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結(jié)核病實驗室診斷的現(xiàn)狀、挑戰(zhàn)和展望

 Cheximing 2021-04-08

結(jié) / 核 / 病

Academic Research

實驗室診斷的現(xiàn)狀、挑戰(zhàn)和展望

Author

本文作者:李亮

首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京胸科醫(yī)院副院長

中國疾控中心結(jié)核病防治臨床中心副主任

中華醫(yī)學(xué)會結(jié)核病學(xué)分會主任委員

圖片

(圖片來源:中國疾病預(yù)防控制中心網(wǎng)站)

結(jié)核病一直是全球最主要的公共衛(wèi)生挑戰(zhàn)和難題。據(jù)世界衛(wèi)生組織2020年全球結(jié)核病報告,2019年,估算新發(fā)結(jié)核病患者996萬,死亡140萬,利福平耐藥及耐多藥結(jié)核?。∕DR-TB)46.5萬。我國是全球30個結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國家之一,估計2019年新發(fā)結(jié)核病患者83.3萬,死亡3.1萬,利福平耐藥及耐多藥結(jié)核病6.5萬。其中新發(fā)結(jié)核病患者占全球8.36%,利福平耐藥及耐多藥結(jié)核病占全球14%。結(jié)核病防控形勢依然嚴(yán)峻。2020年開始的新冠肺炎全球流行進(jìn)一步加劇了結(jié)核病防控的壓力。

在結(jié)核病控制的所有環(huán)節(jié)中,患者發(fā)現(xiàn)無疑是最主要的之一。患者發(fā)現(xiàn)措施中,實驗室診斷尤為重要。1882年,無疑是全球結(jié)核病控制工作里程碑意義的一年,因為就在這一年的3月24日,德國科學(xué)家羅伯特?科赫發(fā)現(xiàn)了結(jié)核病的病原菌—結(jié)核桿菌。這也是結(jié)核病實驗室診斷的開端。盡管時光已經(jīng)過去了139年,但結(jié)核病的實驗室診斷依然是當(dāng)今結(jié)核病發(fā)現(xiàn)的核心技術(shù)。

  下面,將回顧 >>

結(jié)核病實驗室診斷的現(xiàn)狀、挑戰(zhàn)和展望

圖片

Part

1

結(jié)核病實驗室診斷現(xiàn)狀及挑戰(zhàn)

 一 

實驗室診斷的主要技術(shù)

1. 細(xì)菌學(xué)診斷技術(shù)

細(xì)菌學(xué)診斷是結(jié)核病診斷最原始也是目前使用最普遍的技術(shù)。一百多年來為結(jié)核病的患者發(fā)現(xiàn)發(fā)揮了巨大作用。

01

痰涂片:痰涂片技術(shù)操作簡單,可以快速診斷痰中是否存在分枝桿菌。結(jié)核桿菌是分枝桿菌,但非結(jié)核分枝桿菌也屬于分枝桿菌。因此,痰涂片陽性意味著可能是結(jié)核菌,也可能是其他非結(jié)核分枝桿菌。非結(jié)核分枝桿菌與結(jié)核分枝桿菌所占比例在不同地區(qū)差別較大。如在某些東南亞地區(qū)占50%以上。我國流調(diào)比例為22%,最新研究占比為8%。

02

痰培養(yǎng):可以診斷痰中是否存在結(jié)核分枝桿菌,是目前結(jié)核病診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”。傳統(tǒng)的固體培養(yǎng)需要時間較長。液體培養(yǎng)快速、方便,應(yīng)用前景較大。

03

藥敏試驗:是診斷耐藥結(jié)核病的技術(shù)。也是基于痰培養(yǎng)的檢測技術(shù)。傳統(tǒng)的藥敏試驗基于表型檢測,主要用于一線抗結(jié)核藥物。目前分子生物學(xué)技術(shù)快速發(fā)展,為藥敏試驗注入活力,尤其是二線抗結(jié)核藥物藥敏試驗。

2.免疫學(xué)診斷技術(shù)

01

結(jié)核菌素皮膚試驗(PPD):最古老的結(jié)核感染診斷方法。其結(jié)果陽性意味著既往曾感染過結(jié)核,也可能是接種卡介苗的結(jié)果;結(jié)果陰性既可能沒有感染結(jié)核桿菌,也可能是免疫疾病導(dǎo)致的假陰性。

02

?-干擾素釋放試驗(IGRA):是近年來發(fā)展起來的結(jié)核免疫診斷技術(shù)。結(jié)果陽性意味著既往曾感染過結(jié)核桿菌(部分非結(jié)核分枝桿菌也可能導(dǎo)致陽性,但可以排除卡介苗接種導(dǎo)致的假陽性)。因此,較PPD對診斷價值更大一些。主要用于結(jié)核潛伏感染的診斷。

