血液樣本采集和血涂片制備

1血液由紅細胞，白細胞，血小板和血漿組成。

2離體后的血液自然凝固，分離出來的淡黃色透明液體稱為血清

3血清與血漿的區(qū)別是血清缺少某些凝血因子

4血清適用于臨床化學(xué)和臨床免疫學(xué)檢查

5正常人血量約為（70土10ml）/kg體重，成人4~5L，占體重的6%~8%，其中血漿占55%，血細胞占45%

6血液的紅色來自紅細胞內(nèi)血紅蛋白，動脈血氧合血紅蛋白含量較高，呈鮮紅色，靜脈血還原血紅蛋白含量高，呈暗紅色

7嚴重一氧化碳中毒或氰化物中毒者血液呈櫻紅色

8正常人血液ph值的波動范圍是7.35~7.45

9正常男性的血液比密為1.055~1.063，女性為1.051~1.060，相對黏度為4~5，血漿比密為1.025~1.030，血細胞比密為1.090。血液比密與紅細胞含量，紅細胞內(nèi)血紅蛋白含量有關(guān)。血漿比密和血漿內(nèi)蛋白濃度有關(guān)

10血液具有紅細胞的懸浮穩(wěn)定性，粘滯性，凝固性這三種特性

11正常人的血漿黏度約為生理鹽水黏度的1.6倍

12血液黏度與血細胞比容，血漿黏度有關(guān)

13血液生理功能包括：運輸功能，協(xié)調(diào)功能，維護集體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定和防御功能

14靜脈血通常使用的采血部位是肘部靜脈，手背靜脈，內(nèi)踝靜脈，股靜脈

15在靜脈采血時為了避免血小板激活，常使用塑料注射器和硅化處理后的試管或者塑料管

16世界衛(wèi)生組織（who）推薦采集左手無名指指端內(nèi)側(cè)血液，嬰幼兒可采集拇趾或足跟內(nèi)外側(cè)緣血液，嚴重燒傷患者可選擇皮膚完整處采血

17彩色真空定量采血用于葡萄糖，糖耐量測試，添加的抗凝劑是氟化鈉

18彩色真空管定量采血用于血培養(yǎng)，應(yīng)添加的抗凝劑是多聚茴香腦硫酸鈉

19皮膚采血法的缺點是易于溶血，凝血，混入組織液，而且局部皮膚揉擦，針刺深度不一，個體皮膚厚度差異等都影響檢查結(jié)果，所以，皮膚采血檢查結(jié)果重復(fù)性差，準確性不好

20采血方法應(yīng)在患者，采血，溶血，樣本處理，實驗結(jié)果分析等方面進行質(zhì)量控制

21乙二胺四乙酸鹽能與血液中鈣離子結(jié)合成螯合物，使鈣離子失去凝血作用，組織血液凝固

22 EDTA鹽對血細胞形態(tài)，血小板計數(shù)影響很小，適用于血液學(xué)檢查，尤其是血小板計數(shù)

23草酸鹽的優(yōu)點是溶解度好，價廉

24肝素可加強抗凝血酶滅活絲氨酸蛋白酶作用，阻止凝血酶的形成，并阻止血小板聚集等作用，從而阻止血液凝固

25枸櫞酸鈉能與血液中鈣離子結(jié)合成螯合物，枸櫞酸鈉與血液的抗凝比例為1：9或1：4

26采用手工推片法制備血涂片時，通常推片與載玻片保持25~30度角

27采用厚血膜涂片法制備血涂片時，載玻片中央置血1滴，用推片將血由內(nèi)向外旋轉(zhuǎn)涂成厚薄均勻，直徑約1.5cm的圓形血膜，待干后，加蒸餾水使紅細胞溶解，再干后染色鏡檢

