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看似「矛盾」的「ANA 陰性、ds

 余舍我的圖書館 2016-08-20

自身免疫病相關(guān)抗體檢測平臺,是實驗室提供多種自身抗體檢測平臺,包括:IIFA、ELISA、免疫印跡法、放免法等。


針對同一種或同一類自身抗體,存在一種以上的檢測方法,根據(jù)方法靈敏度和特異性的差異,在出現(xiàn)陽性或可疑結(jié)果時,可通過不同的方法進行佐證,以期為臨床診斷提供可靠結(jié)果。


相信大多數(shù)從事自身免疫病抗體實驗室檢測的同仁,在日常工作中,會遇到各種讓人糾結(jié)的問題。其中之一便是「ANA(IIFA,間接免疫熒光法)陰性,ds-DNA(ELISA 或免疫印跡法)陽性」,碰到這樣的情況,在實驗室內(nèi)部該怎樣處理?與臨床醫(yī)生進行溝通時又該如何解釋?


「ANA(IIFA,間接免疫熒光法)陰性,ds-DNA(ELISA 或免疫印跡法)陽性?!惯@種初篩檢測結(jié)果,并不少見??赡艿脑蛴幸韵聨c:


1. 以 HEp-2 為基質(zhì)的 ANA IIF 法,在 2014 年 Annals of the Rheumatic Diseases 中專家共識中指出其為「SARD(系統(tǒng)性自身免疫性風(fēng)濕?。嶒炇以\斷的推薦初篩檢測方法」。該方法靈敏度高,這與 HEp-2 細胞的特性相關(guān):約含 100 中以上不同靶點自身抗原;有些自身抗體無需進一步確認實驗即可明確(如抗著絲點抗體);非常有利于多種自身抗體共存的自免病的診斷;可用于發(fā)現(xiàn)新的自身抗體。


但同時,其缺點也不容忽視:判斷結(jié)果存在主觀性;難以進行標(biāo)準(zhǔn)化;判讀需要培訓(xùn)和專業(yè)知識;對一些特定自身抗體敏感度低(如抗 Jo-1 抗體、抗核糖體 P 蛋白抗體、抗 SS-A/Ro60 抗體、抗 Ro52/TRIM21 抗體),這些抗體可溶性較強,在制備基質(zhì)片的過程中容易丟失;特異性低(有較高的假陽性率)。


2. 抗 ds-DNA 特異性抗體分為高親和力抗體和低親和力抗體,高親和力抗 ds-DNA 抗體對 SLE 診斷有更高的特異性,低親和力抗 ds-DNA 抗體的特異性不高,在其它風(fēng)濕免疫性疾病中也會出現(xiàn)。


其常規(guī)檢測方法有:a. IIFA,包括綠蠅短膜蟲法(CLIIF)和馬疫錐蟲法(TEIIF);b. ELISA 法;c. Farr 法(放免法);d. DIGFA(金標(biāo)法);e. 印跡法。


目前國內(nèi)臨床實驗室常用方法為 CLIIF、ELISA、印跡法。其中 ELISA 法的包被抗原一般為人工純化的 ds-DNA 抗原,抗原在包被過程中,容易造成部分 DNA 內(nèi)部微店變性解鏈成單鏈 DNA,會出現(xiàn)假陽性結(jié)果,該方法靈敏度較高,更適用于檢測低親和力抗體;CLIIF 法包被抗原中 ds-DNA 天然、純凈、干擾因素少,特異性較高,較適用于檢測高親和力抗體。印跡法在靈敏度和特異性方面都不如前兩者,但操作簡單,對技術(shù)和經(jīng)驗要求不高。


鑒于以上原因,出現(xiàn)這種看似「矛盾」的結(jié)果,作為實驗室工作人員,我們該如何進一步做確證實驗和與臨床醫(yī)生進行溝通?


以下流程圖僅供參考,歡迎各位同仁踴躍討論:


本文作者:石楠,山東濟南迪安醫(yī)院檢驗中心

圖片:Shutterstock.com

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