血常規(guī)檢驗(yàn)不僅是診斷各種血液病的主要依據(jù),而且對(duì)其他系統(tǒng)疾病的診斷和鑒別也可提供重要的信息,是臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中最常用、最重要的基本內(nèi)容之一,因此,血常規(guī)檢測(cè)準(zhǔn)確與否致關(guān)重要。本文的目的是使血常規(guī)檢驗(yàn)在檢測(cè)中獲得更為穩(wěn)定、可靠、準(zhǔn)確的有效數(shù)據(jù),防止臨床診療中出現(xiàn)錯(cuò)誤的判斷。所以在實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)中,要充分考慮影響血常規(guī)檢驗(yàn)的多種影響因素,并嚴(yán)格控制。 1 標(biāo)本的采集 為了取得準(zhǔn)確、可靠的檢驗(yàn)結(jié)果,必須取得高質(zhì)量的標(biāo)本。高質(zhì)量的標(biāo)本是高質(zhì)量檢驗(yàn)的第一步。保證血液標(biāo)本中各項(xiàng)細(xì)胞的形態(tài)完整是血常規(guī)高質(zhì)量標(biāo)本的最基本的要求。血液細(xì)胞檢驗(yàn)標(biāo)本的制備分為采集和抗凝2個(gè)步驟。
1.1 標(biāo)本的采集 1.1.1 采血部位的選擇 最常用的途徑是靜脈采血和末梢毛細(xì)血管采血。各類文獻(xiàn)均表明,靜脈血血樣是最可靠的標(biāo)本,手指血是末梢毛細(xì)血管血樣中與靜脈血差異最小且較為穩(wěn)定的血樣。有研究表明,與靜脈血相比,手指血的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性仍然較差:白細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯升高而血小板計(jì)數(shù)明顯減低。因此,絕大多數(shù)專家建議:血常規(guī)檢驗(yàn)特別是應(yīng)用血液分析儀時(shí),應(yīng)使用靜脈血。 1.1.2 采集靜脈血 要注意不能在患者輸液滯留針處或輸液靜脈同側(cè)血管采集標(biāo)本,以免造成血液稀釋;止血帶壓迫時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(<1 min ),以免瘀血和血液濃縮。 1.2 標(biāo)本的抗凝 用于血常規(guī)檢驗(yàn)的血樣必須經(jīng)抗凝劑抗凝處理,在目前的眾多抗凝劑中,EDTA鹽(EDTA-Na2,EDTA-K2,EDTA-K3)是對(duì)白細(xì)胞形態(tài)和血小板影響相對(duì)較小的抗凝劑,最適合用于血常規(guī)檢驗(yàn)。除采血因素的影響(生理性因素、采血部位等)外,多數(shù)情況下,血樣的質(zhì)量取決于血液和抗凝劑的比例。血液比例過(guò)高時(shí),由于抗凝劑相對(duì)不足,血漿中出現(xiàn)微凝血塊的可能性增加,在用于血細(xì)胞分析儀時(shí),微凝血塊可能阻塞儀器,同時(shí)影響一些檢驗(yàn)指標(biāo)。血液比例過(guò)低,抗凝劑相對(duì)過(guò)剩,對(duì)檢驗(yàn)指標(biāo)會(huì)造成嚴(yán)重影響。血液經(jīng)EDTA抗凝后,白細(xì)胞的形態(tài)會(huì)發(fā)生改變,這種改變和時(shí)間及EDTA濃度有關(guān)。EDTA的最佳濃度(與血液比)為1.5 mg/ml,如果血樣少,EDTA的濃度達(dá)到2.5 mg/ml,中性粒細(xì)胞腫脹、分葉消失,血小板腫脹、崩解、產(chǎn)生正常血小板大小的碎片,這些改變都會(huì)使血常規(guī)檢驗(yàn)和血細(xì)胞計(jì)數(shù)得出錯(cuò)誤結(jié)果。這一點(diǎn)在用自動(dòng)血細(xì)胞分析儀時(shí)尤為重要。 2 儀器的校準(zhǔn) 血細(xì)胞分析儀只能用儀器配套的校準(zhǔn)物對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn),一些血細(xì)胞分析儀無(wú)配套的校準(zhǔn)物,這種情況下,實(shí)驗(yàn)室只能使用經(jīng)二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)血液分析儀或規(guī)范操作的監(jiān)測(cè)系統(tǒng)定值的新鮮血作為校準(zhǔn)物對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)。有數(shù)臺(tái)的分析儀的需先對(duì)其中一臺(tái)進(jìn)行校準(zhǔn)后,在用新鮮的全血對(duì)其他臺(tái)進(jìn)行校準(zhǔn)。至少半年校準(zhǔn)一次。實(shí)驗(yàn)室有數(shù)臺(tái)血細(xì)胞分析儀的,為了保證不同儀器間檢測(cè)結(jié)果的可比性和準(zhǔn)確性,需對(duì)每臺(tái)儀器進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控、儀器校準(zhǔn)等,以保證檢測(cè)質(zhì)量的措施,此外,還需定期用新鮮血標(biāo)本在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不同型號(hào)的儀器上進(jìn)行結(jié)果比對(duì)。 3 標(biāo)本的儲(chǔ)存 抗凝全血標(biāo)本應(yīng)在室溫條件下(一般血液分析儀要求的室溫條件是8 ℃~25 ℃)。如前文所述,抗凝劑因時(shí)間和濃度的不同,會(huì)造成對(duì)血細(xì)胞形態(tài)的影響。有研究表明,用EDTA抗凝靜脈血標(biāo)本,8 h內(nèi)(室溫)檢測(cè),可以得到最佳的檢測(cè)結(jié)果。白細(xì)胞2 h后粒細(xì)胞形態(tài)可出現(xiàn)變化;如果不能在有效時(shí)間內(nèi)及時(shí)用儀器進(jìn)行檢測(cè)時(shí),須盡快推制血涂片,以便必要時(shí)用顯微鏡對(duì)血涂片進(jìn)行復(fù)查。雖然2℃~8℃可延長(zhǎng)保存時(shí)間,但血小板的體積會(huì)逐漸發(fā)生改變EDTA鹽與血液混合后血小板形態(tài)逐漸變?yōu)榍蛐?,體積由所增大,又研究表明可增大20%左右,1 h后才趨于穩(wěn)定,1 h~6 h后的變化小于3%,故使用血液分析儀對(duì)紅細(xì)胞比容檢測(cè)時(shí)應(yīng)在采血1 h后進(jìn)行。如果不需要血小板和白細(xì)胞分類的準(zhǔn)確數(shù)據(jù),則標(biāo)本可以在2 ℃~8 ℃的條件下存入至24 h。 總之,影響血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果的因素很多,要想取得準(zhǔn)確的檢驗(yàn)數(shù)據(jù),就要在實(shí)驗(yàn)的每一個(gè)步驟中都嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行。 |
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