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研究進(jìn)展 | 胡蘿卜膳食纖維的抗氧化作用與應(yīng)用

 大成教育圖書館 2021-07-27

膳食纖維和多酚是飲食中的兩個主要營養(yǎng)成分,有助于人體健康。有科學(xué)證據(jù)表明,膳食纖維是與復(fù)雜食物基質(zhì)相關(guān)的大量多酚的載體。結(jié)合多酚的存在可能有助于抗氧化活性和益生元特性。

——Composition of bound polyphenols from carrot dietary fiber and its in vivo and in vitro antioxidant activity

圖片



01

胡蘿卜膳食纖維中結(jié)合型多酚的組成及其體內(nèi)、體外抗氧化作用

Highlights
  • 從胡蘿卜膳食纖維中制備了結(jié)合型多酚(CDF-PP)

  • 在CDF-PP中鑒定出42 種結(jié)合的多酚化合物

  • DPPH、ORAC和PSC試驗(yàn)表明,CDF-PP在體外可以清除自由基

  • CDF-PP在活體大腸桿菌中表現(xiàn)出顯著的ROS清除活性

  • CDF-PP可能是一種有應(yīng)用前景的抗氧化劑來源

 
南昌大學(xué)的Ruihong Dong、Qiang Yu等采用超高效液相色譜-電噴霧電離-四極桿飛行時間質(zhì)譜(UPLC-ESI-QTOF-MS/MS)對胡蘿卜膳食纖維中的結(jié)合多酚(CDF-PP)進(jìn)行定性分析。通過將保留時間、二級質(zhì)譜片段信息與真實(shí)的標(biāo)準(zhǔn)品或文獻(xiàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行比對,檢測到了11 種有機(jī)酸、9 種羥基苯甲酸及衍生物、6 種羥基肉桂酸及衍生物、4 種酚醇類及衍生物、3 種黃酮類及衍生物、7 種酯類及衍生物、2 種其他化合物的存在。此外,通過DPPH、ORAC、PSC等不同種類的檢測方法測定了CDF-PP的體外抗氧化活性,表明CDF-PP能以劑量依賴的方式清除自由基。此外,CDF-PP在活體秀麗隱桿線蟲中表現(xiàn)出顯著的活性氧清除活性。本研究是首次對CDF中多酚類物質(zhì)的組成和體外/體內(nèi)抗氧化活性進(jìn)行全面研究,這意味著CDF-PP可能是一種有應(yīng)用前景的抗氧化劑來源。
 
CDF-PP的體外抗氧化活性
圖1為CDF-PP的體外抗氧化活性,包括DPPH、ORAC和PSC自由基清除活性。在濃度為50~500 μg/mL時,CDF-PP對DPPH自由基的清除能力在28.8%~82.2%之間(圖1a),EC50值為157.58 μg/mL。CDF-PP的顯著DPPH自由基清除活性可能與CDF-PP中存在的大量羥基有關(guān),如酚酸、黃酮類、有機(jī)酸等。特別值得注意的是,當(dāng)濃度高于400 μg/mL時,CDF-PP的DPPH清除效率高于BHT。然而,在相同濃度下,CDF-PP的DPPH自由基清除效率低于VC(圖2)。
 
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a. DPPH自由基清除活性;b.氧自由基清除能力(ORAC);c.過氧自由基清除能力(PSC);d.活體秀麗隱桿線蟲中的活性氧清除能力(ROS)。
圖1  CDF-PP的體外和體內(nèi)抗氧化活性。
 
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圖2  負(fù)離子模式下CDF-PP的(A)總離子色譜圖,以及(B)280 nm和(C)320 nm處的DAD色譜圖。
 
