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王維新1，張弼2 (1．遼寧醫(yī)學(xué)院畜牧獸醫(yī)學(xué)院，遼寧 錦州 l2lO0l；2．大連鶴圣豐海產(chǎn)品養(yǎng)殖場，遼寧 大連 l16I13) 摘要 總結(jié)了微生態(tài)制劑、免疫增強(qiáng)劑、水產(chǎn)疫苗、中草藥、生物漁藥、環(huán)保型水體消毒方法、健康養(yǎng)殖等水產(chǎn)動(dòng)物無公害防治技術(shù)在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用，為水產(chǎn)動(dòng)物病害的防治提供參考。 關(guān)鍵詞 水產(chǎn)動(dòng)物疾??；無公害；防治 長期以來我國水產(chǎn)動(dòng)物病害控制主要依靠各種農(nóng)藥、抗生素、喹諾酮類、磺胺類、呋喃類等化學(xué)藥物及各種消毒劑。盲目用藥現(xiàn)象較為嚴(yán)重，不僅使藥物的作用效果受到了制約，延誤治病，造成大量死亡和藥物投入的雙重?fù)p失，還可誘發(fā)細(xì)菌基因突變或因轉(zhuǎn)移而產(chǎn)生抗藥性，導(dǎo)致無藥可用；更嚴(yán)重的是藥物在養(yǎng)殖動(dòng)物體內(nèi)殘留和對(duì)養(yǎng)殖環(huán)境的嚴(yán)重污染。長期濫用藥物違背發(fā)展無公害食品的宗旨，危害人體健康，破壞水體生態(tài)環(huán)境。因此，尋找新的環(huán)境友好病害防控措施，使我國的水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)實(shí)現(xiàn)可持續(xù)發(fā)展已迫在眉睫。該文就微生態(tài)制劑、免疫增強(qiáng)劑、水產(chǎn)疫苗、中草藥、生物漁藥等無公害綠色漁藥及銅離子發(fā)生裝置、過氧化氫、臭氧等水體消毒方法在水產(chǎn)動(dòng)物病害防治中的應(yīng)用進(jìn)行了回顧與總結(jié)，以期為今后水產(chǎn)病害的防治提供思路。 1 微生態(tài)制劑的應(yīng)用 隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的迅猛發(fā)展，養(yǎng)殖集約化程度的不斷提高與養(yǎng)殖水質(zhì)持續(xù)惡化的矛盾日趨尖銳，已成為制約我國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)健康持續(xù)發(fā)展的桎梏，已引發(fā)了一系列的環(huán)境和社會(huì)問題。使用微生態(tài)制劑是實(shí)施水產(chǎn)健康養(yǎng)殖的一項(xiàng)重要技術(shù)手段。微生態(tài)制劑又稱微生態(tài)調(diào)節(jié)劑、益生素等，是在微生態(tài)理論指導(dǎo)下，對(duì)從養(yǎng)殖動(dòng)物體內(nèi)或其生活環(huán)境中分離出來的有益微生物，經(jīng)特殊工藝而制成的活菌制劑。具有無毒副作用、無污染、無殘留和低成本等特點(diǎn)，可以抑制病原微生物生長，提高養(yǎng)殖對(duì)象的自身免疫力，維持養(yǎng)殖生態(tài)平衡。 1．1 微生態(tài)制劑的種類及在水產(chǎn)健康養(yǎng)殖中的應(yīng)用 微生態(tài)制劑按用途可分為兩大類：①體內(nèi)微生態(tài)改良劑，即通過添加到飼料中以改良養(yǎng)殖對(duì)象體內(nèi)微生物群落的組成，應(yīng)用較多的有乳酸菌、芽孢桿菌、酵母菌、EM菌等；②水質(zhì)微生態(tài)改良劑，即通過投放到養(yǎng)殖水環(huán)境中以改良底質(zhì)或水質(zhì)，主要有光合細(xì)菌、芽孢桿菌、硝化細(xì)菌、反硝化細(xì)菌、EM菌等。