上海中醫(yī)藥大學(xué)醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院張曉晨

中藥地龍( Pheretima)為鉅蚓科動物參環(huán)毛蚓Pheretimaaspergillum ( E. Perrier)、威廉環(huán)毛蚓Pheretima guillelmi( Michaelsen),通俗環(huán)毛蚓Pheretima vulgaris Chen和櫛盲環(huán)毛蚓 Pheretima pectinifera Michaelsen等的干燥全體。前一種藥材習(xí)稱“廣地龍”,后三種藥材習(xí)稱“滬地龍”。味咸,性寒,歸肝,肺、腎經(jīng)。有清熱止痙、平肝息風(fēng)、通經(jīng)活絡(luò)、平喘利尿等功效。主治熱病發(fā)熱狂躁,驚癇抽搐﹑肝陽頭痛、中風(fēng)偏癱、風(fēng)濕痹痛,肺熱喘咳,小便不通等癥;現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究認(rèn)為地龍具有鎮(zhèn)靜抗驚厥,解熱、平喘,抗血栓等生物活性,是中醫(yī)藥治療高熱驚厥.心腦血管疾病、支氣管哮喘的代表藥物"。為進(jìn)一步深入研究以及合理運(yùn)用地龍,現(xiàn)對近年來地龍及其有效成分的藥理作用,毒性、臨床應(yīng)用綜述如下。

1化學(xué)成分

地龍含15種氨基酸,其中亮氨酸和谷氨酸的含量最高;含有豐富的微量元素如鐵、鍶、硒、鎂、鋅、銅等;含有硬脂酸、棕櫚酸等有機(jī)酸;還含有蚯蚓解熱堿(lumbrofebrin),蚯蚓素( lumbritin)、蚯蚓毒素( terrestrolubrolysin)、黃嘌呤( xan-thine)腺嘌呤( adenine).次黃嘌呤( hypoxanthine)、膽堿﹒磷脂、膽固醇、黃色素及酶類等成分 ";以大孔吸附樹脂( D4020、D3520)分離得纖溶活性成分蚯蚓纖維蛋白溶解酶(一種多組分蛋白酶)。

通俗環(huán)毛蚓Pheretima vulgaris ( chen).(滬地龍):提取分離得到一白色結(jié)晶,經(jīng)紅外線鑒定為琥珀酸( amber acid );用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法,分析鑒定了其中18種脂肪酸，亞油酸﹑花生烯酸和花生四烯酸的含量較高;用氨基酸分析儀鑒定的總游離氨基酸含量為8.629%。

2藥理作用

2.1解熱地龍中的蛋白質(zhì)經(jīng)加熱或受酶的作用分解后有解熱作用,其作用的成分是蚯蚓解熱堿。其中地龍水浸劑的作用較氨基比林、鹽酸奎寧溫和,與氨基比林同用,解熱作用迅速。其解熱機(jī)理是影響體溫調(diào)節(jié)中樞,使散熱增加。

2.2鎮(zhèn)靜.抗驚殷地龍熱水浸液.醇浸液對小鼠及兔均有鎮(zhèn)靜作用;對戊四唑或咖啡因引起的驚厥及電驚厥均有對抗作用.能使驚厥發(fā)生的潛伏期延長,使驚厥發(fā)生率和死亡率明顯下降;但對i的寧引起的小鼠驚厥無效,因士的寧主要作用于脊髓,故認(rèn)為地龍抗驚厥的作用部位可能在脊髓以上,抗驚厥作用的成分可能與琥珀酸有關(guān)。

2.3抗組胺、平喘動物實(shí)驗(yàn)證明,地龍有顯著的舒張支氣管作用,并能對抗組胺及毛果蕓香堿引起的支氣管收縮。該藥止喘的有效成分是琥珀酸、次黃嘌呤,其中琥珀酸的作用大于次黃嘌呤。