圖1b1顯示了CDF-PP的ORAC動力學(xué)和劑量響應(yīng)曲線,CDF-PP可以清除過氧自由基,并以劑量依賴的方式延遲熒光的衰變速度。CDF-PP的氧自由基清除能力可能是由于存在抗氧化化合物,如對苯二酚、2′-羥基苯乙酮或兒茶酚、乙酸酯,它們具有與原位產(chǎn)生的ROO-一起淬滅的能力,并延遲熒光探針被過氧自由基破壞。為了計算相對的Trolox等效ORAC值,圖1b2所示為Trolox(5 μmol/L)的熒光衰減曲線。8 μg/mL的CDF-PP抑制自由基損傷的能力高于5 μmol/L的Trolox。當(dāng)CDF-PP的濃度從1 μg/mL增加到10 μg/mL時,CDF-PP的相對ORAC值從(2.923±0.16)μmol/L Trolox增加到(12.111±0.51)μmol/L Trolox。CDF-PP抗氧化作用的機(jī)制可能是由于其對ROO-的電子給予活性,從而終止了過氧化鏈反應(yīng)。
 
CDF-PP在體內(nèi)的抗氧化活性
ROS檢測的目的是分析CDF-PP在活體秀麗隱桿線蟲中清除ROS的抗氧化潛力。圖1d顯示,CDF-PP的ROS清除能力水平呈劑量依賴性,ROS水平的降低與CDF-PP濃度的增加呈正相關(guān)。特別是在436 mg/L時,約49.3%的ROS被淬滅(對照組設(shè)定為100%)。這些結(jié)果與CDF-PP的體外抗氧化活性一致,說明CDF-PP可以清除活體秀麗隱桿線蟲中的ROS,且ROS水平隨濃度的增加而降低。
 
Reference: 
DONG R H, YU Q, LIAO W, et al. Composition of bound polyphenols from carrot dietary fiber and its in vivo and in vitro antioxidant activity[J]. Food Chemistry, 2021, 339, 127879. DOI:10.1016/j.foodchem.2020.127879.



02
結(jié)合多酚對胡蘿卜膳食纖維體內(nèi)、體外發(fā)酵和抗氧化性的影響
膳食纖維中結(jié)合多酚的重要性日益受到關(guān)注。南昌大學(xué)的Shuai Liu、Qiang Yu、Shaoping Nie、Mingyong Xie等的本研究旨在闡明結(jié)合多酚對胡蘿卜膳食纖維(CDF)體內(nèi)和體外發(fā)酵和抗氧化性的影響。小鼠體內(nèi)糞便和人體外糞便發(fā)酵樣品的16S rRNA熱測序結(jié)果顯示,與CDF處理相比,去酚化胡蘿卜膳食纖維(CDF-DF)處理降低了操作性分類單位(OTUs)、ACE和Chao1指數(shù),提高了厚壁菌門/擬桿菌門的比例和細(xì)菌屬的相對豐度(RA),克制了典型有益菌的RA,并提高了各種有害菌屬的RA。同時,CDF-DF組的短鏈脂肪酸(SCFA)含量較低,而pH值高于CDF組。結(jié)合多酚與CDF-DF(CDDP)的組合可以恢復(fù)體外發(fā)酵樣品中受結(jié)合多酚去除影響的這些指標(biāo)。此外,CDF-DF喂養(yǎng)的小鼠在結(jié)腸中表現(xiàn)出較高的脂質(zhì)過氧化(MDA)含量,以及較低的超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性。CDF-DF的細(xì)胞抗氧化活性(CAA)值低于CDF和CDDP。這些結(jié)果表明,結(jié)合多酚對CDF的發(fā)酵和抗氧化性有顯著貢獻(xiàn)。
 