微生態(tài)制劑總體的作用可歸結(jié)為：分解有機(jī)污染物，凈化環(huán)境；補(bǔ)充營養(yǎng)成分，促進(jìn)養(yǎng)殖動(dòng)物健康生長；抑制病原菌，提高機(jī)體免疫力。 1．1．1 光合細(xì)菌。光合細(xì)菌是能進(jìn)行光合作用但不產(chǎn)氧的一類細(xì)菌。其菌體含有豐富蛋白質(zhì)、多種維生素以及生物素、類胡蘿卜素、輔酶Q等生理活性物質(zhì)。光合細(xì)菌能吸收水體中的氨氮、亞硝基氮、硫化氫和有機(jī)酸等有害物質(zhì)，抑制病原菌生長。試驗(yàn)表明，將光合細(xì)菌用于中華絨螯蟹人工育苗中，濃度為1.5×109～2.5×109個(gè)／ml時(shí)，氨氮和亞硝基氮的去除率可達(dá)90％左右，水體中的化學(xué)需氧量也明顯下降，且蟹苗的成活率也比對(duì)照池提高了15.7％。 1．1．2 芽孢桿菌。芽孢桿菌為革蘭氏染色陽性，是普遍存在的一類好氧性細(xì)菌。芽孢桿菌可以以內(nèi)孢子的形式存在于水生動(dòng)物腸道內(nèi)，并分泌活性很強(qiáng)的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶，有效提高飼料利用率，促進(jìn)水生動(dòng)物生長；也可以通過消滅或減少致病菌影響來改善水質(zhì)；還可以分解、吸收水體及底泥中的蛋白質(zhì)、淀粉、脂肪等有機(jī)物改善水質(zhì)和底質(zhì)。劉克琳等用芽孢桿菌做飼料添加劑，對(duì)鯉魚的生長及免疫功能進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果試驗(yàn)組的體重增長比對(duì)照組提高11.8％，飼料系數(shù)下降0.24；試驗(yàn)組鯉魚的免疫器官胸腺、脾臟生長迅速，T、B淋巴細(xì)胞成熟快、數(shù)量增多，產(chǎn)生的抗體增多，免疫功能增強(qiáng)，腸粘膜也出現(xiàn)有利于增重、防病、治病的生理變化。 1．1．3 硝化細(xì)菌。硝化細(xì)菌是亞硝化細(xì)菌和硝化細(xì)菌的統(tǒng)稱，屬于自養(yǎng)性細(xì)菌。亞硝化細(xì)菌將水體中的氨氮轉(zhuǎn)化為亞硝酸氮，硝化細(xì)菌能將亞硝酸鹽氧化為對(duì)水生動(dòng)物無害的硝酸氮。硝化細(xì)菌主要與其他細(xì)菌一起制成復(fù)合微生態(tài)制劑使用。試驗(yàn)表明，用硝化細(xì)菌和反硝化細(xì)菌處理養(yǎng)殖泥鰍廢水24h后，化學(xué)需氧量去除率達(dá)80.6％，亞硝基氮去除率達(dá)90.2％，氨氮去除率達(dá)98.5％。 1．1．4 反硝化細(xì)菌。反硝化細(xì)菌由具有反硝化作用的微生物種群組成，主要是把硝酸或亞硝酸轉(zhuǎn)變成氮?dú)忉尫懦鰜?，多用于底泥處理。在養(yǎng)殖池底層溶解氧低于0.5mg／L、pH值為8～9條件下，反硝化細(xì)菌能利用有機(jī)物中的底泥作為碳源，將底泥中硝化鹽轉(zhuǎn)為無害的氮?dú)馀湃舜髿庵?。反硝化過程能大量消耗底層發(fā)酵產(chǎn)物和沉積于底層的有機(jī)物，迅速減少底層污泥中有機(jī)物和硝酸鹽的含量，有效預(yù)防因氣候突變引起水質(zhì)劇變對(duì)魚蝦產(chǎn)生影響。 1．1．5 乳酸菌。乳酸菌是一種能使糖類發(fā)酵產(chǎn)生乳酸的細(xì)菌，能抑制有害微生物活動(dòng)、致病菌增殖、有機(jī)物腐敗。乳酸菌可以分解在常溫下不易分解的木質(zhì)素和纖維素，使有機(jī)物發(fā)酵轉(zhuǎn)化成對(duì)動(dòng)植物有效的養(yǎng)分。 