Trizol是細(xì)胞或組織總RNA抽提試劑。本產(chǎn)品采用和Invitrogen公司的TRIzol完全相似的原理和方法，抽提的方法和步驟完全相同。Trizol的顏色和TRIzol相同，加入氯仿后上層呈無(wú)色，下層呈紅色，便于吸取上層水相。對(duì)動(dòng)植物細(xì)胞或組織及細(xì)菌的總RNA抽提均適用，抽提所得RNA無(wú)DNA和蛋白污染，一般所得RNA溶于DEPC水后的A260/280值為1.8-2.0。裂解細(xì)胞或和組織共勻漿時(shí)，Trizol可以保持樣品中RNA的完整性，即可以有效抑制RNA的降解。每一百萬(wàn)細(xì)胞用Trizol抽提可得5-15μg RNA；每毫克組織用Trizol抽提可得1-10μg RNA。產(chǎn)量因細(xì)胞和組織不同而異。
Trizol抽提所得RNA可直接用于Northern，點(diǎn)雜交，純化mRNA，體外翻譯，RNase protectionassay，cDNA克隆，以及RTPCR；也可以用于基因表達(dá)芯片分析、高通量測(cè)序等對(duì)RNA質(zhì)量要求較高的情況。
本產(chǎn)品是專(zhuān)為兩步法 RT-PCR 第一步實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的高靈敏度反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)預(yù)混體系。gDNA remover 可以有效的去除 RNA 提取過(guò)程中殘留的基因組DNA，處理后的樣品可以直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。優(yōu)化的反應(yīng)體系（RT Reaction Mix）中預(yù)混了Random Primer 和 Oligo(dT)18，可以從極低量的總 RNA 或 poly(A) mRNA 合成第一鏈 cDNA，實(shí)驗(yàn)過(guò)程無(wú)需額外添加引物和 RNase 抑制劑（已預(yù)混在 2×RT Reaction Mix 中），合成的 cDNA 產(chǎn)量高，使用方便，對(duì)后續(xù)的 PCR 或 real time PCR 實(shí)驗(yàn)兼容性好， 適合于各種耐熱 DNA 聚合酶。
本產(chǎn)品是采用 SYBR Green I 嵌合熒光法進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 的專(zhuān)用 2×濃度預(yù)混液。含有優(yōu)化濃度的HotStart Taq DNA Polymerase、SYBR Green I、dNTPs、Mg2+、反應(yīng)緩沖液和穩(wěn)定劑等成分。主要用于基因組 DNA 靶 序列和 RNA 反轉(zhuǎn)錄后 cDNA 靶序列的檢測(cè)。HotStart Taq DNA Polymerase 高溫加熱前，抗 Taq單克隆抗體與 Taq 結(jié)合，抑制 Taq 的聚合酶活性，從而抑制在低溫條件下出現(xiàn)的由引物和模板 DNA 非特異性雜交或引物二聚體引起的非特異性擴(kuò)增?？贵w在 PCR 反應(yīng)的預(yù)變性步驟中已完全失活，不會(huì)阻礙之后 Taq 酶聚合反應(yīng)，大大提高了 PCR 反應(yīng)的靈敏度及特異性。優(yōu)化濃度的 SYBR Green I 熒光染料摻入 DNA 雙鏈后，熒光信號(hào)增強(qiáng)，而不摻入鏈中 SYBR Green I 染料分子熒光信號(hào)不變，從而保證熒光信號(hào)的增加與 PCR 產(chǎn)物的增加完全同步，熒光可以在退火或延伸階段測(cè)定。
本產(chǎn)品為 2×濃度預(yù)混實(shí)時(shí)熒光定量快速 PCR 反應(yīng)體系，使用時(shí)只需加入模板、引物、ROX Reference Dye（用以校正孔與孔之間產(chǎn)生的熒光信號(hào)誤差，根據(jù)不同熒光定量 PCR 儀選擇使用）和水，使其工作濃度為 1×，即可進(jìn)行反應(yīng)。具有快速簡(jiǎn)便、靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)，可最大限度地減少人為誤差、節(jié)約 PCR 實(shí)驗(yàn)操作時(shí)間、降低污染機(jī)率。
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