給豚鼠或小鼠灌服不同炮制工藝的廣地龍(蛤粉制廣地龍,黃酒制廣地龍、白酒制廣地龍、醋制廣地龍.凈制廣地龍) ,結(jié)果顯示蛤粉制廣地龍平喘化痰止咳作用最強(qiáng),其次是黃酒制廣地龍;HPLC測定發(fā)現(xiàn)該兩種炮制工藝的廣地龍中黃嘌呤,次黃嘌呤的質(zhì)量濃度也最高。

以卵蛋白腹腔注射致敏加霧化吸入誘導(dǎo)哮喘模型的大鼠腹腔注射地龍注射液2 mL(含0.75 g鮮地龍/ mL),連續(xù)8周及12周,可顯著緩解哮喘大鼠支氣管痙攣,降低氣道阻力,改善肺功能。

給BALB/c小鼠0.04 mL g地龍注射液(2 ml/支),連續(xù)7d,可顯著抑制由雞卵清蛋白引起的慢性哮喘模型小鼠肺組織平滑肌肌動蛋白-α( a-SMA)和纖維連接蛋白(FN)的陽性表達(dá),下調(diào)α-SMA mRNA、 FN mRNA 陽性表達(dá)水平,從而抑制哮喘氣道重構(gòu);同時(shí)小鼠炎癥細(xì)胞總數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞和血清總IgF水平也顯著下降”。

2.4改善血液流變學(xué)和抗血栓給家兔靜脈注射1 mg/kg、2 mg/ kg地龍凍干粉針.5 min后采血檢測發(fā)現(xiàn)可顯著降低血漿黏度.全血高切低切黏度,2 mg/kg 劑量還能降低紅細(xì)胞壓積.減小血沉方程指數(shù)和紅細(xì)胞剛性指數(shù)“;體外實(shí)驗(yàn)證明，地龍?zhí)崛∫壕哂泻芎玫目鼓饔?/span>,能使凝血時(shí)間凝血酶時(shí)間,凝血酶原時(shí)間均顯著延長,且呈明顯量效關(guān)系。該藥的抗凝機(jī)理是對凝血酶-纖維蛋白原反應(yīng)的直接作用;此外該藥還具有促纖溶作用。目前認(rèn)為地龍液中含有一種高效抗凝和促纖溶物質(zhì)---蚯蚓纖維蛋白溶解酶,該物質(zhì)不能被抗凝血酶Ⅲ抗體和魚精蛋白中和,表明其活性不依賴于抗凝血酶Ⅲ,與肝素及其類似物,水蛭素等抗凝物質(zhì)不同,它不是糖類和蛋白質(zhì),而可能是一種耐熱、耐堿的小肽或含雙鍵的化合物。

2.5降壓給小鼠灌服20 g/ kg ,40 g/kg 地龍水煎液,連續(xù)7d,可顯著降低小鼠血清血管緊張素轉(zhuǎn)化酶活性,對小鼠血糖濃度無影響。

單次靜脈注射0.2 g/kg地龍耐熱蛋白(LHP),能顯著降低正常大鼠的血壓,起效快,作用強(qiáng),持續(xù)時(shí)間短。連續(xù)14 d和28d腹腔注射0.4 g/ kg ,0.8 g/ kg LHP能顯著降低自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)的血壓,且第14d和第28 d比較血壓呈逐漸下降趨勢;地龍耐熱蛋白還可降低高血壓大鼠血漿、心肌和腎臟中血管緊張素Ⅱ水平,心肌細(xì)胞膜、胞漿以及腎臟局部AT、受體的表達(dá)也顯著下調(diào);同時(shí)還可降低高血壓大鼠血漿和腎臟醛固酮水平,升高血漿和腎臟6-酮-前列腺素-Fla(6-Keto-PCF,.)的量(;0. 8 gkg LHP還可顯著降低高血壓大鼠左室質(zhì)量指數(shù),減輕心肌細(xì)胞肥大、間質(zhì)增生及細(xì)胞器退行性病變的心肌組織狀況。