小鼠糞便樣品中微生物群落的變化
厚壁菌門和擬桿菌門為優(yōu)勢菌種,RA大于95%(圖3A)。觀察發(fā)現(xiàn),與普通飼料小鼠相比,以CDF飼喂的小鼠擬桿菌門RA較高(P<0.05),而變形菌門RA較低。然而,與CDF飼喂的小鼠相比,CDF-DF飼喂的小鼠變形菌門RA較高(P<0.05),擬桿菌門RA較低。圖3B顯示了3 組間的厚壁菌門和擬桿菌門比值(F/B)。結(jié)果發(fā)現(xiàn),CDF飼喂小鼠的F/B比值下降是由于CDF飼喂小鼠的變形菌門RA高于正常飲食小鼠(P<0.05;圖3B)。然而,CDF-DF飼喂小鼠的F/B比值與正常飲食小鼠相比無顯著差異。
 
圖片
A.小鼠糞便樣品中門水平的微生物群組成;B.小鼠糞便樣品中厚壁菌門和擬桿菌門比率;C.小鼠糞便樣品中屬水平的微生物群組成;D.體外發(fā)酵樣品中門水平的微生物群組成;E.體外發(fā)酵樣品中厚壁菌門和擬桿菌門比率;F.體外發(fā)酵樣品中屬水平的微生物群組成。
圖3  小鼠糞便樣品和體外發(fā)酵樣品中的微生物群組成。
 
體外發(fā)酵樣品中微生物群落的變化
厚壁菌門、變形菌門和擬桿菌門的RA在門類上占優(yōu)勢(圖3D)。研究觀察到CDF組的類桿菌RA值(22.17%)比其他組有顯著差異(P<0.05)。此外,與CDF-DF組相比,CDF組和CDDP組的變形菌門RA較低(P<0.05;P=0.061)。此外,3 組間未發(fā)現(xiàn)厚壁菌門的RA有顯著差異。圖3E為體外發(fā)酵樣品的F/B比,說明CDF-DF組的F/B高于CDF組和CDDP組(P<0.05)。
 
小鼠糞便樣本中的SCFA含量
小鼠糞便樣品中SCFAs的含量如圖4所示。與CDF-DF飼喂的小鼠和正常飲食的小鼠相比,CDF-DF飼喂的小鼠SCFA的總含量有所增加(P<0.05;圖4A)。此外,在SCFA含量中,乙酸含量是主要的SCFA,其次是丁酸、丙酸和戊酸。此外,CDF組的乙酸和丁酸含量高于CDF-DF組(P<0.01;P<0.05;圖4B)和對照組(P<0.01;P<0.05;圖4D)。3 組中丙酸和戊酸含量沒有發(fā)現(xiàn)顯著差異。
 
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A.總SCFA;B.乙酸;C.丙酸;D.丁酸;E.戊酸。
圖4  小鼠糞便樣品中SCFA的含量。
 
體外發(fā)酵樣品中SCFA的含量
隨著發(fā)酵時間的延長,總SCFA的含量均逐漸增加(圖5A)。特別是在12 h時,CDF組的總SCFA含量明顯高于CDF-DF組(P<0.05)。此外,與CDF組和CDDP組相比,CDF-DF組的丙酸和丁酸含量有顯著下降(圖5C,5D)。此外,3 組之間的乙酸和戊酸含量沒有顯著差異。
 
圖片
A.總SCFA;B.乙酸;C.丙酸;D.丁酸;E.戊酸。
圖5  糞便發(fā)酵液中SCFA的含量。
 
Reference: 
LIU S, YU Q, HUANG H R, et al. The effect of bound polyphenols on the fermentation and antioxidant properties of carrot dietary fiber in vivo and in vitro[J]. Food Function, 2020, 11: 748-758. DOI:10.1039/C9FO02277E.



