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標(biāo)本溶血對(duì)臨床生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響

 文進(jìn)玲玉 2021-10-26
定向點(diǎn)金 金寶
定向點(diǎn)金《臨床實(shí)驗(yàn)室》為檢驗(yàn)行業(yè)技術(shù)型期刊,汲取眾多行業(yè)專家精華,采編國(guó)際最新研究成果,追蹤行業(yè)發(fā)展動(dòng)向,注重臨床應(yīng)用與新技術(shù)新產(chǎn)品推廣,追蹤行業(yè)新技術(shù)、新方法、新產(chǎn)品。搭建檢驗(yàn)行業(yè)組織、專家學(xué)者、各類企業(yè)、各級(jí)醫(yī)院良好的信息交流與溝通平臺(tái)
614篇原創(chuàng)內(nèi)容
公眾號(hào)

作者 | 杜晶晶

審核 | 公志華

單位 | 山西白求恩醫(yī)院

晚上夜班,收到來自兒科一份新生兒患者的血生化標(biāo)本,離心后發(fā)現(xiàn)標(biāo)本溶血比較嚴(yán)重,我心想標(biāo)本溶血肯定會(huì)使鉀離子和一些酶的檢測(cè)結(jié)果假性升高,于是立即聯(lián)系臨床,希望能重新采血。

但是護(hù)士反映孩子小,血管細(xì),非常難抽,已經(jīng)抽了兩針,想看看結(jié)果如何再?zèng)Q定是否重抽,我也就抱著試試的想法,把標(biāo)本進(jìn)行上機(jī)檢測(cè)。

結(jié)果和設(shè)想的一樣,血鉀出現(xiàn)危急值,心肌酶異常升高,馬上聯(lián)系臨床,和醫(yī)生解釋原因告知必須重新采集標(biāo)本,以下為該患者溶血和非溶血標(biāo)本結(jié)果的比較:

圖片

在實(shí)驗(yàn)室工作中,溶血是血清生化標(biāo)本常見的干擾因素之一,為了能夠更好地跟臨床溝通,解釋溶血干擾檢測(cè)結(jié)果的原因,進(jìn)行了仔細(xì)研究。

經(jīng)查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn),溶血標(biāo)本對(duì)生化檢測(cè)項(xiàng)目干擾存在多種機(jī)制:例如紅細(xì)胞破壞后,細(xì)胞內(nèi)容物釋放,使血清濃度升高;血紅蛋白的顏色可以干擾光學(xué)檢測(cè),使431~555nm波長(zhǎng)附近的吸光度明顯上升;細(xì)胞釋放的內(nèi)容物與試劑成分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)等,均可對(duì)結(jié)果產(chǎn)生干擾。

于是我查閱資料,從溶血對(duì)各生化項(xiàng)目干擾方向、干擾程度和干擾機(jī)制這三個(gè)方面,總結(jié)如下:

1.天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST):

正向干擾,輕度溶血(+)即可顯著升高。

干擾機(jī)制為:紅細(xì)胞內(nèi)AST是血漿的38倍,溶血后從細(xì)胞中釋放入血[1]

2.肌酸激酶(CK):

正向干擾,輕度溶血(+)即可顯著升高。

干擾機(jī)制為:紅細(xì)胞中含有腺苷酸激酶(AK)釋放入血清,AK是使ADP與ATP之間相互轉(zhuǎn)化的酶,測(cè)定CK時(shí),磷酸肌酸與ADP在CK作用下轉(zhuǎn)化為肌酸與ATP,AK致使ATP濃度升高的速率更快,使CK假性升高[2]

3.肌酸激酶同工酶(CK-MB):

正向干擾,輕度溶血(+)即可顯著升高。

干擾機(jī)制為:隨CK升高CK-MB亦升高,同樣受到AK影響。

4.乳酸脫氫酶(LDH):

正向干擾,輕度溶血(+)即可顯著升高。

干擾機(jī)制為:紅細(xì)胞中LDH是血漿的180倍,溶血時(shí)從細(xì)胞中釋放。

5.鐵(Fe):

