中國(guó)保健營(yíng)養(yǎng)（中旬刊）2012年09月第10期：1-2  

鐵皮石斛抗腫瘤成分提取及其抗腫瘤機(jī)理研究

李宇清1 段俊2

1、廣州醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院腫瘤科，510260，

2、中國(guó)科學(xué)院華南植物園，510650

鐵皮石斛為蘭科石斛屬多年生草本植物。石斛可分為黃草、金釵、馬鞭等數(shù)十種，鐵皮石斛在《中國(guó)藥典》2000和2005年版均有收載。鐵皮石斛因表皮呈鐵綠色而得名，為石斛之極品，以其莖入藥，嫩莖扭成螺旋狀或彈簧狀后曬干，商品稱為耳環(huán)石斛，又名楓斗，屬補(bǔ)益藥中的補(bǔ)陰藥。從中醫(yī)學(xué)角度總結(jié)鐵皮石斛主要的十大功效有：1、滋養(yǎng)陰津，2、增強(qiáng)體質(zhì)，3、補(bǔ)益脾胃，4、護(hù)肝利膽，5、強(qiáng)筋降脂，6、降低血糖，7、抑制腫瘤，8、明亮眼睛，9、滋養(yǎng)肌膚，10、延年益壽。

歷代醫(yī)家對(duì)鐵皮石斛的藥用價(jià)值多有闡述，當(dāng)代醫(yī)學(xué)對(duì)其成分分析和相應(yīng)藥用價(jià)值的研究日益增多，從化學(xué)成分分析上發(fā)現(xiàn)石斛屬植物中化學(xué)成分多種多樣，主要有效成分為石斛類多糖及生物堿。數(shù)十年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者就對(duì)石斛屬多種植物進(jìn)行化學(xué)成分研究，從中分離鑒定出生物堿類、多糖類、倍半萜類、菲醌類、聯(lián)芐類、芴酮類、香豆素類、甾體類、三萜苷類以及揮發(fā)油等多種化學(xué)成分[1]。

鐵皮石斛中一種重要的活性物質(zhì)是多糖，且含量較高。各種石斛中多糖的含量各有差別，并且與提取方法也有關(guān)系。多糖采用水提法,提取時(shí)的煎煮時(shí)間、煎煮次數(shù)、破碎方法、不同固液比等因素有關(guān)，其中煎煮次數(shù)、破碎方法與多糖含量關(guān)系最為顯著[2]。還有作者[3]認(rèn)為預(yù)處理對(duì)多糖含量提取有很大影響，未脫脂和醇溶性糖使多糖提取含量偏小，未脫蛋白使多糖提取含量偏大，可能石斛成分中非糖分子的存在，特別是蛋白質(zhì)，對(duì)多糖提取含量有很大影響。鐵皮石斛中多糖含量一般在20-30%之間，其多糖成分與增強(qiáng)機(jī)體免疫機(jī)能、抗腫瘤、抗衰老、抗疲勞、降血糖等藥理作用有著密切聯(lián)系。吳人照等[4]用易卒中型自發(fā)性高血壓大鼠模型證明鐵皮石斛多糖為鐵皮石斛降低血壓、預(yù)防中風(fēng)作用的主要有效成份。實(shí)驗(yàn)證明從鐵皮石斛中能分離純化得到三種多糖Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，并確定它們?yōu)橐活怬-乙酰葡萄甘露聚糖。楊虹等[5]運(yùn)用糖組成分析、甲基化分析及NMR等方法研究鐵皮石斛多糖DT2、DT3的化學(xué)結(jié)構(gòu)，以α-(1→4)-D-Glc為主鏈，主要含有葡萄糖、半乳糖、木糖及少量阿拉伯糖和甘露糖。多糖成分具有增長(zhǎng)T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞和巨噬細(xì)胞功能的作用。張紅玉等[6]的實(shí)驗(yàn)顯示鐵皮石斛多糖對(duì)S180實(shí)體瘤有一定的抑制作用，其抑瘤率為9.7%-26.8%。鐵皮石斛多糖對(duì)S180肉瘤小鼠T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能、NK活性、巨噬細(xì)胞吞噬功能及溶血素值均有明顯提高作用。

