果子導(dǎo)讀

這篇本該是昨天發(fā)的，結(jié)果我給睡著了，夜里3點(diǎn)鐘起來編輯。
終于，終于，這一戰(zhàn)馬上就結(jié)束，我們也會(huì)回歸正常的生活。

寫標(biāo)書這個(gè)事情，主要看見識(shí)。假如我們從來沒見過一份中了的標(biāo)書，有多大希望一寫就中呢。從這點(diǎn)上說來，科研處絕對(duì)是個(gè)值得駐扎的地方，那么多歷年中了的標(biāo)書放在那里，本身就是藏經(jīng)閣。只不過，不是誰都可以進(jìn)去看真經(jīng)。
而國(guó)自然的經(jīng)驗(yàn)交流，歷來都是閉門的。有誰會(huì)原意把這吃飯的本事抖落人間呢。
高師姐這段時(shí)間真是開掛，徒手搭建了一個(gè)大項(xiàng)目，但是也沒有把經(jīng)驗(yàn)藏著，止不住地往外放，靜待花開吧。

今天發(fā)現(xiàn)已經(jīng)兩周沒有跟大家分享了。這兩周是標(biāo)書日，每天都在瘋狂的寫標(biāo)書，改標(biāo)書。為了每天精神十足，我采取了低碳水、低糖、間斷輕斷食飲食，也就是俗話說的每天用點(diǎn)點(diǎn)飲食吊命，長(zhǎng)期處于一個(gè)半饑餓狀態(tài)?？傮w效果還不錯(cuò)，每天精神還挺好。另外一個(gè)好處就是在這期間成功瘦了10斤。今天終于把標(biāo)書交出去了，瞬間精氣神就散了(果子：真的是這種感覺)。趁著還有一些精神，給大家分享分享。

這是我第一次寫標(biāo)書(果子：怎么評(píng)論呢，類似于強(qiáng)哥說，沒開過公司，可一上來就是大的)，在寫標(biāo)書的整個(gè)過程當(dāng)中，雖然被罵得很慘，但還是學(xué)到了很多東西。下面給大家分享分享，希望有所幫助。

定主題

寫標(biāo)書，需要先把主題給定下來，也就是你的研究的分子是什么，有可能是一個(gè)蛋白，有可能是一個(gè)基因，有可能是一個(gè)信號(hào)通路，也有可能是一個(gè)非編碼RNA。
其次要定的是這個(gè)分子在什么疾病或者什么細(xì)菌啊病毒啊中的作用，標(biāo)志物啊、治療靶點(diǎn)啊什么的。
再次，它是通過什么途徑導(dǎo)致的，也就是信號(hào)通路啊、自噬啊、衰老啊什么的。
一般把主題定好后，就比較好些了。

立論依據(jù)

立論依據(jù)是最難寫的，我見證了在我搭建的沒什么邏輯的簡(jiǎn)陋小屋基礎(chǔ)上，我的導(dǎo)師是怎么一步步把它變成超級(jí)豪華大house的。我們前前后后修改了54次。中間請(qǐng)了不同的人幫我們看標(biāo)書，給出意見。第一次別人給的意見是我們這個(gè)都不像一個(gè)標(biāo)書的樣子，更像是寫的文章。然后又一環(huán)一環(huán)的扣，一個(gè)個(gè)問題之間的邏輯，擺放的先后順序把每個(gè)大塊擺好，再在每一大塊里面看每一句話的前后順序，之間的邏輯性。最后再看怎么樣表述讓文字看上去比較高大上(果子：有些人就是有這樣的能力)。前面這些還是我比較enjoy的。這以后我每天都有好幾次要發(fā)火，要生自己的氣的時(shí)候。就是整個(gè)文字前后的語(yǔ)言用法要consistent，標(biāo)點(diǎn)符號(hào)要注意，不能口水話。。。。。。語(yǔ)言要簡(jiǎn)潔。我以前讀高中的時(shí)候，作文擅長(zhǎng)的寫法就是散文，也就是把一個(gè)可能用兩個(gè)字就能叫出名字的東西，用二十個(gè)字去寫出來。我長(zhǎng)這么大，一共有兩次這種毛焦火辣的時(shí)候，第一次就是第一次寫英文文章的時(shí)候，空格，標(biāo)點(diǎn)，大小寫，拼寫什么的，上一次也花了大概3個(gè)月的時(shí)間度過了那個(gè)時(shí)期。這一次也差不多是3個(gè)月的時(shí)間。我的最大問題就是可以把每個(gè)點(diǎn)做好，但是沒有全局觀。

