師妹:師兄,我應該用雄性 Cre 配雌性 flox 小鼠還是用雌性 Cre 配雄性 flox 小鼠呢? 師兄:這個問題要看你使用的是哪種 Cre 啦,有的 Cre 小鼠父性遺傳與母性遺傳的重組效率有所差別哦。 比如 EIIa-Cre,來自母本的 Cre 在腎臟、肝臟、腸、胰腺中具有廣泛均勻的 Cre 活性,但在脾臟中呈馬賽克式的鑲嵌表達;而來自父本的 Cre 則都表現(xiàn)為鑲嵌式的重組活性。所以用雌性 Cre 來交配效率更高。 圖3. 親本的來源對 Cre 在體內的表達譜的影響。EIIa-Cre與Rosa26-LSL-lacZ交配獲得子代,lacZ染色結果:(a-c) Cre 來自母本 ;(d-f) Cre 來自父本。(圖片來自 Nat Commun. 2012;3:1218.) 師兄:還有一些 Cre 品系在卵母細胞減數(shù)分裂后會有 Cre mRNA 或蛋白的持續(xù)存在,即使這個卵母細胞本身并不帶有 Cre 轉基因。這時,用雌性 Cre 小鼠與 flox 小鼠交配可以更快地直接獲得全身性基因敲除小鼠,比如:Ddx4-Cre 或 Sox2-Cre。 |
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