非常高興能夠來(lái)作這個(gè)演講。我要講到的內(nèi)容包括我的課題的背景、發(fā)育過(guò)程中細(xì)胞不同分化的逆轉(zhuǎn)以及一些抵抗性，抵抗性是和細(xì)胞分化的穩(wěn)定性相關(guān)的，之后再講一下細(xì)胞置換的前景。

需要解決的問(wèn)題是細(xì)胞核的核重編碼是否能夠用作替代細(xì)胞治療的方法？是否能夠去置換沒(méi)有功能的細(xì)胞？

首先講下我的課題的背景，這張幻燈片顯示了重編程的過(guò)程，這段歷史很長(zhǎng)，我們從皮膚獲取細(xì)胞，然后分離細(xì)胞，再拿出一部分細(xì)胞，把一個(gè)皮膚的細(xì)胞核放到卵細(xì)胞中，在某些情況下這種組合會(huì)使這個(gè)細(xì)胞核在卵細(xì)胞中發(fā)育成為動(dòng)物，這個(gè)原則用于克隆動(dòng)物，不管這種動(dòng)物是小鼠還是哺乳動(dòng)物，這是克隆技術(shù)的根本原則。

大家可以看到，1958 年，第一個(gè)克隆成功的是成年脊椎動(dòng)物，顯示出有從細(xì)胞克隆動(dòng)物的可能性，這只脊椎動(dòng)物存活了很多年，細(xì)胞核的移植當(dāng)時(shí)被證明是成功的。

當(dāng)然，這項(xiàng)技術(shù)本身有很多問(wèn)題，有的時(shí)候大家很感興趣想了解這些問(wèn)題是什么。

• 第一個(gè)問(wèn)題是，我們需要有一個(gè)恰當(dāng)?shù)募?xì)胞核注射針，這個(gè)針對(duì)能夠?qū)⑺@取的細(xì)胞核注入到卵細(xì)胞當(dāng)中，但是針不能穿透卵細(xì)胞，這是一個(gè)需要解決的技術(shù)問(wèn)題。我們能夠殺滅卵細(xì)胞當(dāng)中的一些物質(zhì)，使得卵細(xì)胞外膜上的物質(zhì)通過(guò)覆罩透過(guò)針扎進(jìn)去。

當(dāng)年市場(chǎng)上是買(mǎi)不到這樣的注射針的，我們需要自己去打造直徑10 毫米的細(xì)胞核注射針的尖端形態(tài)。

• 另外一項(xiàng)要解決的是編遺傳標(biāo)記物，這是左邊的一個(gè)細(xì)胞核，它一般有左右兩個(gè)核仁，這樣就有克隆出來(lái)的動(dòng)物的遺傳標(biāo)記。

我要講的第二塊內(nèi)容是細(xì)胞分化的逆轉(zhuǎn)，我們需要知道的是細(xì)胞分化的方向是不一樣的，它們會(huì)成為具體的特定的細(xì)胞。上世紀(jì)五六十年代認(rèn)為干細(xì)胞分化成成熟細(xì)胞之后是沒(méi)辦法逆轉(zhuǎn)的。當(dāng)時(shí)的問(wèn)題就是，是否能將已經(jīng)分化的成熟的細(xì)胞核再逆轉(zhuǎn)回來(lái)，使不再具有分化能力的細(xì)胞重新變成具有分化能力的細(xì)胞。

這是我們?cè)诋?dāng)時(shí)做的實(shí)驗(yàn)，這是一段小腸，這是我們所做的蝌蚪的測(cè)試，喂食蝌蚪然后去看它的腸道。我們把小腸的上皮細(xì)胞中的細(xì)胞核轉(zhuǎn)到卵細(xì)胞中，讓它去成長(zhǎng)。一開(kāi)始這是完全不成功的，幾個(gè)小時(shí)之后，接受了細(xì)胞核的卵細(xì)胞變得非常奇怪，這個(gè)卵細(xì)胞就不能用了，實(shí)驗(yàn)之初就這樣的失敗了。

