細(xì)胞凋亡是多基因嚴(yán)格控制的過程，這些基因在種屬之間非常保守，如Bcl-2家族、Caspase家族、抑癌基因P53等。凋亡過程的紊亂可能與許多疾病的發(fā)生有直接或間接的關(guān)系，如腫瘤和自身免疫性疾病等，因此如果你是研究腫瘤或退行性疾病，細(xì)胞凋亡的檢測(cè)往往是必要的，因?yàn)檫@一指標(biāo)將會(huì)成為后續(xù)機(jī)制研究的風(fēng)向標(biāo)。

由于細(xì)胞凋亡的過程有典型的形態(tài)和分子層面的變化，檢測(cè)方法也是多樣的，常用的有Annexin V/PI雙染法、TUNEL檢測(cè)法和Caspase-3活性檢測(cè)法。其中，Annexin V/PI雙染法因其可區(qū)分凋亡早期和晚期和方便量化而被廣泛使用。磷脂酰絲氨酸(Phosphatidyl serine,PS)在細(xì)胞凋亡的早期，會(huì)從細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面，暴露在細(xì)胞外環(huán)境中。Annexin-V能與PS高親和力特異性結(jié)合，把綠色熒光分子FITC連接到Annexin-V即可標(biāo)志內(nèi)膜翻轉(zhuǎn)的凋亡小體。而當(dāng)細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，細(xì)胞膜通透性增強(qiáng)，PI可進(jìn)入細(xì)胞結(jié)合DNA并發(fā)出熒光。因此通過流式分析Annexin-V-FITC和PI的信號(hào)分布便可區(qū)分凋亡早期（Annexin-V-FITC陽(yáng)性+PI陰性）和晚期（Annexin-V-FITC陽(yáng)性+PI陽(yáng)性）的細(xì)胞（圖3）。