28將適量伊紅，亞甲基藍溶解在甲醇中，即為瑞氏染料

29瑞氏染色法是最經(jīng)典，最常用的染色法，尤其對于細胞質(zhì)成分，中性顆粒等可獲很好的染色效果，但對細胞核的著色能力略差

30血液制備涂片時，血滴越大，角度越大，推片速度越快，血膜越厚，反之則越薄

紅細胞檢查

1血液中數(shù)量最多的有形成分是紅細胞，起源于骨髓造血干細胞

2晚幼紅細胞通過脫核成為網(wǎng)織紅細胞，這一過程在骨髓中進行，約需72h

3網(wǎng)織紅細胞經(jīng)約48h成完全成熟的紅細胞，釋放入血液，平均壽命120d，衰老紅細胞主要在脾破壞，分解為鐵，珠蛋白和膽紅素

4紅細胞生理功能是通過胞內(nèi)的血紅蛋白來實現(xiàn)的，紅細胞有交換和攜帶氣體的功能

5血紅蛋白分子由亞鐵血紅素和珠蛋白構(gòu)成

6血紅蛋白分子是一種微紅色的膠體物質(zhì)，是一種呼吸載體，每克血紅蛋白可攜帶1.34ml氧

7新生兒由于出生前處于生理性缺氧狀態(tài)，故紅細胞明顯增高，較成人約增加35%，出生2周后逐漸下降，2個月嬰兒約減少30%

8真性紅細胞增多癥，良性家族性紅細胞增多癥等能引起原發(fā)性紅細胞增多

9房室間隔缺損，法洛四聯(lián)癥等先天性心血管疾病可引起繼發(fā)性紅細胞增多

10嘔吐，嚴重腹瀉，多汗，多尿，大面積燒傷，晚期消化道腫瘤而長期不能進食等均可引起相對性紅細胞增多

11改良牛鮑計數(shù)板用優(yōu)質(zhì)厚玻璃制成，每塊計數(shù)板分為兩個計數(shù)池，計數(shù)池兩側(cè)各有一條支持柱，將特制的專用蓋玻片覆蓋其上，形成高0.10mm的計數(shù)池

12紅細胞計數(shù)采用的蓋玻片是專用的玻璃蓋片，要求表面平整光滑，兩面平整度在0.002mm以內(nèi)，蓋玻片規(guī)格是24mm*20mm*0.6mm