1．1．6 酵母菌。酵母菌是一群屬于真菌的單細(xì)胞生物，含有較多的氨基酸、維生素等營養(yǎng)成分。在有氧條件下，酵母菌將溶于水的糖類轉(zhuǎn)化為二氧化碳和水。在缺氧的條件下，酵母菌利用糖類作為碳源進(jìn)行發(fā)酵和繁殖酵母菌體。所以酵母菌能有效分解溶于池水中的糖類，迅速降低水中生物耗氧量。 1．1．7 革蘭氏陽性放線菌群。革蘭氏陽性放線菌屬好氣性菌群。它能從光合細(xì)菌中獲得基質(zhì)，產(chǎn)生各種抗生素及酶，直接抑制病菌，促進(jìn)有益微生物增殖；和光合細(xì)菌混合使用效果更好。放線菌還能分解常態(tài)下不易分解的木質(zhì)素、纖維素、甲殼素物質(zhì)，有利于動(dòng)植物吸收。 1．1．8 硫化細(xì)菌。硫化細(xì)菌是一種能將無機(jī)硫化物氧化為硫酸的自養(yǎng)型細(xì)菌，并從氧化無機(jī)硫中獲得能量。硫化細(xì)菌廣泛分布于池塘底泥和水中，其氧化作用提供了水生植物可利用的硫酸態(tài)硫元素，降低池內(nèi)硫、硫化氫的濃度。 1．1．9 EM菌。EM即有效微生物群，是由光合細(xì)菌、乳酸菌、酵母菌等多種有益菌復(fù)合培養(yǎng)而成的微生物群落，它們能通過共生增殖關(guān)系組成復(fù)雜而又相對(duì)穩(wěn)定的微生態(tài)系統(tǒng)。EM中的有益微生物經(jīng)固氮、光合等一系列分解、合成作用，可使水中的有機(jī)物質(zhì)形成各種營養(yǎng)元素，供自身及餌料生物的生長繁殖，同時(shí)增加水中的溶解氧，降低氨、硫化氫等有毒物質(zhì)的含量，維持養(yǎng)殖水環(huán)境的平衡。另外，EM菌在腸道內(nèi)形成優(yōu)勢(shì)菌群還能抑制大腸桿菌的活動(dòng)，并促進(jìn)機(jī)體對(duì)餌料的消化吸收，使排泄物中的氨氮含量減少，起到凈化水質(zhì)、促進(jìn)生長的作用。 2 免疫增強(qiáng)劑的應(yīng)用 免疫增強(qiáng)劑(Immunostimulants)又稱免疫促進(jìn)劑，是指具有促進(jìn)或誘發(fā)宿主防御反應(yīng)，增強(qiáng)生物機(jī)體抗病能力的一類物質(zhì)。免疫增強(qiáng)劑主要作用于水產(chǎn)動(dòng)物的非特異性免疫系統(tǒng)，通過激活機(jī)體自身的免疫機(jī)能從而達(dá)到防御目的，增強(qiáng)其抗病力。免疫增強(qiáng)劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用起步較晚，但發(fā)展迅速，開發(fā)的種類逐漸增多，應(yīng)用范圍也隨之?dāng)U大。在養(yǎng)殖生產(chǎn)中應(yīng)用免疫增強(qiáng)劑提高機(jī)體的免疫水平、增強(qiáng)先天性的抵抗力無疑具有重大意義。 2．1 免疫增強(qiáng)劑的作用機(jī)制 魚類的免疫系統(tǒng)為較低等的特異性免疫系統(tǒng)，分細(xì)胞免疫和體液免疫。魚類的細(xì)胞免疫中有吞噬細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞(NKB)以及T、B淋巴細(xì)胞等；體液免疫中有溶菌酶、溶血素、免疫球蛋白及各種補(bǔ)體等。目前認(rèn)為，甲殼類只有非特異性免疫系統(tǒng)。免疫增強(qiáng)劑作用于這2種免疫系統(tǒng)的機(jī)理是多方面的，其機(jī)理大致體現(xiàn)為：在甲殼動(dòng)物中，免疫增強(qiáng)劑可活化血淋巴中的吞噬細(xì)胞，提高其吞噬病原的能力，刺激血淋巴中抗菌、溶菌活力的產(chǎn)生，激活酚氧化酶原系統(tǒng)，產(chǎn)生識(shí)別信號(hào)及介導(dǎo)吞噬等；在魚類中，免疫增強(qiáng)劑可激活嗜中性粒細(xì)胞和白細(xì)胞的吞噬作用，刺激淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生或分泌淋巴因子，協(xié)助非特異性免疫和體液免疫，誘發(fā)抗體的產(chǎn)生及補(bǔ)體的生成等。 