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【檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)062】抗核抗體譜中常見自身抗體檢測(cè)的臨床意義

 黃之中 2024-06-21 發(fā)布于上海
關(guān)于自身抗體的知識(shí)我已經(jīng)匯總了比較多的資料了,在今天這一篇文章里面,主要學(xué)習(xí)的是關(guān)于ANA譜和ENA譜的概念。我自己在學(xué)習(xí)這部分內(nèi)容之前對(duì)這兩個(gè)概念是混淆的。比如我們科室開展的一個(gè)項(xiàng)目“狼瘡全套”,就是用免疫印跡法檢測(cè)ANA譜,里面包括了dsDNA,但是明明先前在教材上接受的概念是ENA譜,可提取的核抗原,不包括dsDNA,因?yàn)榭乖商崛?,才能把它包被在膜條上,為什么我們做這個(gè)免疫印跡法試劑又包含了dsDNA的檢測(cè)呢。看完以下這段話,我才算明白了是怎么回事。
ANA是指針對(duì)整個(gè)真核細(xì)胞所有抗原的自身抗體的總稱,ANA是一個(gè)宏觀的概念,其實(shí)質(zhì)包括很多種特異性的自身抗體,但要確定患者血清中含何種抗體,需要通過已知抗原檢測(cè)相應(yīng)的抗體,這種采用已知真核細(xì)胞抗原檢測(cè)到的所有特異性自身抗體的集合稱為ANA譜。
傳統(tǒng)采用已知可提取性核抗原(ENA)來檢測(cè)針對(duì)該類抗原的特異性自身抗體,即利用生理鹽水或磷酸鹽緩沖溶液從細(xì)胞核中提取的一組酸性核糖核蛋白,包括許多小分子RNA與各自對(duì)應(yīng)的特定蛋白質(zhì),但不包括組蛋白和DNA。可提取性核抗原通過SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE),按分子量大小分離成區(qū)帶,之后采用傳統(tǒng)western blot法檢測(cè)相應(yīng)的抗體稱為ENA抗體譜,這種方法檢測(cè)所需的抗原為粗抗原,方法簡單,試劑成本較低;但由于SDS-PAGE轉(zhuǎn)印到膜條的抗原可多達(dá)數(shù)百種,不同的蛋白質(zhì)可能具有相同的電泳遷移率,因此同一區(qū)帶可能為多種蛋白成分,或區(qū)帶距離很近,易造成誤判。
隨著基因重組和蛋白純化技術(shù)的發(fā)展,幾乎所有的細(xì)胞抗原成分(包括ENA)均可經(jīng)重組獲得,即可通過純化抗原的免疫條帶法檢測(cè)真核細(xì)胞(Hep-2細(xì)胞)所有抗原的抗體,因此,ENA抗體譜概念將不再使用,眾多學(xué)者越來越認(rèn)同ANA譜的概念,其檢測(cè)范圍遠(yuǎn)超過ENA抗體譜。
ANA譜種類較多,有些具有明確的臨床意義,有些臨床意義尚不明確,臨床常規(guī)檢測(cè)的7種抗體如下。
圖片
01

抗Sm抗體

Sm抗體和抗dsDNA一樣,對(duì)SLE有高度特異性,Sm抗體幾乎僅見于SLE患者中,是SLE的標(biāo)志性抗體。1982年美國風(fēng)濕病學(xué)會(huì)將抗Sm抗體作為SLE的診斷標(biāo)準(zhǔn)之一。但由于其敏感度較低(SLE陽性檢出率為20%~40%),故抗Sm抗體陰性時(shí)不能排除SLE診斷。

02

抗U1RNP抗體

U1RNP抗體又稱抗nRNP抗體。該抗體是診斷混合性結(jié)締組織病(MCTD)(又稱夏普綜合征)的必要條件。MCTD是合并有RA、SLE、系統(tǒng)性硬化癥及多肌炎的多種臨床特征的自身免疫性疾病。有些學(xué)者對(duì)MCTD是否為一個(gè)獨(dú)立的疾病仍存在爭(zhēng)議???/span>U1RNP抗體并不是MCTD的特異性診斷指標(biāo),在其他自身免疫疾病患者中也可檢出該抗體,SLE患者的陽性率30%~50%,全身性進(jìn)行性硬化癥25%~30%,皮肌炎為10%~20%,RA5%~10%。此外,由于SmU1RNP是同一分子復(fù)合物中的不同抗原位點(diǎn),兩種抗原具有相關(guān)性,抗Sm抗體陽性常伴有抗U1RNP抗體陽性。

