研究蛋白之間相互作用必不可少的實(shí)驗(yàn)是免疫共沉淀(CoIP),常被用于鑒定特定蛋白復(fù)合物的中未知蛋白組分,因其具有可信度高的優(yōu)點(diǎn),在現(xiàn)在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究中廣泛應(yīng)用,本文將為您詳解CoIP的實(shí)驗(yàn)原理和操作步驟,實(shí)驗(yàn)剛?cè)腴T的同學(xué)必看哦。 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span> 1)檢測(cè)兩種目標(biāo)蛋白是否在體內(nèi)相互作用; 2)找到與目標(biāo)蛋白在體內(nèi)存在相互作用的新蛋白。 運(yùn)用這項(xiàng)技術(shù),說不定你會(huì)有新的發(fā)現(xiàn)哦! 二、實(shí)驗(yàn)原理 CoIP是利用抗原蛋白和抗體的特異性結(jié)合、以及“Protein?A/G"特異性地結(jié)合抗體(免疫球蛋白)FC段的現(xiàn)象開發(fā)出來的方法。 目前多用Protein?A/G預(yù)先結(jié)合在Argarose?Beads上,使之與含有抗原蛋白的溶液(如細(xì)胞裂解液)及抗體(誘餌蛋白X抗體)反應(yīng)后,Beads上的Prorein?A/G就能通過抗體吸附誘餌蛋白X,誘餌蛋白X通過與靶蛋白Y相互作用將其從細(xì)胞裂解液中分離出來,從而達(dá)到免疫共沉淀的目的。 如果還是不懂,看圖就知道啦!
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