有研究認(rèn)為，鐵皮石斛多糖能可增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬作用，顯著提升小白鼠外周白細(xì)胞數(shù)和促進(jìn)淋巴細(xì)胞產(chǎn)生移動(dòng)抑制因子，強(qiáng)有力地消除實(shí)驗(yàn)條件下環(huán)磷酰胺的加入所引起的外周白細(xì)胞的劇烈下降，解除其破壞性的副作用。張中建等[7]通過(guò)二硝基氟苯誘導(dǎo)小鼠遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)來(lái)觀察鐵皮石斛制劑不同劑量(1000mg/kg、333mg/kg、167mg/kg)對(duì)小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用，結(jié)果顯示鐵皮石斛制劑具有較好的免疫調(diào)節(jié)作用。何鐵光等[8]從鐵皮石斛原球莖中提取水溶性粗多糖(DCPP)通過(guò)分離純化實(shí)驗(yàn),得到分子量為189kD的均一性多糖DCPP1a-1(由甘露糖和葡萄糖組成)，經(jīng)研究初步表明DCPP1a-1具有一定的抑制小白鼠H22實(shí)體瘤的作用，且在低劑量下能夠提高肝癌(H22)小鼠的胸腺指數(shù)和脾指數(shù)，表現(xiàn)出一定的免疫力。鮑麗娟等[9]試驗(yàn)表明，鐵皮石斛水提物對(duì)人宮頸癌HelaS3和肝癌HepG2細(xì)胞株均有不同程度地抑制作用，可引起腫瘤細(xì)胞的凋亡,且在所選濃度范圍內(nèi)對(duì)劑量和時(shí)間有依賴性。羅慧玲等[10]應(yīng)用H1-TdR釋放法測(cè)定CB-LAK和PB-LAK細(xì)胞的殺傷活性。結(jié)果表明鐵皮石斛多糖與rIL-2聯(lián)合誘導(dǎo)，能顯著增強(qiáng)臍帶血LAK細(xì)胞和腫瘤患者外周血LAK細(xì)胞殺傷腫瘤細(xì)胞的作用，因此鐵皮石斛多糖可作為生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑用于LAK/rlL-2免疫治療。羅傲雪等[11]也曾對(duì)迭鞘石斛三種提取物進(jìn)行體內(nèi)外抗腫瘤作用研究，發(fā)現(xiàn)多糖類成分正是迭鞘石斛中具有抗腫瘤作用的主要活性成分，能顯著降低機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化程度，減輕細(xì)胞損傷。提示迭鞘石斛多糖可能通過(guò)增強(qiáng)機(jī)體抗氧化的能力，從而提高免疫功能來(lái)對(duì)抗腫瘤的侵襲。而鐵皮石斛多糖的濃度與其抗氧化的性能也有梯度關(guān)系。由此可見(jiàn)鐵皮石斛多糖具有增強(qiáng)免疫功能的功能。

