研究人員使用基因編輯的小鼠模型來研究基因表達,研究遺傳疾病,進行臨床前藥物藥效測試等。在許多研究中,小鼠模型在其整個發(fā)育和生命過程中均表達基因突變。然而,在某些研究中,研究人員需要對小鼠基因表達進行更多控制。 當利用小鼠模型進行研究時,可能需要在特定的組織中進行基因改造,或者使基因改造僅在小鼠生命周期的某一特定時期被激活,能夠進行這種控制的小鼠模型稱為條件性小鼠模型。構建條件性小鼠模型最有效的方法之一是通過Cre-loxP系統(tǒng)實現(xiàn)。特定的Cre工具鼠可以在某組織特異性基因啟動子調控下表達組織特異性Cre重組酶,即特定的Cre工具鼠決定基因編輯的組織特異性。如果使用CreERT2代替Cre,經他莫昔芬誘導可激活重組酶活性,實現(xiàn)Cre-ERT2-loxP模型的條件性和可誘導性。loxP小鼠有兩個loxP元件,位于整個基因或基因部分外顯子的兩側,loxP位置決定未來基因編輯位置。 cre小鼠就是我們常用的帶有不同的cre酶的工具鼠統(tǒng)稱,可用于繁育交配,比如說B6.129P2-Lyz2 tm1(cre)lfo/NJU, 這種就是我們的帶有骨髓細胞特異表達cre酶的模型,還有很多很多在不同組織表達的酶的模型,可以根據(jù)自己的實驗需求來安排。 Cre-loxP系統(tǒng)是一種構建條件性小鼠模型的有效方法。 |
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