2．2 水產(chǎn)上常用的免疫增強(qiáng)劑 2．2．1 左旋咪唑。人工合成藥物，是一種有效的人、畜驅(qū)蟲藥。在水產(chǎn)動(dòng)物體內(nèi)主要通過提高吞噬細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞的活性、提高白細(xì)胞的代謝能力以及血清中溶菌酶活力等來增強(qiáng)機(jī)體的免疫力。 2．2．2 胞壁酰二肽。即MDP(Mummyl dipeptide)，系從分支桿菌屬提取獲得的低分子肽。這種二肽作為免疫增強(qiáng)劑可以激活巨噬細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞及補(bǔ)體，通過給虹鱒注射MDP，能有效增強(qiáng)巨嗜細(xì)胞的活性，有效抵制殺鮭氣單胞菌病原的侵?jǐn)_。 2．2．3 葡聚糖。其中尤以酵母葡聚糖、β-1，3葡聚糖的研究居多。大西洋鮭腹腔注射酵母葡聚糖，能明顯增強(qiáng)其對(duì)殺鮭弧菌的抵抗力。肌肉注射酵母葡聚糖能增強(qiáng)溝鯰(Icmurus punctatus)對(duì)皰疹病毒的抵抗力?？诜湍钙暇厶?，能有效降低鏈弧菌病對(duì)大西洋鮭的感染率。在甲殼類的應(yīng)用中，酵母葡聚糖浸泡斑節(jié)對(duì)蝦(0.5～1.0 mg／ml)，能增加顆粒細(xì)胞的吞噬率和吞噬指數(shù)，并使得體內(nèi)的酚氧化酶水平有較大程度的提高，對(duì)抵抗白斑綜合征病毒(WSSV)的感染作用明顯。在斑節(jié)對(duì)蝦飼料中添加不同濃度的β-1，3葡聚糖，能不同程度地提高其增重率、存活率及抗WSSV的能力，并降低了餌料系數(shù)。 2．2．4 肽聚糖。肽聚糖是細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分，草蘭氏陽性細(xì)菌胞壁所含的肽聚糖占干重的50％～80％，草蘭氏陰性細(xì)菌胞壁所含的肽聚糖占干重的1％～10％。肽聚糖能激活黃尾螄白細(xì)胞的吞噬活力而起到抵抗嗜產(chǎn)氣腸球菌病的作用。肽聚糖在斑節(jié)對(duì)蝦黃頭桿狀病毒病中的作用，也取得了較為滿意的結(jié)果。日本對(duì)蝦口服肽聚糖，試驗(yàn)組比對(duì)照組有更高的酶活性和吞噬活力。肽聚糖對(duì)中國對(duì)蝦血淋巴中的溶菌酶、過氧化酶、超氧化物歧化酶均有不同程度的誘導(dǎo)作用，并在體外證明對(duì)酚氧化酶原系統(tǒng)有一定的激活作用。此外，凡納對(duì)蝦通過攝食添加肽聚糖的餌料可明顯提高血淋巴中的酚氧化酶、酸堿性磷酸酶，同時(shí)可明顯提高凝集素凝集效價(jià)。關(guān)于肽聚糖在蟹類的應(yīng)用，已證實(shí)了肽聚糖能增強(qiáng)河蟹吞噬細(xì)胞的活性和抗菌活力，使抗病能力得以有效提高。 2．2．5 甘露寡聚糖。真菌甘露寡聚糖是通過發(fā)酵法從富含甘露寡聚糖的酵母細(xì)胞壁中提取的葡甘露寡聚糖蛋白復(fù)合體。首先，它能促進(jìn)動(dòng)物腸道有益菌群的增殖；第二，它能阻礙細(xì)菌在腸道的附著；第三，它能刺激免疫反應(yīng)。 2．2．6 幾丁質(zhì)。幾丁質(zhì)是從甲殼動(dòng)物和昆蟲外骨骼及一些真菌類細(xì)胞壁中提取的一種活性多糖類物質(zhì)。注射幾丁質(zhì)的虹鱒吞噬細(xì)胞活性大大提高，并明顯增強(qiáng)對(duì)鰻吸蟲病的抵抗力。