細(xì)胞內(nèi)鏡系統(tǒng)

細(xì)胞內(nèi)鏡系統(tǒng)（endocytoscopy system，ECS）是基于光學(xué)顯微鏡原理的一種新型內(nèi)鏡成像技術(shù)，放大倍數(shù)高達(dá)1400倍，探測(cè)深度為0~50 μm，可清楚觀察淺層胃腸黏膜的細(xì)胞結(jié)構(gòu)。ECS分為整合式細(xì)胞內(nèi)鏡（iEC）和探頭式細(xì)胞內(nèi)鏡（pEC）。前者將整個(gè)ECS組件集成到內(nèi)鏡中；后者由手持式微型人機(jī)手柄組成，物鏡直徑3.2 ㎜，通過活檢通道進(jìn)行檢查，提供570或1400超高倍率成像。

ECS在觀察前需要先用黏膜分解劑如N-乙酰半胱氨酸處理，再用吸收對(duì)比劑如亞甲基藍(lán)、甲苯胺藍(lán)、甲酚紫等進(jìn)行黏膜染色，然后在成像前洗去多余的對(duì)比劑，若觀察時(shí)間大于5min，則需要重復(fù)染色。該染色對(duì)胃腸黏膜表面的分層是安全且有效的。

ECS檢查基于細(xì)胞水平，通過吸收染色劑和超高放大倍數(shù)可以識(shí)別細(xì)胞、細(xì)胞核，細(xì)胞大小及排列、細(xì)胞核核質(zhì)比例等，且對(duì)胃腸道黏膜表面的檢查非常可靠。ECS檢查能檢測(cè)結(jié)腸或直腸癌周圍正常黏膜的組織異常，并鑒定異常隱窩灶中的瘤形成。ECS還可區(qū)分腫瘤和非腫瘤性病變，以及結(jié)腸癌與腺瘤。此外，ECS可在體內(nèi)實(shí)時(shí)提供細(xì)胞異常和組織破壞信息，如光學(xué)活檢可在不需要組織學(xué)活檢的情況下協(xié)助最終的組織學(xué)診斷。上述特點(diǎn)或可為IBD診斷和臨床監(jiān)測(cè)開辟新的途徑。

細(xì)胞內(nèi)鏡評(píng)估IBD炎癥分級(jí)

ECS作為新的內(nèi)鏡成像模式，能夠在黏膜層內(nèi)以高達(dá)1400倍的放大率進(jìn)行體內(nèi)顯微鏡成像，使得光學(xué)活檢成為了可能，一些團(tuán)隊(duì)因此探討了ECS對(duì)IBD患者黏膜炎癥細(xì)胞和腸道炎癥性疾病活動(dòng)的可靠性。Bessho等制定了細(xì)胞內(nèi)鏡檢查評(píng)分系統(tǒng)（endocytoscopy scoring system，ECSS），以確定UC的組織病理學(xué)活動(dòng)指數(shù)。ECS評(píng)分由3個(gè)指標(biāo)構(gòu)成。ECSS-A表示隱窩的形狀指數(shù)（1~3分）：正常隱窩為0分；圓形、橢圓形隱窩為1分；不規(guī)則隱窩形成為2分；黏膜嚴(yán)重破壞、隱窩識(shí)別不清為3分。ECSS-B表示隱窩之間的距離（0~2分）：在視野內(nèi)可見3個(gè)或更多隱窩為0分；視野中2≤隱窩<>

細(xì)胞內(nèi)鏡實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)

ECS對(duì)IBD患者病程的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)起重要作用。研究者探討了使用ECSS 在UC緩解期間進(jìn)行監(jiān)測(cè)的臨床可行性，他們對(duì)經(jīng)結(jié)腸鏡檢查確診的26 例緩解期UC患者進(jìn)行了ECS檢查，并由病理學(xué)家評(píng)估UC復(fù)發(fā)率與ECSS和Matts組織病理學(xué)分級(jí)之間的相關(guān)性，結(jié)果顯示ECSS分別為0~2（A 組，12 例）和3~6（B組，10例），平均為2.3，ECSS與Matts組織病理學(xué)分級(jí)相關(guān)（r = 0.647）。2年后有3例B級(jí)病例復(fù)發(fā)，A 級(jí)病例均未復(fù)發(fā)，內(nèi)鏡后監(jiān)測(cè)期為(446±92) d，據(jù)此提出ECSS可能是UC復(fù)發(fā)的預(yù)測(cè)指標(biāo)。

細(xì)胞內(nèi)鏡與腸道腫瘤

慢性炎癥刺激與IBD相關(guān)聯(lián)，且其刺激會(huì)增加UC和CD患者發(fā)生結(jié)腸炎相關(guān)癌癥（colitis associated cancer，CAC）的風(fēng)險(xiǎn)。由于疾病持續(xù)時(shí)間與CAC的發(fā)展密切相關(guān)，目前歐洲和美國指南建議在首次診斷疾病后6~8年內(nèi)定期行ECS，故CAC的早期發(fā)現(xiàn)也非常重要。有證據(jù)表明ECS可以鑒別隱窩灶中的發(fā)育異常，結(jié)腸癌的癌前病變與結(jié)腸息肉，甚至區(qū)分高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變。在76例腸道腫瘤患者中將ECS檢查結(jié)果與常規(guī)組織病理學(xué)比較，結(jié)果顯示ECS檢出腫瘤的敏感性和特異性分別為96％和95％，此外具有91％的陰性預(yù)測(cè)值，表明ECS在腸道腫瘤檢測(cè)中的巨大潛力。另有研究顯示ECS能夠檢測(cè)結(jié)直腸癌周圍正常黏膜中的異常發(fā)育組織以及隱窩病灶中的腫瘤形成，敏感性為91.4％。2006年Sasajima等通過ECS前瞻性評(píng)估了結(jié)直腸病變的有效性，研究在113名患者中進(jìn)行，結(jié)果顯示ECS在細(xì)胞水平上觀察病變是可行的，且能評(píng)估細(xì)胞異型性，ECS診斷和組織學(xué)診斷之間的相關(guān)性具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。該研究首次表明ECS 可以區(qū)分腫瘤和非腫瘤性病變，以及腺瘤及癌癥。目前，ECS 還被大多數(shù)日本內(nèi)鏡醫(yī)師用來診斷結(jié)直腸息肉和早癌。

結(jié)語

ECS除可觀察黏膜細(xì)微結(jié)構(gòu)外，還可在細(xì)胞水平實(shí)時(shí)觀察黏膜炎癥細(xì)胞，做出診斷及炎癥級(jí)別評(píng)估，ECSS操作簡單，所獲數(shù)據(jù)可以很好地預(yù)測(cè)UC的組織學(xué)活性。但ECS與橫斷面成像及組織學(xué)檢測(cè)不同，僅能觀察水平面表層黏膜，在IBD常規(guī)診治中的應(yīng)用仍然需要前瞻性和隨機(jī)試驗(yàn)評(píng)估，同時(shí)也需要對(duì)UC和CD患者進(jìn)行個(gè)體化監(jiān)測(cè)，并同時(shí)對(duì)內(nèi)鏡醫(yī)生在技術(shù)和圖像模式識(shí)別方面進(jìn)行專門培訓(xùn)。若能在ECS觀察的基礎(chǔ)上省去活檢，更靈活地執(zhí)行內(nèi)鏡下切除或其他形式的治療，未來或可提高健康管理的成本效率，為IBD的臨床診治和檢測(cè)開辟新的途徑。