過(guò)一段時(shí)間我們發(fā)現(xiàn)改進(jìn)操作方法能夠更好地做實(shí)驗(yàn)，我們現(xiàn)在能夠把胚胎做成這樣子。大家看上面，右上角有一些分化比較正常的細(xì)胞，但是活不過(guò)一天就死亡了，但是我們發(fā)現(xiàn)還是有可能把細(xì)胞核從圖片上端的細(xì)胞當(dāng)中取出來(lái)，再進(jìn)行移植，如此獲得了一些正常的受精卵。大家可以看到左側(cè)是正常的受精卵，右側(cè)是核移植，這兩個(gè)看起來(lái)還是比較相似的。

這是一個(gè)肌肉細(xì)胞，當(dāng)看一個(gè)眼睛的時(shí)候，這個(gè)眼睛是比較正常的，它有晶體、視網(wǎng)膜層、虹膜色素層，這些細(xì)胞都是正常的。把這些特殊分化細(xì)胞的細(xì)胞核重新逆轉(zhuǎn)回去，這是我們當(dāng)時(shí)做的事情。當(dāng)我們把一個(gè)高分化的細(xì)胞的細(xì)胞核拿出來(lái)放到卵細(xì)胞中，當(dāng)時(shí)做出來(lái)是沒(méi)有結(jié)果的。

非常有意思的是，在1997 年，在最開(kāi)始的工作完成40 年之后，我們成功地克隆出了克隆羊多莉，用的技術(shù)核心是一樣的，只不過(guò)這次用的是哺乳動(dòng)物而非蟾蜍或青蛙。所用的方法和之前在青蛙身上工作的方法道理上是完全一樣的，只不過(guò)技術(shù)上有些差異。

當(dāng)一個(gè)技術(shù)在一個(gè)生物種類(lèi)上適用的時(shí)候，再把這個(gè)技術(shù)轉(zhuǎn)到另外的生物種類(lèi)上的時(shí)候要稍微當(dāng)心一點(diǎn)。顯示給大家看的是，這是細(xì)胞領(lǐng)域的克隆程度，這是我同事所做的工作，大家實(shí)驗(yàn)的方法是類(lèi)似的，也是對(duì)于哺乳動(dòng)物，首先從左邊這只猴子的皮膚當(dāng)中獲得細(xì)胞核，再?gòu)挠疫叺暮镒?/span>獲得卵細(xì)胞，把左邊猴子的細(xì)胞核放到右邊猴子的卵細(xì)胞當(dāng)中，進(jìn)行細(xì)胞合成形成胚胎。如中間的圖所示，所謂的胚胎干細(xì)胞就會(huì)增加數(shù)量、增加因子，細(xì)胞會(huì)有分化。做這個(gè)實(shí)驗(yàn)的人獲得了諾貝爾獎(jiǎng)，他能夠獲得這些胚胎干細(xì)胞然后繼續(xù)深入分化存活幾個(gè)月。主要的一點(diǎn)是，他所制造的這些細(xì)胞能夠繼續(xù)分化下去，成為胚胎干細(xì)胞。

看看最下面，能夠通過(guò)不斷地培養(yǎng)增加細(xì)胞的數(shù)量，它增加了一些機(jī)制、一些經(jīng)常由細(xì)胞分泌的因子，它就增加了干細(xì)胞，然后干細(xì)胞開(kāi)始分化。當(dāng)時(shí)它能夠分化出有搏動(dòng)的心肌細(xì)胞（當(dāng)時(shí)它所分化出來(lái)的搏動(dòng)的心肌細(xì)胞的視頻我沒(méi)辦法拿到），大家可以想象可以搏動(dòng)的心肌細(xì)胞的細(xì)胞核是來(lái)自于一只猴子的皮膚細(xì)胞。

（內(nèi)容摘自2018·第五屆諾貝爾獎(jiǎng)獲得者醫(yī)學(xué)峰會(huì)暨國(guó)際腫瘤研究高峰論壇演講）