2.6抗組織纖維化和細(xì)胞增殖給由CC,花生油所致的實(shí)驗(yàn)性肝纖維化大鼠灌服25 mg/kg,50 mg/kg地龍2號提取活性成分(主要成分為蚯蚓纖溶酶和蚯蚓膠原酶),連續(xù)8周,血清肝纖維化指標(biāo)透明質(zhì)酸(HA)和層黏連蛋白( LN)顯著降低,病理學(xué)觀察顯示肝纖維化程度、肝細(xì)胞損害均明顯減輕;同時(shí)能下調(diào)肝臟細(xì)胞α-SMA、轉(zhuǎn)化生長因子-β( TGF-B,)、尿激酶型纖溶酶原激活物( uPA)、Ⅰ型纖溶酶原激活抑制物( PAI-1)、基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制物-1(TIMP-1 ) mRNA及蛋白表達(dá)水平.抑制肝星狀細(xì)胞的活化,對抗纖維化形成;上調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶-13 (MMP-13) mRNA及蛋白表達(dá)水平,促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)降解。

給由博萊霉素所致肺纖維化小鼠灌服1.45 g/kg地龍水提物,連續(xù)28 d,可顯著降低模型小鼠肺指數(shù),肺組織膠原纖維羥脯氨酸含量,明顯改善肺纖維組織增生狀況。

20 ug/mL ,40 ug/mL,80 ug/mL地龍血栓通膠囊(地龍有效成分蚯蚓纖溶蛋白酶)對體外培養(yǎng)人腎小球系膜細(xì)胞( HMC)的增殖起顯著抑制作用。

以鮮地龍?jiān)和夥笸枚錾择：勰Ｐ蛣?chuàng)面50 d,可加快創(chuàng)面愈合.瘢痕平坦,外形變小,質(zhì)地變軟,顏色變淺接近正常皮膚;鏡下觀察,成纖維細(xì)胞數(shù)和膠原纖維數(shù)均顯著降低。

2.7保護(hù)腦細(xì)胞神經(jīng)細(xì)胞給大鼠灌服相當(dāng)于生藥1 gkg4 g/kg的地龍水提取液,14d后能顯著減輕大腦局灶性腦缺血再灌注損傷所致大腦皮層水腫、充血,改善神經(jīng)元的形態(tài)結(jié)構(gòu);降低大腦皮層損傷后的caspase-3蛋白表達(dá),降低神經(jīng)元凋亡。地龍水煎乙醇提取后以 NaOH調(diào)pH 至7.2~7.4,微孔濾膜除菌作為地龍?zhí)崛∥镌囈?/span>,在2~10 mg/ mL.范圍內(nèi)體外對培養(yǎng)的SH-SY5Y神經(jīng)母細(xì)胞生長無明顯影響,且在2 mg/ mL呈神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用;當(dāng)達(dá)到20 mg/ mL以上時(shí),表現(xiàn)出明顯的細(xì)胞生長抑制現(xiàn)象;達(dá)到100 mg/ mL時(shí),表現(xiàn)出100%抑制。

2.8促進(jìn)免疫由Sephadex G-25凝膠和DEAE-SephadexA-25陰離子交換劑分離得的3種活性地龍肽T、A、B體外能不同程度地增強(qiáng)小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能;地龍肽T、A可顯著提高NK細(xì)胞活性,并與IL-2有協(xié)同作用;地龍肽T、A、B可拮抗地塞米松,環(huán)磷酰胺等免疫抑制劑對NK細(xì)胞的抑制作用。

2.9 興奮子宮平滑肌地龍對離體和在體、已孕和未孕動物的子宮平滑肌均有興奮作用,當(dāng)劑量增大時(shí),子宮平滑肌呈痙攣性收縮。濃度為0. 05 g 生藥/mL,0.25 g 生藥/mL,0.75 g 生藥/mL的地龍水煎液對未孕大鼠離體子宮平滑肌的興奮作用表現(xiàn)為增加子宮平滑肌收縮張力,收縮波持續(xù)時(shí)間及子宮活動力,且具量效關(guān)系,此作用可被異搏定完全阻斷,地龍對子宮平滑肌的作用可能通過鈣通道發(fā)揮作用”。

