞試驗(yàn)，試驗(yàn)過(guò)程更要3天連續(xù)重復(fù)進(jìn)行。

系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人有75％～80％呈陽(yáng)性。在RA、硬皮病、部分肝炎、結(jié)節(jié)性動(dòng)脈炎、多發(fā)性硬化癥、皮肌炎和變態(tài)反應(yīng)病等偶爾可呈陽(yáng)性反應(yīng)。現(xiàn)已證明至少有十幾種藥物可誘發(fā)LE細(xì)胞試驗(yàn)陽(yáng)性。