研究?jī)?nèi)容、研究方案

這個(gè)東西也是我寫標(biāo)書的重災(zāi)區(qū)，真的不亞于寫立論依據(jù)。最主要是我沒有一個(gè)很好的全局觀，也有就是很急，人在很急的情況下，腦袋往往就是Duang的?，F(xiàn)在回想起來，其實(shí)就是回答你標(biāo)書中每一個(gè)Aim，需要怎么設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，而且是多種方法體內(nèi)外加人體最好。體內(nèi)外都是一體的，前后要一致。研究方案就是把研究方法的東西細(xì)化。在寫這個(gè)部分時(shí)是被罵得最厲害的，我的導(dǎo)師分分鐘被我氣得發(fā)毛的邊緣，因?yàn)槲矣泻芏嗫谒?，也就是說我可能說得出來，但是寫不好。所以要強(qiáng)加鍛煉遣詞造句的能力，學(xué)會(huì)把復(fù)雜的東西簡(jiǎn)單化，學(xué)會(huì)抓住重點(diǎn)。
后面的東西就比較套路，但是怎么架構(gòu)、怎么鋪排還是很講究的。我這個(gè)人性格真的很粗獷，所以細(xì)致的東西做的很差。這個(gè)是我以后需要強(qiáng)加改進(jìn)的地方。
最后，在這次寫標(biāo)書的過程當(dāng)中，真的很敬佩我的導(dǎo)師。她每天都在看標(biāo)書，從最開始不怎么了解這個(gè)課題，到現(xiàn)在比我還了解的深入。她可以為了和我面對(duì)面改標(biāo)書，一天往返北京。而且對(duì)于文字的雕琢、對(duì)于細(xì)節(jié)的東西特別的注重，她給我的感覺就是從她這里出去的東西必定是精品，而且可以迎難而上，永不放棄。這次我真的是打心眼里佩服她，敬重她。通過這一次，我也覺得我的人生目標(biāo)可能需要制定的在高一點(diǎn)，應(yīng)該更努力、更勤奮一些。天之道，損有余而補(bǔ)不足。人之道，則不然，損不足以奉有余。
又啰嗦了一大段，看到這里的人，要謝謝你們聽我啰嗦。

下面進(jìn)入今天的分享。

首先先將用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期的圖片怎么解讀。此圖為

右邊的那一組數(shù)據(jù)的解讀如下：
Dip G1：73.32% at 49.57，代表G1期DNA含量平均值為49.57,73.32%是G1期細(xì)胞數(shù)目占總數(shù)目的73.32%,這個(gè)時(shí)候根據(jù)下方的All cycle events，就可以算出具體的數(shù)值。
Dip G2：9.58% at 99.15，代表G2期DNA含量平均值為99.15,9.58%是代表G2期細(xì)胞數(shù)目占總數(shù)目的9.58%。
以此類推。。。。。。

其實(shí)做流式的時(shí)候，老師給你出的結(jié)果圖就如上圖。那我們用了這些數(shù)字除了解讀結(jié)果時(shí)用到外，還可以干什么呢？
我想說，你懂了以后，就可以隨意操作你的這些數(shù)字做不同的圖片出來，可以做Bar圖，可以做直方圖什么的。如下圖的B圖就是根據(jù)A圖的數(shù)據(jù)做出的直方圖。

在細(xì)胞周期檢測(cè)中，流式老師可能還會(huì)給你幾個(gè)參數(shù)，如下：
CV：變異系數(shù)。這個(gè)指數(shù)在DNA檢測(cè)中很重要，因?yàn)椴煌锓N之間細(xì)微的DNA差別都有很重要的意義。其分辨率由G0/G1峰的CV來反映。而影響CV的因素主要包括樣品制備染色過程的人為影響和儀器。所以建議同一個(gè)實(shí)驗(yàn)盡量由一個(gè)人在同一臺(tái)機(jī)器上完成。
Ploidy:倍體，指的是染色體數(shù)目，用來描述DNA總的含量。
在和control做比較時(shí)，如果你的第一個(gè)峰前面明顯出現(xiàn)另外一個(gè)高峰，如下圖一右側(cè)，那就是你的細(xì)胞凋亡增多（可以回看上期）。如果第一個(gè)峰明顯增高，如下圖二EGFP-NS1組比上MOCK，代表G0/G1期阻滯。
以此類推。。。。。。

那我們會(huì)做了以后，可以用于什么實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中呢？

• 1. 做腫瘤相關(guān)研究的肯定用到此方法，不管做什么干預(yù)的。

• 2. 做藥物研究的，很多也會(huì)用到此方法，在你做藥物實(shí)驗(yàn)沒有什么focus的東西時(shí)，可以先嘗試做個(gè)細(xì)胞周期看看，說不定會(huì)給你一些新的線索與方法。

• 3. 做感染的時(shí)候，無論是細(xì)菌還是病毒，尤其是可以致癌的病毒，都可以做。在做p53相關(guān)、細(xì)胞衰老相關(guān)的都可以涉及。

• 4.涉及到細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)的，也可以用此方法。

最后，在針對(duì)不同細(xì)胞周期均有不同的激酶（如下圖）和周期蛋白，每個(gè)激酶有特定的抑制劑。