鐵皮石斛中不僅具有豐富的多糖成分通過(guò)抗氧化作用或增強(qiáng)機(jī)體細(xì)胞免疫功能間接抗腫瘤作用,還具有直接的抗癌活性,物質(zhì)基礎(chǔ)是其含有的菲類和聯(lián)芐類化合物，對(duì)腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期以及細(xì)胞周期蛋白表達(dá)有影響，使癌細(xì)胞的增殖受到抑制。這些物質(zhì)多采用乙醇和乙酸乙酯等有機(jī)溶劑提取。馬國(guó)祥等[12]在對(duì)單體毛蘭素、毛蘭菲、鼓槌菲進(jìn)行的藥理研究結(jié)果表明，對(duì)小鼠肝癌以毛蘭素作用最強(qiáng),其抑瘤率為50.82%；對(duì)艾氏腹水癌以鼓槌菲作用最強(qiáng),其抑瘤率為62.25%。鼓槌石斛的乙醇提取物及從中分得的3個(gè)單體毛蘭素(erianin)、毛蘭菲(confusarin)、鼓槌菲(chrysotoxene)均有不同程度抗腫瘤活性。用腫瘤細(xì)胞株作體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，鼓槌石斛中聯(lián)芐類化合物以及菲類化合物包括毛蘭素、鼓槌石斛素、菲類化合物鼓槌菲和毛蘭菲對(duì)人白血病細(xì)胞株K562的生長(zhǎng)具有不同的抑制作用，并且隨著藥物濃度的增加，抑制細(xì)胞增殖的作用愈強(qiáng)。韓國(guó)學(xué)者Lee報(bào)道金釵石斛的乙酸乙酯提取物對(duì)腫瘤細(xì)胞株A-549(人體肺癌細(xì)胞)、SK-OV-3(人體卵巢腺癌細(xì)胞)和HL-60(人體早幼粒細(xì)胞白血病)有顯著的細(xì)胞毒性作用。從粗提物中分離鑒定出的2個(gè)化合物L(fēng)usianthridin和denbinobin具有與粗提物同樣的藥理作用，且前者對(duì)移植肉瘤S180也有抑制作用[13]。除直接抗腫瘤增殖作用之外，鼓槌石斛在多藥耐藥性方面的作用也有報(bào)道,其成分毛蘭素中國(guó)保健營(yíng)養(yǎng)（中旬刊）2012年09月第09期(erianin)、鼓槌素(chrysotoxene)能在一定程度上增加阿霉素在多藥耐藥性細(xì)胞株中的積累可對(duì)抗腫瘤的多藥耐藥性[14]。而利用反相高效液相色譜法測(cè)定分析后發(fā)現(xiàn),鐵皮石斛也含有鼓槌菲(chrysotoxene)和毛蘭素(erianin)這兩種抗癌物質(zhì)。AdrianaKovacs更認(rèn)為石斛菲具有包括細(xì)胞毒、抗菌、解痙、抗炎、抗血小板聚集、抗過(guò)敏活性和植物毒性等多種藥物學(xué)效能[15]。

石斛中聯(lián)芐類化合物的母核可能是抗血管新生作用的藥效團(tuán)[16]。從金釵石斛中提取的3種單體化合物——玫瑰石斛素(Crepidatin)、鼓槌聯(lián)芐(Chrysotobibenzyl)、4,4'-二羥基-3,3',5-三甲氧基二芐(Moscatilin)對(duì)人肝癌高侵襲細(xì)胞株的增殖具有一定抑制作用[17]。張雪等[18]對(duì)金釵石斛體積分?jǐn)?shù)60％乙醇提取物中的化學(xué)成分進(jìn)行分離鑒定發(fā)現(xiàn)其中的聯(lián)芐類和酚酸類化合物大多具有不同程度的抗氧化活性，活性的強(qiáng)弱與分子結(jié)構(gòu)之間存在一定的相關(guān)性。與金釵石斛和鼓槌石斛相比，鐵皮石斛也含有菲類和聯(lián)芐類物質(zhì)[石斛常識(shí)]，它們可能是鐵皮石斛抗腫瘤作用的主要物質(zhì)基礎(chǔ)。可見(jiàn)石斛抗腫瘤作用的主要物質(zhì)基礎(chǔ)可能是菲類和聯(lián)芐類物質(zhì)，但其抗腫瘤作用的機(jī)制未明。其機(jī)制可能是影響蛋白質(zhì)的合成。有報(bào)道一些聯(lián)芐類化合物為秋水仙素的結(jié)構(gòu)類似物，認(rèn)為它們是秋水仙素與微管蛋白結(jié)合的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑，藥物與紡錘絲微管蛋白結(jié)合，使其變性，從而影響微管蛋白裝配和紡錘絲的形成，作用于有絲分裂中期。

由于鐵皮石斛具有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能和直接抗腫瘤增殖作用，臨床上常用于惡性腫瘤的輔助治療[20，21]，因此近年來(lái)石斛在惡性腫瘤中的治療研究多與放療過(guò)程相結(jié)合[22]?；阼F皮石斛具有增強(qiáng)T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的作用，對(duì)治療鼻咽癌、何杰金病、非何杰金淋巴瘤等多種癌癥有良好的療效，用于改善腫瘤患者的臨床癥狀，減輕放、化療引起的副作用，或以復(fù)方發(fā)揮其益氣養(yǎng)陰生津的輔助治療功效，有望開發(fā)成為有應(yīng)用前景的中藥免疫增強(qiáng)劑或從中分離出新的抗癌藥物。

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廣東省中醫(yī)藥局課題（項(xiàng)目編號(hào)：2009422）