13紅細胞計數(shù)時需遵循一定方向逐格進行，以免重復(fù)或遺漏，對壓線細胞采用數(shù)左不數(shù)右，數(shù)上不數(shù)下的原則

14Heyem紅細胞稀釋液中，Nacl具有調(diào)節(jié)滲透壓的作用

15枸櫞酸鈉稀釋液中，枸櫞酸鈉具有抗凝和維持滲透壓的作用

16枸櫞酸鈉稀釋液中，甲醛具有防腐和固定紅細胞的作用

17血液中血紅蛋白采用比色法測定

18血液中除硫化血紅蛋白外的各種血紅蛋白均可被高鐵氰化鉀氧化為高鐵血紅蛋白。

19正常成年男性Hb含量參考值為120~170g/L，女性為110~150g/L,新生兒170~200g/L

20正常情況下，紅細胞和血紅蛋白量有日內(nèi)波動，上午7時達高峰，隨后下降

21發(fā)生大細胞性貧血或小細胞低色素性貧血時，紅細胞計數(shù)與血紅蛋白濃度不成比例。大細胞性貧血的血紅蛋白濃度相對偏高

22小紅細胞低色素貧血時血紅蛋白減低

23紅細胞形態(tài)檢查與血紅蛋白測定，紅細胞計數(shù)結(jié)果相結(jié)合可粗略推斷貧血原因、

24小紅細胞見于缺鐵性貧血，珠蛋白生成障礙性貧血，遺傳性球形細胞增多癥

25巨紅細胞見于葉酸及維生素B12缺乏所致的巨幼細胞性貧血

26高色素性紅細胞見于巨幼細胞性貧血

27同一血涂片同時出現(xiàn)低色素，正常色素性兩種細胞，又稱雙形性貧血，見于鐵粒幼紅細胞性貧血

28球形紅細胞中央著色深，體積小，直徑與厚度比小于2.4：1.見于遺傳性和獲得性球形細胞增多癥和小兒

29靶形紅細胞見于各種低色素性貧血，阻塞性黃疸，脾切除后

30口形紅細胞見于口形紅細胞增多癥，小兒消化系統(tǒng)疾患引起的貧血，酒精中毒，某些溶血性貧血，肝病和正常人

31瑞氏染色后，胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)形態(tài)不一的藍色顆粒（變行RNA），屬于未完全成熟紅細胞，顆粒大小不一，多少不等，稱嗜堿性點彩紅細胞，見于鉛中毒，正常人

32成熟性紅細胞或幼紅細胞胞質(zhì)內(nèi)含有一個或多個暗紫紅色圓形小體，稱為聚焦小體，為核碎裂，溶解后的殘余部分

33英文縮寫HCT表示血細胞比容，也可以寫作Hct,Ht,PCV

34血細胞比容是指在一定條件下，經(jīng)離心沉淀壓緊的紅細胞在全血樣本中所占比值

35紅細胞平均血紅蛋白含量（MCH）是指每個紅細胞內(nèi)平均所含血紅蛋白的量，以皮克（pg）為單位

36 紅細胞平均血紅蛋白濃度（MCHC）,即平均每升紅細胞中所含血紅蛋白的濃度，以g/l為單位

37紅細胞凝集，嚴重高血糖癥可使MCV假性增高

38魏氏法測定血沉，抗凝劑（枸櫞酸鈉）與血液的比例是1：4

白細胞檢查

1粒細胞起源于造血干細胞，在高濃度集落刺激因子作用下粒系祖母細胞分化為原粒細胞，經(jīng)數(shù)次有絲分裂，依次發(fā)育為早幼粒，中幼粒，晚幼粒，桿狀核和分葉核粒細胞

2一個原粒細胞經(jīng)過增殖發(fā)育，最終生成8~32個分葉核粒細胞。此過程在骨髓中約需10d，成熟粒細胞進入血液后僅存6~10h,然后逸出血管進入組織或體腔內(nèi)

3粒細胞在組織中可行駛防御功能1~2d，衰老的粒細胞主要在單核-巨噬細胞系統(tǒng)破壞，其余從口腔，氣管，消化道，泌尿生殖道排出，同時，骨髓釋放新生的粒細胞補充周圍血而保持白細胞數(shù)量相對穩(wěn)定

4分裂池包括原粒細胞，早幼粒細胞和中幼粒細胞，能合成DNA，具有分裂能力

5進入外周血的成熟粒細胞有一半隨血液而循環(huán)，白細胞計數(shù)值就是循環(huán)池的粒細胞計數(shù)

6嗜酸性粒細胞能釋放組胺酶

7嗜堿性粒細胞內(nèi)的顆粒含有組胺，肝素，過敏性慢反應(yīng)物質(zhì)，嗜酸性粒細胞趨化因子，血小板活化因子

8嗜堿性粒細胞在整個生理功能中突出的特點是參與過敏反應(yīng)