幾丁質(zhì)注射黃尾螄的結(jié)果表明，幾丁質(zhì)能有效提高黃尾螄對(duì)殺魚巴斯德菌的抵抗力。 2．2．7 脂多糖。即LPS(Lipopolysaccharide)，是一種革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁產(chǎn)物，它能有效促進(jìn)B淋巴細(xì)胞的再生。LPS能活化吞噬細(xì)胞，提高大西洋鮭巨嗜細(xì)胞內(nèi)活性氧的水平，降低疾病的感染，將LPS應(yīng)用于鯽魚，也獲得了類似的結(jié)果。斑節(jié)對(duì)蝦口服LPS能明顯提高血淋巴的抗菌活力、酚氧化酶活力和凝集效價(jià)。中國對(duì)蝦經(jīng)體腔注射LPS48h后，血淋巴細(xì)胞的吞噬率提高11.4％，吞噬指數(shù)提高39.7％；血清中抗菌活力和溶菌活力也比對(duì)照組有明顯提高，且到96h仍有較高水平。另外，其血清凝集紅細(xì)胞的活性也有所增加，證明LPS對(duì)中國對(duì)蝦的非特異性免疫系統(tǒng)有較明顯的增強(qiáng)作用。 2．2．8 維生素類。大量試驗(yàn)證明，部分維生素對(duì)魚類具有抗病及促生長作用。Vc是動(dòng)物生長和維持正常生理機(jī)能所必需的營養(yǎng)物質(zhì)，很多水產(chǎn)動(dòng)物自身不能合成。Vc對(duì)魚類的體液免疫和非特異性免疫均具有一定的影響。在飼料中適量添加Vc能刺激斑點(diǎn)又尾鮰體內(nèi)補(bǔ)體的生成，有效增強(qiáng)斑點(diǎn)叉尾鮰對(duì)愛德華氏菌病原的抵抗力。鮭和大菱鲆服用Vc能不同程度地激發(fā)吞噬細(xì)胞活力和淋巴細(xì)胞的活性。在飼料中適量添加Vc能有效增加中國對(duì)蝦的生長，并明顯提高其自身的免疫保護(hù)率。VE是動(dòng)物重要的營養(yǎng)物質(zhì)，其功能為抗氧化，保護(hù)脂溶性細(xì)胞膜和不飽和脂肪酸不被氧化，也是一種能增強(qiáng)細(xì)胞免疫和體液免疫的物質(zhì)。分別用虹鱒和大西洋鮭作服用和不服用VE的對(duì)比試驗(yàn)，結(jié)果表明，服用的個(gè)體，其體內(nèi)吞噬細(xì)胞活性明顯高于對(duì)照組。溝鯰口服高劑量的VE時(shí)，能增強(qiáng)介導(dǎo)吞噬作用并促進(jìn)白細(xì)胞中過氧化物陰離子的產(chǎn)生。在B族維生素中，VB12對(duì)中國對(duì)蝦的抗病能力有積極作用。VA對(duì)維持魚類免疫系統(tǒng)的正常功能是必需的。最近研究證明，大西洋鮭魚和虹鱒攝入VA能影響體液和細(xì)胞免疫功能。用缺乏VA的飼料飼喂虹鱒和大西洋鮭，魚血清抗蛋白酶活力、腎臟白細(xì)胞游走活力和巨噬細(xì)胞吞噬能力降低。飼料中高水平的VA能提高魚體淋巴細(xì)胞吞噬能力和血清溶菌酶及補(bǔ)體活力，從而對(duì)魚類免疫功能產(chǎn)生影響。 2．2．9 乳鐵蛋白。乳鐵蛋白(LactofeHin)是一種由單肽鏈組成的物質(zhì)，分子量約為87000，廣泛存在于哺乳動(dòng)物的體液中。乳鐵蛋白是一種抗氧化劑，有助于調(diào)節(jié)鐵吸收和吞噬細(xì)胞生長。乳鐵蛋白常被視為能增強(qiáng)吞噬作用和抗菌活力的重要因子之一。將乳鐵蛋白作為免疫增強(qiáng)劑應(yīng)用于虹鱒上，能刺激吞噬細(xì)胞活力和白細(xì)胞中超氧化物陰離子的產(chǎn)生，而且還顯示出對(duì)溶藻膠弧菌病原較高的耐受性和抵抗力。口服乳鐵蛋白還能增加虹鱒血液中粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的數(shù)量，并能促進(jìn)機(jī)體黏液的分泌，增強(qiáng)對(duì)Cryptocaryon irritans病原的抵抗力。 