正向干擾,輕度溶血(+)即可顯著升高。

干擾機(jī)制為:主波長(zhǎng)為570nm,除血紅蛋白吸光度的影響,血紅蛋白中Fe2+會(huì)被檢測(cè)試劑中的氧化劑成分氧化為黃色Fe3+,從而對(duì)兩點(diǎn)比色法檢測(cè)造成干擾。

6.未飽和鐵結(jié)合力(UIBC):

正向干擾,輕度溶血(+)即可顯著升高。

干擾機(jī)制為:UIBC采用Ferene法,溶血后血紅蛋白中Fe2+干擾緩沖液中Fe2+濃度,使UIBC結(jié)果假性升高。

7.酸性磷酸酶(ACP):

正向干擾,輕度溶血(+)即可顯著升高。

干擾機(jī)制為:紅細(xì)胞中ACP活性是血漿的67倍。

8.γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(GGT):

正向干擾,中度溶血(++)時(shí)升高。

干擾機(jī)制為:氧合血紅蛋白和脫氧血紅蛋白在415nm處具有最大吸收,檢測(cè)范圍分別在320~450 nm和540~589 nm之間,GGT會(huì)受到影響。

9.總膽紅素(TBIL):

負(fù)向干擾,中度溶血(++)時(shí)即可降低。

干擾機(jī)制為:與溶血時(shí)血紅蛋白競(jìng)爭(zhēng)性地與偶氮試劑發(fā)生反應(yīng)有關(guān),其相應(yīng)產(chǎn)物破壞偶氮膽紅素使結(jié)果偏低,同時(shí)血紅蛋白還可以被亞硝酸氧化成高鐵血紅蛋白從而干擾吸光度。

10.直接膽紅素(DBIL):

負(fù)向干擾,中度溶血時(shí)(++)降低。

干擾機(jī)制:同TBIL。

11.丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT):

正向干擾,中度溶血時(shí)(++)升高。

干擾機(jī)制為:紅細(xì)胞中ALT為血漿7倍,溶血后從細(xì)胞中釋放入血。

12.堿性磷酸酶(ALP):

正向干擾,中度溶血(++)時(shí)升高。

干擾機(jī)制為:氧合血紅蛋白和脫氧血紅蛋白在415nm處具有最大吸收,檢測(cè)范圍分別在320~450nm和540~589nm之間,ALP會(huì)受到影響。

13.總蛋白(TP):

正向干擾,重度溶血(+++及以上)時(shí)升高。

干擾機(jī)制為:TP的升高,一方面可能是由于血紅蛋白中的結(jié)合珠蛋白干擾所造成,另一方面可能與血紅蛋白與雙縮脲試劑發(fā)生內(nèi)源性反應(yīng)有關(guān)。

14.白蛋白(ALB):

正向干擾,重度溶血(+++及以上)時(shí)升高。

干擾機(jī)制為:釋放到血清中的有色物質(zhì)血紅蛋白中的珠蛋白使ALB分析濃度趨于增大,高于實(shí)際濃度。

15.磷(P):

正向干擾,重度溶血(+++及以上)時(shí)升高。

干擾機(jī)制為:溶血后RBC的磷脂進(jìn)入血清被血清中磷酸酯酶水解,同時(shí)血紅蛋白在340nm處直接干擾鉬酸鹽紫外分光光度法,造成血清無機(jī)磷濃度增高。

16.前白蛋白(PA):

正向干擾,重度溶血(+++及以上)時(shí)升高。

干擾機(jī)制為:PA檢測(cè)主波長(zhǎng)雖然也在血紅蛋白吸收峰范圍附近,但僅在“++++”溶血受到干擾,說明免疫透射比濁法在標(biāo)本溶血方面的抗干擾能力較強(qiáng)。

17.鉀離子(K+):

正向干擾,輕度溶血(+)即可顯著升高。

干擾機(jī)制為:紅細(xì)胞內(nèi)鉀離子是血漿22倍,溶血時(shí)鉀離子釋放入血。

18.尿酸(UA):