9單核-巨噬細胞具有吞噬病原體功能，吞噬和清理功能，吞噬抗原傳遞免疫信息功能，還參與殺菌，免疫和抗腫瘤作用

10淋巴細胞源于骨髓造血干細胞/祖細胞，是人體主要免疫活性細胞，約占白細胞總數(shù)的1/4

11 B淋巴細胞可經(jīng)抗原激活后分化為漿細胞，產(chǎn)生特異抗體，參與體液免疫

12在胸腺，脾，淋巴結(jié)和其他淋巴組織，依賴胸腺素發(fā)育成熟者稱為T淋巴細胞

13正常情況下，外周血中不會出現(xiàn)有核紅細胞，若出現(xiàn)大量該細胞，其不能被白細胞稀釋液破壞

14血液檢驗中，白細胞計數(shù)指標參考值無性別差異

15正常人外周血涂片白細胞分類中，中性粒細胞所占比例為50%~70%，其增高和減低直接影響白細胞總數(shù)變化

16采用顯微鏡計數(shù)法進行白細胞計數(shù)時，通常吸取白細胞稀釋液0.38ml于小試管中

17正常血涂片白細胞分類計數(shù)，嗜酸性粒細胞占1.5%~5%

18正常中性分葉核粒細胞中以3葉核居多

19感染，理化損傷，血液病，脾功能亢進，免疫性疾病可見中性粒細胞減低

20中性粒細胞核左移是指外周血桿狀核粒細胞增多，出現(xiàn)晚幼粒，中幼粒，早幼粒，原幼粒等細胞

21再生性左移是指核左移伴有白細胞總數(shù)增高者，表示機體反應(yīng)性強，骨髓造血功能旺盛，見于感染，急性中毒，急性溶血，急性失血等

22退行性左移是指核左移而白細胞總數(shù)不增高，甚至減低者，見于再生障礙性貧血，粒細胞減低癥，嚴重感染

23中性粒細胞核分葉5葉以上者超過3%則稱為核右移

24中性粒細胞核右移形成的原因是造血物質(zhì)缺乏，脫氧核糖核酸減低，骨髓造血功能減退

25淋巴細胞數(shù)量減低常見于接觸放射線，應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素，促腎上腺皮質(zhì)激素，嚴重化膿性感染

26外周血嗜酸性粒細胞濃度在1d內(nèi)有波動，白天低，夜間高，上午波動大，下午較恒定，與糖皮質(zhì)激素脈沖式分泌有關(guān)

27Dohle小體是中性粒細胞胞質(zhì)因毒性變而保留的嗜堿性區(qū)域，呈圓形，梨形或云霧狀，界限不清，染成灰藍色，直徑1~2um，亦可見于單核細胞

28巨多分葉核中性粒細胞的細胞體積較大，直徑16~25um，核分葉常在5葉以上，甚至在10葉以上，核染色質(zhì)疏松

29瑞氏染色中性分葉核粒細胞胞質(zhì)呈淺紫紅色

30瑞氏染色嗜堿性粒細胞胞質(zhì)呈藍黑色

31外周血小淋巴一般無顆粒，大淋巴細胞可有少量粗大，不均勻，深紫紅色顆粒

32瑞氏染色單核細胞，直徑10~20um，為外周血中最大的細胞

33異型淋巴細胞按其形態(tài)學(xué)特征分為3型：1型（空泡型，漿細胞型），2型（不規(guī)則型，單核細胞型）3型（幼稚型）

34淋巴細胞受電離輻射后出現(xiàn)形態(tài)學(xué)改變：核固縮，核破碎，雙核，衛(wèi)星核淋巴細胞（胞質(zhì)中主核旁出現(xiàn)小核）

35火焰狀漿細胞見于IgA型骨髓瘤

血液分析儀及其臨床應(yīng)用

1電阻抗法血液分析儀檢測原理包括血細胞計數(shù)原理（庫爾特原理），白細胞分類計數(shù)原理，血紅蛋白測定原理三種

2根據(jù)電阻抗法原理，經(jīng)溶血劑處理，脫水，不同體積的白細胞通過小孔時，脈沖大小不同，將體積為35~450fl白細胞，分為256個通道

3電阻抗法分析血液時，位于90~160fl單個核細胞區(qū)的細胞稱為中間型細胞

4血液分析儀血紅蛋白測定原理中，應(yīng)在波長530~550nm下比色

5白細胞經(jīng)過氧化物酶染色后，胞質(zhì)內(nèi)顯示細胞化學(xué)反應(yīng)，過氧化物酶活性為嗜酸性粒細胞>中性粒細胞>單核細胞，淋巴細胞核嗜堿性粒細胞無過氧化物酶活性，這是血液分析儀白細胞分類的基礎(chǔ)