3毒性

廣地龍熱浸劑,小鼠靜注的LD,為38.5 gkg。該制劑0.1 g/kg連續(xù)給大鼠灌胃45 d,未見毒性反應(yīng);兔灌服地龍B，12 g/ kg 可使腎排泄功能輕度降低,120 min后,酚紅排泄量由給藥前的60.9%降為43% ,故在臨床應(yīng)用時(shí)應(yīng)注意腎功能變化;又據(jù)報(bào)道各地地龍的含砷量不同,最高的可達(dá)200 ppm,超過世界各國藥典的規(guī)定。經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明,水煎或水煎后醇沉均不能降低地龍的含砷量,而水洗可使地龍的含砷量降低1/2~2/3,提示炮制地龍一定要用水漂凈。

地龍降壓蛋白給小鼠腹腔注射,LD >20 g/kg。

4臨床應(yīng)用

4.1癲癇對38例復(fù)雜部分性發(fā)作癲癇患者服用細(xì)胞破壁蠶龍膠囊(白僵蠶.地龍、當(dāng)歸等),0.5 粒,母次3.祝,o天3次,4周為1療程,3個(gè)療程后總有效率86.84% ,腦電圖改普總有效率84.21%,顯著優(yōu)于對照組﹔細(xì)心樣劑科膠囊對42例全身強(qiáng)直-陣攣性癲癇患者米用上述劑量、同樣療程的治療方法,總有效率85.7%,腦電圖忌有雙早40.5%,也顯著優(yōu)于對照組。

4.2慢性支氣管炎、支氣管哮喘給38例慢性喘息型支氣管炎急性發(fā)作期患者服用自擬含地龍方藥(地龍、細(xì)辛,杏仁等),隨證加減,連續(xù)1周,總有效率92.1%；給30例老年支氣管哮喘患者服用自擬地龍湯(地龍、麻黃.丹參等)1個(gè)月，期間給予常規(guī)支持和抗感染治療，總有雙率93.33% 。

給50例支氣管哮喘急性發(fā)作期患者服用地龍細(xì)辛止喘顆粒配合吸入舒利迭治療,2周后總有效率90%,顯著優(yōu)于對照組。

4.3高血壓對31例原發(fā)性高血壓患者采取單純服用地龍膠囊(0.25 g√/粒,10粒/天,分2次早晚服用)治療,打程30 d,治療后收縮壓下降總有效率74.2%,舒張壓下降總有效率67.7%。

4.4血栓性疾病、微循環(huán)障礙對30例急性腦梗死患者在基礎(chǔ)治療外加用地龍膠囊(單味地龍黃酒炮制制得)口服，每次4g,每天3次,療程3個(gè)月。治療⒉周后,與對照組比較,患者血漿纖維蛋白原含量開始顯著下降,到第8周后維持在一定水平;同時(shí)明顯降低患者頸動脈內(nèi)膜-中膜厚度并減少斑塊形成。

45例急性腦梗死患者在西醫(yī)常規(guī)治療基礎(chǔ)上給予疏血通注射液(水蛭,地龍)6 mL/d,稀釋靜滴,療程14 d,總有效率88.9%,血液流變學(xué)指標(biāo)也顯著改善1;55例椎-基底動脈供血不足性眩暈患者給予疏血通注射液(4 mL/天,稀釋后靜滴)聯(lián)合西比靈治療,連續(xù)2周,總有效率92.73%,顱內(nèi)兩側(cè)椎動脈及基底動脈平均血流速度顯著提高,優(yōu)于對照組;36例冠心病心絞痛患者在常規(guī)治療基礎(chǔ)上加疏血通注射液8 ml天,稀釋靜滴,共2周,總有效率84.3%,顯著優(yōu)于對照組;將112例不穩(wěn)定型心絞痛患者隨機(jī)分為基礎(chǔ)用藥組和基礎(chǔ)用藥加用疏血通注射液組(6 mL/次,稀釋靜滴),10 d后,2組患者血漿--氧化氮(NO)量、一氧化氮合成酶(NOS)活性均顯著提高,血漿內(nèi)皮素(ET)含量明顯下降,且對內(nèi)皮素的影響,疏血通組顯著優(yōu)于基礎(chǔ)用藥組;血液流變學(xué)指標(biāo)2組均明顯改善,疏血通組也顯著優(yōu)于基礎(chǔ)治療組。

