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手把手教你多套GEO數(shù)據(jù)集合并

 link171 2019-12-21
各位科研芝士的小伙伴,TCGA、GEO數(shù)據(jù)庫的挖掘現(xiàn)如今已經(jīng)十分火爆。不可否認(rèn),現(xiàn)如今各種培訓(xùn)層出不窮,幾乎都是給你一個代碼讓你去跑,卻并沒有讓你真正懂其精髓。今天我們一文幫助大家學(xué)習(xí)GEO數(shù)據(jù)庫中的一個難點(diǎn):兩套GEO數(shù)據(jù)集如何合并獲得一個更大的表達(dá)矩陣。今天我們就攻下這個高地。

欲練此功,先有其data。今天我們選擇的數(shù)據(jù)集為胰腺癌研究的數(shù)據(jù)集:GSE46234和GSE3325。

GSE46234數(shù)據(jù)集包括4個正常組織和4個胰腺癌組織;
GSE3325數(shù)據(jù)集包括6個正常組織和13個腫瘤組織。



注意

首先大家需要自行獲取相應(yīng)的表達(dá)矩陣,我們也已經(jīng)整理好相應(yīng)的表達(dá)矩陣的R文件,大家可以后臺留言“表達(dá)矩陣”獲取,本案例的目的是帶著大家實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)集的合并操作。

不同的GEO數(shù)據(jù)集中,由于存在不同實(shí)驗(yàn)的儀器不同,實(shí)驗(yàn)人員的熟練程度也不同,甚至試劑都不同,這樣就會造成實(shí)驗(yàn)的batch差異。我們需要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)批次矯正了(batch normalization),接下來我們需要掌握基于去除批次效應(yīng)的數(shù)據(jù)集合并。

批次矯正采用sva工具包

1.  安裝加載sva包,直接install和library即可

                                         

2. 加載GSE3325數(shù)據(jù)集和GSE46234數(shù)據(jù)集,由于我們事先保存成Rdata文件,因此我們需要load進(jìn)去


3. 數(shù)據(jù)集合并,我們基于load進(jìn)去之后的變量,1為GSE3325的數(shù)據(jù),2為GSE46234的數(shù)據(jù),我們將數(shù)據(jù)集合并成一個merge_eset對象:


具體數(shù)據(jù)內(nèi)容如下:

查看一下數(shù)據(jù)集維度,發(fā)現(xiàn)為20183行,27列,每行代表一個基因,每列代表一個樣本,前面19個樣本為GSE3325數(shù)據(jù)集,后面8個樣本為GSE46234數(shù)據(jù)集,一共27個樣本

4. 整理成sva包所需要的數(shù)據(jù)類型,首先變成矩陣格式,接著將每個維度的名字變成列表,最后整理成矩陣格式的data,如下:


結(jié)果:

5. 設(shè)置需要考慮的批次效應(yīng)有哪些,一是不同的GSE號,二是不同的normal和tumor樣本數(shù)量。


可以看到先是batchType,在是modType,最后采用model.matrix生成一個mod對象即可。

6. 一行命令搞定批次去除,主要是Combat命令的使用,將我們的需要考慮的batchType,mod,作為參數(shù)填充,即可


結(jié)果如下:

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