03

抗SSA抗體

SSA抗體又稱抗Ro抗體。SS為干燥綜合征的縮寫,A為抗原序列號(hào),抗SSA抗體的靶抗原包括60 kD52 kD兩種蛋白質(zhì)。目前認(rèn)為抗SSA抗體陽性主要指含有抗天然SSA(60 kD蛋白)抗體,52 kD蛋白是否是SSA復(fù)合物的成分尚存在爭(zhēng)議。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)抗SSA抗體(僅包括抗Ro-60抗體)在原發(fā)性干燥綜合征(SS)患者陽性率高達(dá)60%~70%,因此歐洲SS診斷標(biāo)準(zhǔn)研究組織將抗SSA抗體納入SS的診斷標(biāo)準(zhǔn)。但該抗體特異性較差,在SLE陽性率為40%~50%,在RA、PSS、多皮肌炎或原發(fā)性膽汁性硬化及少部分正常人也可檢出抗SSA抗體。另外,抗Ro-52抗體可能與先天性心臟傳導(dǎo)阻滯有關(guān),并可在SS、肌炎、系統(tǒng)性硬化癥、新生兒紅斑狼瘡、PBC、自身免疫性肝炎、病毒性肝炎及正常人中檢出,故有學(xué)者認(rèn)為單獨(dú)抗Ro-52抗體陽性臨床價(jià)值有限。


04

抗SSB抗體

SSB抗體又稱抗La抗體。該抗體診斷SS較為特異,歐洲SS診斷標(biāo)準(zhǔn)研究組織將抗SSB抗體納入SS診斷標(biāo)準(zhǔn)。但由于抗SSB抗體通常與抗SSA抗體(Ro-60抗體)同時(shí)出現(xiàn),只有當(dāng)抗SSA抗體陽性時(shí),檢測(cè)抗SSB抗體才有意義;如果抗SSA為陰性,而抗SSB為陽性,檢測(cè)結(jié)果通常不可靠。

05

抗Jo-1抗體

Jo-1抗體靶抗原是組氨酰tRNA合成酶,抗原表位在55 kD多肽上,該抗體最常見于多發(fā)性肌炎(PM),陽性率可達(dá)40%單純皮肌炎患者的陽性率約10%,在正常人及其他自身免疫性疾病患者中常為陰性。另有研究結(jié)果顯示,抗Jo-1抗體陽性患者常合并肺間質(zhì)纖維化,部分患者可出現(xiàn)多關(guān)節(jié)炎。因此,抗Jo-1抗體被認(rèn)為是肺病相關(guān)肌炎的標(biāo)志性抗體。


06

抗Scl-70抗體

Scl-70中的SclSclerosis的縮寫,70代表抗原分子量為70 kD,它是DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I的降解產(chǎn)物。Scl-70抗體主要與進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥有關(guān),很少出現(xiàn)于局限型硬化癥或其他自身免疫性疾病患者中???/span>Scl-70抗體陽性的硬化癥患者通常病情較重,病程較長,皮膚和內(nèi)臟器官損傷嚴(yán)重。由于疾病早期即可檢測(cè)出該抗體,故可用于PSS的早期診斷,并且提示預(yù)后不良。


06

抗Rib-P抗體

Rib-P抗體即抗核糖體P蛋白抗體,又稱抗rRNP抗體。靶抗原核糖體P蛋白在核仁合成,然后轉(zhuǎn)入胞質(zhì)??乖砦辉诖髞喕?/span>38 kD、16.5 kD15kD的多肽上。Rib-P抗體是SLE的特異性抗體,抗Rib-P抗體陽性提示與狼瘡性腦病有關(guān),其他疾病及正常人很少出現(xiàn)。


資料匯總來源:全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程(第4版)

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