03

胡蘿卜纖維(CF)復(fù)合膜用于抗氧化劑保護(hù):粒徑效應(yīng)

Highlights
  • 研究了分離的胡蘿卜纖維(CF)的粒徑(53、105和210 μm)效應(yīng)

  • CF顯示出果膠,并共同提取了具有抗氧化作用的酚類和類胡蘿卜素

  • CF和抗壞血酸用于抗氧化的低甲氧基果膠基復(fù)合材料

  • 粒徑大小影響CF的水合特性和薄膜的機(jī)械性能

  • 負(fù)載的抗壞血酸在53 μm-CF復(fù)合材料中獲得了最高的水解穩(wěn)定性

 
阿根廷布宜諾斯艾利斯大學(xué)的Alondra M. Idrovo Encalada、Ana M. Rojas等,在本文研究了胡蘿卜纖維(CF)的粒徑(53、105和210 μm)對其水合性能和抗氧化能力的影響,以及對用商用低甲氧基果膠(LMP)開發(fā)的CF-復(fù)合膜性能的影響。研究結(jié)果表明,CF含有胡蘿卜素和酚類物質(zhì),表現(xiàn)出抗氧化活性,并產(chǎn)生了均質(zhì)的鈣-LMP基復(fù)合材料。53 μm-CF表現(xiàn)出最低的水合能力,并產(chǎn)生了彈性和可變形性最小的復(fù)合膜,這可能是由于CF由鈣交聯(lián)的LMP鏈橋接而成。在復(fù)合材料中發(fā)現(xiàn)與負(fù)載CF相關(guān)的抗氧化活性。當(dāng)l-(+)-抗壞血酸(AA)也被負(fù)載時,其水解穩(wěn)定性隨著CF粒徑的減小而增加,在0%-CF-和210 μm-CF-LMP薄膜中顯示出最低的穩(wěn)定性。在約250 μm以下,粒徑?jīng)Q定了含果膠CF的水化性能,影響復(fù)合材料的微觀結(jié)構(gòu)和水的流動性。
 
水化性能
水合性能隨CF的粒徑顯著增加(P<0.05),從每克干纖維平衡18 h后吸水26.7 mL,到210 μm時達(dá)到36.3 mL/g。CF中存在的果膠主要負(fù)責(zé)吸水和膨脹能力。以每克纖維在18 h平衡后所吸收的水分克數(shù)確定的持水量(WHC)和保水量(WRC),53 μm的CF顯著低于105 μm和210 μm的CF(圖6a)。有研究觀察到,減小麥麩的粒徑會降低WHC,這被解釋為由于纖維基質(zhì)被磨碎而導(dǎo)致的。然而,顆粒大小對微晶纖維素的WHC影響較小。另一方面,根據(jù)研究報道,將椰子碎渣的粒徑從1127 μm降低到550 μm后,水合性能(SC、WHC和WRC)增加,這是由于理論表面積和總孔隙體積的增加,以及結(jié)構(gòu)的改變。然而,在550 μm以下,水化性能隨著粒徑的減小而降低。
 
53 μm粉體自發(fā)吸收水的動力學(xué)曲線也比平均粒徑為105 μm和210 μm的粉體低(圖6b)。考慮到所有的水化結(jié)果,將CF研磨到53 μm的平均粒徑似乎降低了親水行為。于是認(rèn)為,不同的水化性能可能與纖維微結(jié)構(gòu)有關(guān)。從這個意義上講,53 μm胡蘿卜纖維的比容(8 cm3/g)顯著(P<0.05)高于105 μm和210 μm粉末(圖6c)。比容可以作為毛細(xì)結(jié)構(gòu)差異的指標(biāo)。理論上,假設(shè)化學(xué)成分保持不變,系統(tǒng)的孔隙率越大,吸收的水分就應(yīng)該越多。
 
圖片
a.平均粒徑;b.方程擬合;c.比容與粒徑的關(guān)系。
圖6  胡蘿卜纖維的溶脹度(SC),持水率(WHC)和保水率(WRC)。
 
Reference:  
ENCALADA A M I, BASANTA M F, FISSORE E N, et al. Carrot fiber (CF) composite films for antioxidant preservation: particle size effect[J]. Carbohydrate Polymers, 2016, 136: 1041-1051. DOI:10.1016/j.carbpol.2015.09.109.
—END—

編輯/翻譯:梁安琪

責(zé)任編輯:孫勇

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