2．2．1O 中草藥。一些中草藥具有直接殺滅病原的功能，有的是通過提高機(jī)體的免疫功能間接促進(jìn)疾病痊愈。很多中草藥具有免疫調(diào)節(jié)作用，主要是因?yàn)楹卸喾N有增強(qiáng)免疫作用的成分，如生物堿、多糖、皂苷、蒽類、揮發(fā)油、有機(jī)酸等，這些物質(zhì)主要通過激活網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)和補(bǔ)體，激活巨噬細(xì)胞和T、B淋巴細(xì)胞，誘生多種細(xì)胞因子等途徑實(shí)現(xiàn)的。根據(jù)中草藥對(duì)動(dòng)物的免疫增強(qiáng)作用機(jī)制，按免疫調(diào)節(jié)的功能可分為以下幾類：①作用于免疫器官的中草藥，如冬蟲夏草、黃芪類多糖等；②提高淋巴母細(xì)胞分化能力的中草藥，包括黃連、黃芪、黃芩、蒲公英、金銀花、五味子、紅花等；③ 促進(jìn)抗體生成的中草藥，包括香菇、甘草、枸杞、生姜、金銀花、黃柏、青蒿、肉桂、大蒜、魚腥草等；④誘生干擾素和促進(jìn)產(chǎn)生免疫球蛋白的中草藥。 3 疫苗的開發(fā)應(yīng)用 目前，疫苗產(chǎn)品還僅限于魚類。魚類雖然是低等的脊椎動(dòng)物，但仍有較為完善的免疫系統(tǒng)，當(dāng)機(jī)體受到病原生物刺激后，能夠產(chǎn)生特異免疫應(yīng)答，抵御病原入侵。因而可以通過研制、接種疫苗，刺激魚類免疫系統(tǒng)，獲得免疫保護(hù)，預(yù)防疾病的發(fā)生。 3．1 水產(chǎn)疫苗的研究概況 1942年，Duff首次應(yīng)用滅活的殺鮭產(chǎn)氣單胞菌口服免疫硬頭鱒獲得成功，開創(chuàng)了疫苗在魚類應(yīng)用上的新紀(jì)元。在20世紀(jì)70年代中期，歐美國家積極開展了對(duì)漁用疫苗的研制。我國1973年對(duì)草魚出血病組織漿滅活疫苗研究取得成功，從而拉開了我國水產(chǎn)疫苗研制的序幕。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，目前獲得許可證的水產(chǎn)疫苗有30多種，主要在歐美國家，我國僅有2種。因此，我國水產(chǎn)疫苗的研究與應(yīng)用還相對(duì)滯后。 3．2 水產(chǎn)疫苗的種類 3．2．1 全細(xì)胞疫苗。指抗原為完整的細(xì)胞體，如菌體、病毒粒子、寄生蟲等。 3．2．1．1 弱毒苗。通過人工方法誘導(dǎo)或從自然環(huán)境中直接獲得的毒力高度減弱或無毒的病原微生物制成的疫苗。該種疫苗用量小，免疫效果好，維持時(shí)間長；缺點(diǎn)是不易保存，有效期短，使用安全性差。 3．2．1．2 滅活苗。用物理化學(xué)方法將病原微生物殺死后制成的疫苗。水產(chǎn)上使用的疫苗大多數(shù)都是滅活苗，如弧菌疫苗、氣單胞菌疫苗、疥瘡病疫苗等。滅活苗的優(yōu)點(diǎn)是使用安全性好，易保存，在4℃下有效期可達(dá)1年；缺點(diǎn)是接種量大，接種次數(shù)多，免疫效果較弱毒苗差。 3．2．2 無細(xì)胞疫苗。或稱亞單位疫苗或組分疫苗，指抗原是由致病微生物提取、人工合成或生物工程方法制得的免疫有效成分，如細(xì)菌的細(xì)胞壁、莢膜成分或病毒的囊膜蛋白等。其免疫效果較高，且無不良反應(yīng)，但制備較困難，價(jià)格貴。 3．2．2．1 基因工程疫苗。利用分子生物學(xué)技術(shù)克隆出病原的具有免疫保護(hù)性基因，將其與表達(dá)載體連接，再轉(zhuǎn)入受體菌，對(duì)受體菌培養(yǎng)，使保護(hù)性基因進(jìn)行復(fù)制和表達(dá)，從培養(yǎng)物中提取保護(hù)性蛋白，純化制備得到基因工程疫苗。