6正常白細胞直方圖，在35~450fl范圍內(nèi)將白細胞分為三群，左側(cè)峰又高又陡為淋巴細胞峰

7正常白細胞直方圖中，左右兩峰間的谷較平坦，為單個核細胞峰

8在白細胞直方圖中，淋巴細胞峰左側(cè)區(qū)域異常的主要原因是有核紅細胞，血小板凝集，巨大血小板，未溶解紅細胞，瘧原蟲，冷凝集蛋白，脂類顆粒，異形淋巴細胞

9在白細胞直方圖中，淋巴細胞峰右移，與單個核細胞峰左側(cè)相連并抬高，主要原因是急性淋巴細胞白血病，慢性淋巴細胞白血病，異形淋巴細胞

10在白細胞直方圖中，單個核細胞峰與中性粒細胞峰之間區(qū)域異常，主要原因是未成熟的中性粒細胞，異常細胞亞群，嗜酸性粒細胞增多

11正常紅細胞直方圖，在36~360fl范圍內(nèi)分布兩個細胞群體，從50~125fl區(qū)域有一個兩側(cè)對稱，較狹窄的曲線，為正常大小的細胞，從125~200fl區(qū)域有另一個低而寬的曲線，為大紅細胞，網(wǎng)織紅細胞，當紅細胞體積大小發(fā)生變化時，峰可左移或右移，或出現(xiàn)雙峰

12正常血小板直方圖，在2~30fl范圍內(nèi)分布，呈左偏態(tài)分布，集中分布于2~15fl內(nèi)，當有大血小板或小紅細胞，聚集血小板時，直方圖顯示異常

13ICSH分布的血液分析儀評價方案包括：可比性，準確性，總重復(fù)性，精密度，線性范圍，攜帶污染

14精密度分為批內(nèi)，批間兩種精度。批內(nèi)精度是對同一批樣本重復(fù)測定結(jié)果的評價，批間精度是對兩批或兩批以上樣本重復(fù)測定結(jié)果的評價

15紅細胞血紅蛋白分布寬度（HDW）是反映紅細胞內(nèi)Hb含量異質(zhì)性的參數(shù)，用單個紅細胞Hb含量的標準表示，正常參考范圍24~34g/l

16血小板分布寬度是儀器測量一定數(shù)量血小板體積后，計算所得外周血血小板體積大小異質(zhì)性參數(shù)

17血小板分布寬度減低見于反應(yīng)性血小板增多癥

18小細胞性貧血，當RDW正常時，紅細胞主峰左移，分布在55~100fl，波峰在75fl處，基底較窄，為小細胞低色素均一性圖形，見于輕型地中海貧血

19小細胞性貧血，當RDW輕度增高時，紅細胞主峰左移，分布在55~100fl,波峰在65fl處，為小細胞低色素和細胞不均一性圖形，見于缺鐵性貧血

20正常細胞性貧血，當RDW輕度增高時，紅細胞分布在44~120fl，波峰在80fl處，為紅細胞不均一性圖形，見于血紅蛋白異常，骨髓纖維化

21正常細胞性貧血，當RDW明顯增高時，紅細胞分布在40~150fl，波峰在90fl處，為紅細胞不均一性圖形，見于早期或混合性營養(yǎng)不良

22患者，女，32歲，因乏力，面色蒼白就診，實驗室全血細胞檢查：RBC3.12，Hb88,WBC4.3,PLT100,RDW27.3%,MCV77,MCH35.5,MCHC338,紅細胞直方圖顯示：紅細胞主峰左移，分布在55~100fl，波峰在65fl，血涂片紅細胞體積小，大小不均，初步診斷為貧血，則最可能患缺鐵性貧血

來源：中華檢驗醫(yī)學(xué)網(wǎng) （原文網(wǎng)址見本文“閱讀原文”）

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