03

抗原、抗體、細(xì)胞因子檢測:長期以來人們一直在研究結(jié)核病的免疫反應(yīng),也試圖探索結(jié)核病的免疫診斷。目前市場上也用不少結(jié)核病的抗原、抗體或細(xì)胞因子診斷產(chǎn)品。當(dāng)目前世界衛(wèi)生組織并不推薦此類產(chǎn)品用于結(jié)核病的診斷,主要原因是這些技術(shù)的敏感性和特異性差別較大。其核心原因,還是我們尚未發(fā)現(xiàn)結(jié)核病更特異的抗原或抗體。

3.分子生物學(xué)診斷技術(shù)

分子生物學(xué)診斷是結(jié)核病診斷10年來最令人鼓舞的進(jìn)展。大量新的分子生物學(xué)技術(shù)被應(yīng)用于臨床,如線性探針技術(shù)、LAMP技術(shù)、基因芯片技術(shù)、RNA檢測技術(shù)等。與傳統(tǒng)診斷技術(shù)比較,這些技術(shù)具有更快速、更方便、更敏感等特點,代表了結(jié)核病診斷的未來發(fā)展趨勢。

 二 

實驗室診斷的挑戰(zhàn)

盡管我們在結(jié)核病的實驗室診斷方面取得了較大的進(jìn)步,但是,結(jié)核病診斷方面依然存在較多的挑戰(zhàn),表現(xiàn)為:

1

傳統(tǒng)診斷技術(shù)應(yīng)用最廣泛,但效率不能令人滿意。目前,縣級仍然是我國結(jié)核患者發(fā)現(xiàn)的主戰(zhàn)場,痰涂片是主要診斷技術(shù)。但痰涂片的發(fā)現(xiàn)率僅有30%。因此,如果還是依靠這些傳統(tǒng)診斷技術(shù),結(jié)核病患者發(fā)現(xiàn)的目標(biāo)就很難有大的提高。

2

分子生物學(xué)等新技術(shù)應(yīng)用受限。受到價格、報銷等因素影響,分子生物學(xué)技術(shù)還沒有得到普遍使用,尤其是在縣級使用非常有限。這一問題不解決,也會嚴(yán)重影響患者發(fā)現(xiàn)水平。

3

實驗室質(zhì)控體系還較為薄弱。質(zhì)控體系表現(xiàn)為不同區(qū)域、不同級別、不同技術(shù)間的巨大差異。尤其是室間質(zhì)控還很薄弱。

4

實驗室檢測人員穩(wěn)定性和能力尚需加強。檢測人員是實驗室診斷的核心。目前,全國結(jié)核病實驗室檢測人員待遇不高、風(fēng)險高等問題還較為突出,人員流動性大,培養(yǎng)等體系尚不完善。這些問題也導(dǎo)致實驗室能力和水平受到較大影響。

Part

2

結(jié)核病實驗室診斷的展望

世界衛(wèi)生組織提出2035年終止結(jié)核病的目標(biāo)。目前距離2035年僅有20多年。如果在防控策略、技術(shù)和人員方面沒有大的突破,要實現(xiàn)這一目標(biāo)就非常困難。尤其是實驗室診斷方面,需要更大的決心和行動。

 一 

快速推進(jìn)新技術(shù)的應(yīng)用和普及

尤其是那些快速、敏感、簡單的技術(shù),需要盡快在基層推廣。要盡快解決設(shè)備價格、患者報銷等困難。

建立強有力的實驗室質(zhì)控體系

建立國家-省-市-縣四級實驗室診斷質(zhì)控體系,涵蓋細(xì)菌學(xué)診斷、分子生物學(xué)診斷、免疫學(xué)診斷等內(nèi)容。質(zhì)控結(jié)果要及時應(yīng)用到國家防控體系中。

建立有效的人員培養(yǎng)體系

各級政府將實驗室人員培養(yǎng)納入日常工作,在經(jīng)費、技術(shù)、考核等方面給予支持。


組建實驗室診斷技術(shù)研發(fā)推廣平臺

整合資源,建立包括研究機構(gòu)、醫(yī)療機構(gòu)、疾控機構(gòu)、企業(yè)等在內(nèi)的實驗室新診斷技術(shù)研發(fā)平臺,發(fā)揮我們體制優(yōu)勢,加大成果轉(zhuǎn)化力度,加強新技術(shù)研發(fā)、評估、推廣力度。

圖片

(圖片來源:中國疾病預(yù)防控制中心網(wǎng)站)

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