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哺乳動物基因表達VSV載體

 生物學(xué)渣 2021-05-28

  水皰性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV)載體在研究病毒顆粒入侵宿主細胞、辨認介導(dǎo)病毒感染細胞的細胞表面受體、篩選病毒抑制藥物以及疫苗開發(fā)方面有著廣泛的應(yīng)用。VSV病毒載體可以高效地利用異源病毒的包膜蛋白進行假型化(Presudotypted),比如那些需要在高生物安全等級實驗室操作的病毒的包膜蛋白。重組VSV在宿主細胞中不能進行超過一輪的復(fù)制,因此可以在生物安全2級(BSL2)實驗室進行相關(guān)操作。這些特點促使VSV病毒載體成為在無需高度隔離下研究高風(fēng)險病毒侵入細胞機制的理想選擇。

  野生型VSV屬于彈狀病毒科(Rhabdoviridae),擁有一條單鏈負義RNA基因組,并且其復(fù)制依賴病毒的RNA依賴的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)。VSV的單鏈RNA基因組編碼以下五種蛋白組分:核蛋白(N)、磷酸化蛋白(P)、基質(zhì)蛋白(M)、糖蛋白(G)和病毒RdRp的大亞基(L)。VSV病毒顆粒中,其RNA基因組與N核蛋白組成核糖核酸蛋白(Ribonucleoprotein,RNP)。P和L蛋白則組成RdRp,并結(jié)合于RNP。VSV感染靶細胞時,其G糖蛋白誘導(dǎo)細胞發(fā)生內(nèi)吞作用,幫助病毒侵入細胞。G糖蛋白可以介導(dǎo)病毒包膜與細胞膜融合,促使RNP和RdRp一起釋放到細胞質(zhì)中。病毒組分進入細胞后,RdRp以RNP中的負義RNA基因組為模板立即啟動一級轉(zhuǎn)錄,而作為轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的正義RNA鏈被進一步翻譯,用于生產(chǎn)介導(dǎo)病毒基因組復(fù)制、二級轉(zhuǎn)錄、病毒組裝和出芽等病毒等功能的后期蛋白。

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