原理

對(duì)于有囊膜的病毒，其侵入細(xì)胞的過(guò)程是由其囊膜蛋白決定的，因?yàn)槟夷へ?fù)責(zé)識(shí)別靶細(xì)胞表面的受體并啟動(dòng)吸附和穿入的過(guò)程。此外，當(dāng)兩種病毒同時(shí)感染一種細(xì)胞時(shí)所發(fā)生的表型混合現(xiàn)象提示一種病毒的囊膜能夠整合到另外一種不同病毒的顆粒表面。基于以上兩點(diǎn)，在研究病毒侵入細(xì)胞的過(guò)程及其組織嗜性和受體等方面產(chǎn)生了一種新的技術(shù)——假病毒技術(shù)。目前的假病毒則是指一種反轉(zhuǎn)錄病毒能夠整合另外一種不同種類病毒的囊膜糖蛋白，從而形成的具有外源性病毒的囊膜，而基因組保持著反轉(zhuǎn)錄病毒本身基因組特性的病毒。假病毒顆粒（pseudoviral particles）——由包裝細(xì)胞提供的病毒蛋白攜帶包裹著外源基因的病毒載體重組體，對(duì)靶細(xì)胞只有一次感染的能力，為復(fù)制缺陷型，感染后不能產(chǎn)生新的病毒顆粒。這種病毒雖然可以侵入細(xì)胞，但是在入侵細(xì)胞后由于是復(fù)制缺陷型，而且組裝成病毒的結(jié)構(gòu)蛋白是外源提供的，不能夠進(jìn)行病毒的自我復(fù)制，所以非常安全。

水皰性口炎病毒（Vesicular stomatitis virus，VSV）載體在研究病毒顆粒入侵宿主細(xì)胞、辨認(rèn)介導(dǎo)病毒感染細(xì)胞的細(xì)胞表面受體、篩選病毒抑制藥物以及疫苗開(kāi)發(fā)方面有著廣泛的應(yīng)用。VSV病毒載體可以高效地利用異源病毒的包膜蛋白進(jìn)行假型化（Presudotypted），比如那些需要在高生物安全等級(jí)實(shí)驗(yàn)室操作的病毒的包膜蛋白。

重組VSV是G糖蛋白基因缺失的，該缺失導(dǎo)致VSV自我復(fù)制缺陷的。G糖蛋白基因通常被替換為報(bào)告基因（如熒光蛋白基因、熒光素酶報(bào)告基因或分泌型堿性磷酸酶基因）用于病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效果測(cè)定。

基本操作步驟：

生產(chǎn)VSV假病毒主要由三個(gè)步驟構(gòu)成：1. 使用質(zhì)粒初步制備VSV；2. 擴(kuò)增G糖蛋白補(bǔ)全的VSV；3. 使用異源病毒的包膜蛋白組裝VSV假病毒。