相信大家在臨床都見(jiàn)過(guò)G試驗(yàn)與GM試驗(yàn),同樣作為針對(duì)真菌感染的檢驗(yàn),其有何區(qū)別與聯(lián)系呢?今天的一頁(yè)手冊(cè)我們就來(lái)討論一下這兩項(xiàng)檢驗(yàn)。 真菌(Fungus)是一種真核生物,現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了七萬(wàn)多種真菌,而這些真菌中,對(duì)人類(lèi)有致病性的約有300多個(gè)種類(lèi)。除新型隱球菌、念珠菌和蕈外,醫(yī)學(xué)上有意義的致病性真菌幾乎都是霉菌。 (圖1 常見(jiàn)的可能致病的真菌種類(lèi)) 真菌具有堅(jiān)固的細(xì)胞壁和真正的細(xì)胞核,以寄生或腐生方式生存,典型者兼有有性生殖和無(wú)性生殖,產(chǎn)生各種形態(tài)的孢子。
血清G試驗(yàn) G試驗(yàn)是目前常見(jiàn)的檢測(cè)真菌的試驗(yàn)。 G試驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)原理 G試驗(yàn)檢測(cè)的是真菌的細(xì)胞壁成分——1,3-β-D-葡聚糖(BG)。人體的吞噬細(xì)胞吞噬真菌后,能持續(xù)釋放該物質(zhì),使血液中含量增高。 1-3-β-D-葡聚糖可特異性激活鱟(Limulus)變形細(xì)胞裂解物中的G因子,引起裂解物凝固,故稱(chēng)G試驗(yàn)。
G試驗(yàn) 臨床價(jià)值 G試驗(yàn)適用于除隱球菌和接合菌(毛霉菌)外的所有深部真菌感染的早期診斷。同時(shí)由于BG定植時(shí)很少釋放入血,因此可有助于鑒別真菌侵襲與定植(如侵襲性念珠菌病、侵襲性曲霉菌病、肺孢子菌肺炎等)。 G試驗(yàn) 檢驗(yàn)方法 常用的G試驗(yàn)的檢測(cè)方法有兩種,分別是Fungitec G test和Glucatell test。臨床上常用的是Fungitec G test。需要特別指出的是,Glucatell test的說(shuō)明書(shū)上面明確注明,目前該試驗(yàn)僅用于臨床研究。二者的比較見(jiàn)于下表。 G試驗(yàn) 假陽(yáng)性 可能造成血清G試驗(yàn)假陽(yáng)性的情況: 血液透析患者; 細(xì)菌血癥、肝硬化、小腸結(jié)腸炎; 患者使用凝血因子、白蛋白、免疫球蛋白;靜脈使用抗生素(阿莫西林-克拉維酸、氨芐西林-舒巴坦等); 抗腫瘤準(zhǔn)備; 香菇多糖、裂褶菌多糖; 手術(shù)中使用棉紗墊、棉拭子等; 標(biāo)本溶血、脂血、黃疸; 標(biāo)本污染(床邊消毒紗布,實(shí)驗(yàn)室環(huán)境粉塵、實(shí)驗(yàn)耗材如槍頭、試管、玻璃管)。 G試驗(yàn) 假陰性 可能造成血清G試驗(yàn)假陰性的情況: 隱球菌具有厚壁包膜,生長(zhǎng)緩慢,導(dǎo)致假陰性; 局灶性曲霉病,BG很少釋放入血; 抗真菌藥物的使用。 總體來(lái)說(shuō),G試驗(yàn)是一個(gè)泛真菌血清標(biāo)志物,其結(jié)果陽(yáng)性無(wú)法獲知是哪種真菌感染,但有高的陰性預(yù)測(cè)值,連續(xù)≥2次G試驗(yàn)陽(yáng)性可提高G試驗(yàn)對(duì)IFD診斷的特異度,對(duì)于侵襲性真菌病早期診斷有一定價(jià)值。念珠菌定植不引起G試驗(yàn)升高,抗真菌藥物治療不影響其敏感度,且該指標(biāo)能動(dòng)態(tài)反映感染程度和抗真菌治療療效,但需要關(guān)注結(jié)果的假陽(yáng)性。 血清GM試驗(yàn) GM試驗(yàn)同樣是臨床中常用的檢測(cè)真菌感染的方法,主要適于侵襲性曲霉菌感染的早期診斷。 GM試驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)原理 GM試驗(yàn)檢測(cè)的是半乳甘露聚糖(glactomannan,GM)。半乳甘露聚糖是廣泛存在于曲霉和青霉細(xì)胞壁的一種多糖,菌細(xì)胞壁表面菌絲生長(zhǎng)時(shí),半乳甘露聚糖從薄弱的菌絲頂端釋放,是最早釋放的抗原。同時(shí)GM釋放量與菌量成正比,可以反映感染程度。GM試驗(yàn)的檢測(cè)法是一種微孔板雙抗體夾心法(ELISA),采用小鼠單克隆抗體EBA-2,檢測(cè)人血清中的曲霉菌半乳甘露聚糖。在GM試驗(yàn)中,推薦同時(shí)檢測(cè)肺泡灌洗液和血清的GM水平,可提高其檢測(cè)敏感度。 (圖5 GM試驗(yàn)的原理示意圖) GM試驗(yàn) 假陽(yáng)性 可能造成血清GM試驗(yàn)假陽(yáng)性的情況: 使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦; 新生兒和兒童(雙歧桿菌定植,使用乳制品); 血液透析; 自身免疫性肝炎等; 食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物。 GM試驗(yàn) 假陰性 可能造成血清GM試驗(yàn)假陰性的情況: 釋放入血循環(huán)中的曲霉GM并不持續(xù)存在而是會(huì)很快清除; 之前使用抗真菌藥物; 病情不嚴(yán)重; 非粒細(xì)胞缺乏的患者。
GM試驗(yàn)也是臨床中常用的檢測(cè)真菌感染的方法,由于試驗(yàn)檢測(cè)物質(zhì)的特性,GM試驗(yàn)在鑒別侵襲性感染或定植曲霉菌,早期曲霉菌感染的診斷,檢測(cè)感染情況和療效等方面具有很大的優(yōu)勢(shì),但是,GM試驗(yàn)也無(wú)法提示感染的曲霉菌種類(lèi),在這一點(diǎn)上與G試驗(yàn)相同。 由于兩個(gè)實(shí)驗(yàn)的特點(diǎn),臨床上可以將G試驗(yàn)與GM試驗(yàn)聯(lián)合使用,這樣對(duì)于臨床診斷有較大的提示意義。
作者:仰望星空Pie 審閱:北京協(xié)和醫(yī)院檢驗(yàn)科楊啟文 助理研究員 編輯:一枝黃花
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