這種類型的疫苗具有亞單位苗的安全性，又具有活疫苗的效力，可分為多肽或亞單位疫苗、顆粒載體疫苗、病毒活載體疫苗、細(xì)菌活載體疫苗、基因重配疫苗、基因缺失疫苗等。 3．2．2．2 合成肽疫苗。仿特異性抗原的某些肽鏈或蛋白人工合成的抗原，現(xiàn)今還沒有實(shí)用于人群或動(dòng)物的疫苗。 3．2．2．3 抗獨(dú)特型抗體疫苗。抗獨(dú)特型抗體(AId)是針對(duì)抗體分子V區(qū)上的特異抗原表位群(稱為獨(dú)特型)的抗體。AId與原來抗原的決定簇分子互為“內(nèi)影像”關(guān)系，可模擬抗原結(jié)構(gòu)和功能的作用，而可以作為一種新型疫苗。簡單地講，就是以抗體作為疫苗免疫動(dòng)物后獲得的抗體再做為疫苗使用。 3．2．2．4 DNA疫苗。又稱核酸疫苗或基因疫苗，它是將外源抗原基因插入細(xì)菌質(zhì)粒，構(gòu)建成重組質(zhì)粒，直接接種于動(dòng)物機(jī)體，導(dǎo)人宿主的靶細(xì)胞中，DNA則表達(dá)特異的蛋白抗原，激活機(jī)體免疫系統(tǒng)，從而引發(fā)特異性體液免疫和細(xì)胞免疫應(yīng)答，使動(dòng)物獲得保護(hù)力的一種新型疫苗。目前，水產(chǎn)用DNA疫苗的應(yīng)用研究主要集中在對(duì)鮭、鱒的傳染性造血器官壞死病毒(IHNV)、病毒性出血敗血癥病毒(VHSV)、鯉春病毒(SHRV)等傳染性病毒病的防治上。與常規(guī)疫苗相比，DNA疫苗可使機(jī)體產(chǎn)生有效的免疫應(yīng)答，且免疫期長、免疫劑量低。但DNA疫苗的接種多采用肌內(nèi)注射，這種方法耗時(shí)費(fèi)力，且不適用魚苗和經(jīng)濟(jì)價(jià)值較低的魚類，在實(shí)際生產(chǎn)中有一定的局限性，還有待于技術(shù)的進(jìn)一步完善。疫苗根據(jù)來源、成分、使用方法、給予途徑等不同有多種形式，如不用提純，直接用病灶處理后的組織漿疫苗；用于口服的微膠囊疫苗；包含幾個(gè)不同抗原成分的多聯(lián)疫苗；包括同一抗原的不同群、型的多價(jià)疫苗等。 3．3 水產(chǎn)疫苗在我國水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用前景 3．3．1 疫苗是預(yù)防水產(chǎn)動(dòng)物疫病發(fā)生的有效手段。由于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)自身的特點(diǎn)，尤其是大水面養(yǎng)殖中，大多數(shù)病害的控制更強(qiáng)調(diào)防重于治的理念。水產(chǎn)用疫苗在世界水產(chǎn)養(yǎng)殖的發(fā)展中已顯示出良好的前景，使用疫苗是非常有效的疫病防治手段。例如，水產(chǎn)用疫苗的使用，使挪威鮭魚產(chǎn)量由20世紀(jì)80年代后期的4萬t上升到目前的約30萬t，而相應(yīng)抗生素的使用量卻由50kg驟降至1kg。 3．3．2 水產(chǎn)疫苗符合我國發(fā)展健康養(yǎng)殖和生產(chǎn)綠色水產(chǎn)品的要求，可消除藥物殘留隱患。由于藥物殘留量超標(biāo)使我國水產(chǎn)品出口受阻的教訓(xùn)極為慘重，而疫苗不存在藥物殘留問題，防患于未然，減少了病害的發(fā)生及治療的開支。為了保持我國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的持續(xù)健康發(fā)展，生產(chǎn)出安全衛(wèi)生的綠色水產(chǎn)品，急需水產(chǎn)疫苗的開發(fā)應(yīng)用。 |
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