38例糖尿病患者在常規(guī)治療基礎(chǔ)上靜注前列腺素和疏血通注射液6 mL/d,連續(xù)15 d,患者下肢動脈阻抗血流圖波幅﹑每搏流人容積,每分流入容積等指標(biāo)均顯著改善,總有效率87%。

33例視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞患者給予疏血通注射液(6mLd,稀釋后靜滴)聯(lián)合卵磷脂絡(luò)合碘治療,連續(xù)2周,視網(wǎng)膜出血狀況得以改善,總有效率85.71%。

4.5脂肪肝、肝硬化給60例脂肪肝患者服用復(fù)方地龍膠囊(鮮地龍、黃芪、川芎等),2粒/次,3 次/d,連續(xù)90 d,根據(jù)TC, TG、肝功能恢復(fù)情況,以及B超檢查脂肪肝的好轉(zhuǎn)情況，總有效率91.7%。

34例慢性乙型肝炎后肝硬化Child-Pugh C級且血漿白蛋白<28 g/L患者在基礎(chǔ)治療癥狀緩解出院時(shí)改服鱉甲地龍河車散(鱉甲、地龍、紫河車),5g/次,2次/天,連續(xù)1年。治療半年后患者血漿白蛋白水平顯著升高,甲胎蛋白水平明顯降低,且治療組在治療3個(gè)月后至1年內(nèi)需住院治療的比率也明顯降低,以上指標(biāo)均優(yōu)于對照組;44例Child-Pugh級肝硬化腹水患者給予鱉甲地龍河車散治療,3個(gè)月后血漿白蛋白水平、正常率和凝血酶原活動度>70%的比例顯著增加, Pugh分級由B級恢復(fù)至A級成功率明顯上升,治療5年內(nèi)需再住院次數(shù)﹑癌變率及病死率顯著下降,5年內(nèi)無腹水且肝功能正常率顯著提高,以上指標(biāo)均優(yōu)于對照組。4.6腎炎38例慢性腎小球腎炎患者在常規(guī)治療基礎(chǔ)上給予疏血通注射液(4~6 mI/d,稀釋后靜滴)聯(lián)合黃芪注射液治療,2周為1個(gè)療程,共2個(gè)療程,療程間歇3 ~5 d。總有效率86.84% ,患者血肌酐、尿素氮、內(nèi)生肌酐清除率、尿微球蛋白.24 h尿蛋白定量和1 h尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)等腎功能指標(biāo)均顯著改善,且優(yōu)于對照組。

60例慢性腎衰患者在常規(guī)治療基礎(chǔ)上給予疏血通注射液(6 ml/d,稀釋后靜滴)聯(lián)合大黃粉治療,3周為1個(gè)療程，維持治療2個(gè)月。患者癥狀顯著改善,多項(xiàng)腎功能指標(biāo)得以恢復(fù)。

5結(jié)語

地龍是平肝熄風(fēng)藥的代表,其活性成分蚯蚓纖溶酶已廣泛用于臨床治療多種血栓性疾病,對于預(yù)防控制癲癇、慢性支氣管炎、支氣管哮喘,高血壓,組織纖維化等,地龍及其復(fù)方也取得了滿意的療效。作為動物性藥材,地龍所含蛋白類活性成分的致敏性較低,這為其臨床的安全性奠定了基礎(chǔ),當(dāng)然包括地龍?jiān)趦?nèi)的任何動物性中藥在使用過程中仍應(yīng)密切重視其過敏反應(yīng)。