第二章　腸桿菌科

腸桿菌科：存在于人、動物腸道，生物學性狀相似的一群革蘭陰性桿菌無芽胞桿菌。

第一節(jié)　概述

一．形態(tài)、染色
　　革蘭陰性桿菌、無芽胞，有菌毛，周鞭毛（除志賀、克雷伯、鼠疫），少數(shù)有F、R、Col
二．營養(yǎng)要求、培養(yǎng)：多元立體法
氣體：需氧氣或兼性厭氧，兼具呼吸型或發(fā)酵型
營養(yǎng)：要求不高
生長現(xiàn)象：
液體：混濁
血平板：光滑、濕潤、灰白色、中等大小菌落
三．生化反應(yīng)：
生化反應(yīng)活躍，致病性強的生化反應(yīng)能力弱。
定科試驗：觸酶（+），氧化酶（—）硝（+）
四．抗原構(gòu)造：
O抗原：耐熱，顆粒狀凝集
H抗原：不耐熱，60℃30’破壞
表面抗原：K抗原、Vi抗原
五．遺傳變異現(xiàn)象：
1．S—R變異
2．H—O變異
3．其他變異
六．傳染途徑：
1．致病性腸道桿菌：經(jīng)口多數(shù)，食物中毒、腸熱癥等。
2．條件致病菌：
為醫(yī)院感染的主要病原菌群
重要腸道桿菌種類及所致疾?。篜183
七．致病物質(zhì)：
表面抗原
內(nèi)毒素
腸毒素
八．檢驗方法：啟發(fā)引導法
1．標本采集
腸道外：血、尿、體液、呼吸道
腸道內(nèi)：糞、肛拭
2．分離培養(yǎng)：
腸外標本：增菌（血）→血平板/加Mac
腸內(nèi)標本：標本→SS、Mac
3．鑒定：
鑒定原則：
生化反應(yīng)（KIA，IMVIC、MIU）、抗原構(gòu)造

第二節(jié)　埃希菌屬

一．微生物檢驗：
（一）檢驗程序：
1、項目準備：
（1）標本采集：有血液、尿液、痰液等。
（2）登記
（3）標本處理
2、項目實施：
（1）細菌接種
（2）生化反應(yīng)
（3）血清學鑒定
（4）藥物敏感試驗
3、項目結(jié)果：
鑒定結(jié)果報告
藥物敏感試驗結(jié)果報告
（二）檢驗方法：案例分析法
1、項目準備：
2、項目實施：
（1）直接鏡檢（除血液標本外）：
標本直接涂片，革蘭染色，顯微鏡檢查
（2）分離培養(yǎng)：
1）血標本：
必須增菌。采用無菌手續(xù)抽5ml血液加到50ml增菌液中，經(jīng)37℃后觀察結(jié)果。若出現(xiàn)混勻現(xiàn)象等，則轉(zhuǎn)血平板，經(jīng)37℃后觀察結(jié)果。根據(jù)菌落特征轉(zhuǎn)生化反應(yīng)鑒定細菌，經(jīng)37℃后觀察結(jié)果。做藥物敏感試驗，作出最終報告。
若不出現(xiàn)混勻現(xiàn)象等，則繼續(xù)培養(yǎng)7天，期間每天觀察，若7天不長，報陰性。
2）尿液：
離心，取沉淀涂片、染色、鏡檢。尿液沉淀接種血平板及Mac。經(jīng)37℃后觀察結(jié)果。根據(jù)菌落特征轉(zhuǎn)生化反應(yīng)鑒定細菌，經(jīng)37℃后觀察結(jié)果。
尿→細菌計數(shù)（≥105/ul才有診斷價值）
做藥物敏感，作出最終報告。
3）糞、膿：
標本接種血平板、弱選擇平板經(jīng)37℃后觀察結(jié)果。根據(jù)菌落特征轉(zhuǎn)生化反應(yīng)鑒定細菌，經(jīng)37℃后觀察結(jié)果，做玻片凝集、藥物敏感試驗，作出最終報告。
（3）鑒定試驗：實踐開放法
1）初步鑒定：表18-3
2）最后鑒定：生化反應(yīng)、試劑盒
3）血清學試驗：
①EPEC：分離培養(yǎng)，生化反應(yīng)、抗原分型（O、K）
②ETEC：分離培養(yǎng)，生化反應(yīng)，毒素測定
③EIEC：分離培養(yǎng)，生化反應(yīng)，血清學分型，毒力試驗
④EHEC：分離培養(yǎng)，生化反應(yīng)，血清學分型，有50多個血清型，具有代表性的是O157：H7。
可用山梨醇麥康凱瓊脂（SMAC）直接篩選不發(fā)酵山梨醇的無色菌落，生化反應(yīng)符合標準大腸埃希菌生化反應(yīng)，取次代培養(yǎng)的O157：H7，可用乳膠凝集試驗測O157：H7抗原。
3、項目結(jié)果：
最終報告：“檢出大腸埃希菌”
藥物敏感試驗結(jié)果報告
二、生物學特性：相關(guān)知識
（一）形態(tài)與染色：
革蘭陰性桿菌桿菌、周鞭毛、有菌毛，微莢膜
（二）培養(yǎng)特性：多元立體法
普通平板/血平板：圓、凸、表面光滑、邊齊、灰白色菌落，有的菌株有β-溶血環(huán)
選擇平板：分解乳糖、有色菌落
液體：混濁
（三）生化反應(yīng)：
葡萄糖（⊕）、乳糖（⊕/—或遲）、蔗糖（⊕/—）IMVIC（++--）
（四）．抗原構(gòu)造：
1．O、K（L、A、B）、H
2．血清型表示式：O：K：H
（五）．抵抗力：
膽鹽、煌綠受抑，對氯、鏈、慶大敏感，但易耐藥。
三．致病性和免疫性：相關(guān)知識
（一）．致病物質(zhì)：
1．侵襲力
（1）．K抗原
（2）．菌毛
2．毒素：
內(nèi)毒素
腸毒素：不耐熱（LT）、耐熱（ST）
（二）．所致疾病：多元立體法
1．機會感染：泌尿系統(tǒng)感染等
2．腸內(nèi)感染
（1）腸產(chǎn)毒型大腸埃希菌（ETEC）
（2）腸致病型大腸埃希菌（EPEC）
（3）腸侵襲型大腸埃希菌（EIEC）
（4）腸出血型大腸埃希菌（EHEC）
（5）腸集聚型大腸埃希菌（EAggEC）