負(fù)向干擾,中度溶血(++)時(shí)降低。

干擾機(jī)制為:溶血后紅細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽可競(jìng)爭(zhēng)尿酸檢測(cè)反應(yīng)體系中過氧化氫而導(dǎo)致結(jié)果偏低。

19.尿素(UREA):

正向干擾,重度溶血(+++及以上)時(shí)升高。

干擾機(jī)制為:溶血可使脲酶法和二乙酸一塢法光譜藍(lán)色部分吸光度值偏高,使結(jié)果增高。

20.肌酐(SCR):

負(fù)向干擾,重度溶血(+++及以上)時(shí)降低。

干擾機(jī)制為:苦味酸法可使結(jié)果假性減低,因易受還原性物質(zhì)的干擾如維生素C、酮體等。

21.血糖(GLU):

負(fù)向干擾,中度溶血(++)時(shí)降低。

干擾機(jī)制為:GOD-POD法Glu測(cè)定原理,標(biāo)本溶血后血清被稀釋以及紅細(xì)胞破裂后釋放還原性輔酶中和反應(yīng)過程中部分中間產(chǎn)物H2O2,使得反應(yīng)最終產(chǎn)物醌式染料濃度降低,兩方面影響因素綜合導(dǎo)致Glu測(cè)定值偏低。

22.甘油三酯(TG):

正向干擾,重度溶血(+++及以上)時(shí)升高。

干擾機(jī)制為:與紅細(xì)胞內(nèi)含有一些低濃度的脂蛋白、膽固醇酯等有關(guān)。

23.總膽固醇(TC):

正向干擾,重度溶血(+++及以上)時(shí)升高。

干擾機(jī)制:同TG。

24.

溶血對(duì)高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、鈉離子(Na+)、氯離子(CL-)、鎂離子(MG2+)、鈣離子(Ca2+)影響甚微。

綜上所述,輕度溶血即可對(duì)AST、Fe、CK、CK-MB、HBDH、LDH、UIBC、K+產(chǎn)生干擾,且隨溶血程度加深檢測(cè)結(jié)果逐漸升高。

若患者本身存在溶血性疾病、重復(fù)采樣困難或患者情況危急時(shí),此種溶血標(biāo)本是否確實(shí)不符合待檢項(xiàng)目的檢測(cè)要求,我們檢驗(yàn)科要怎么處理呢?

有的自動(dòng)生化分析儀上裝載溶血血清指數(shù)試劑盒,通過溶血指數(shù)試劑盒對(duì)標(biāo)本進(jìn)行校正,從而解決標(biāo)本狀況判定中存在的不客觀性、不一致性等問題。

2018年發(fā)布的《臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本溶血檢測(cè)與應(yīng)用專家共識(shí)》也明確指出通過溶血指數(shù)(HI)劃分溶血等級(jí),建立血紅蛋白對(duì)檢驗(yàn)項(xiàng)目干擾的量值關(guān)系,各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)自身情況,采取標(biāo)本溶血程度客觀評(píng)價(jià)手段。

在工作中一旦發(fā)現(xiàn)明顯溶血的標(biāo)本,應(yīng)立即采取相應(yīng)措施,如重新采集標(biāo)本或?qū)θ苎^輕的標(biāo)本結(jié)果進(jìn)行備注引起臨床注意,有條件的檢驗(yàn)科可通過溶血指數(shù)試劑盒對(duì)標(biāo)本進(jìn)行校正,避免患者接受不必要的重復(fù)采樣操作,為臨床提供準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果,提高服務(wù)質(zhì)量。

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【參考文獻(xiàn)】

[1]侯春瑛,王志新,趙利斌.標(biāo)本溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響[J].臨床醫(yī)學(xué),2002(10):8-9.

[2]羅祖軍,鄒德學(xué),王強(qiáng)等.標(biāo)本溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的干擾和影響及對(duì)策研究[J].重慶醫(yī)學(xué),2014,43(22):2879-2880+2883.

END

轉(zhuǎn)自:檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)

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