【原】知行合一：NextCure的技術(shù)平臺(tái)和在研產(chǎn)品速覽

八卦小和尚 2021-02-19

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首先幾點(diǎn)，招股書本身并不是同行評(píng)議的研究型文章，對(duì)科研的陳述都不可能盡善盡美，所以我也就是把與管線、平臺(tái)技術(shù)相關(guān)的幾段拿出來，為了省事，直接沿用原文的第一人稱

其次，對(duì)于管線靠前的NC318和NC410，現(xiàn)在評(píng)價(jià)還太早，318雖然有了一些1期數(shù)據(jù)，但主要還是簡單的安全性數(shù)據(jù)，不管是PKPD還是efficacy、biomarker都要等后面繼續(xù)的研究來看，所以現(xiàn)在也不好下一個(gè)結(jié)論；而410的話，一些臨床前的驗(yàn)證還在繼續(xù)，只是對(duì)這類MOA感覺有點(diǎn)怪，畢竟08年就知道“The soluble leukocyte-associated Ig-like receptor (LAIR)-2 antagonizes the collagen/LAIR-1 inhibitory immune interaction”

另外因?yàn)榻鼇硪恍┦虑樯硇木闫＃敬胃潞箝_始休息一段時(shí)間，預(yù)計(jì)會(huì)停更1-2周，五一后正常。

1 BUSINESS Overview

2 FIND-IO平臺(tái)

3 研發(fā)管線

4 腫瘤免疫相關(guān)背景

5 NC318的背景及相關(guān)數(shù)據(jù)

5.1 S15背景
5.2 S15靶點(diǎn)的驗(yàn)證
5.3 1/2 期臨床數(shù)據(jù)
5.4 S15+腫瘤模型中的臨床前數(shù)據(jù)

6 NC410的背景及臨床前研究

6.1 腫瘤中LAIR通路的背景
6.2 臨床前開發(fā)
6.3 NC410的臨床開發(fā)計(jì)劃

7 其它在研項(xiàng)目

1 BUSINESS Overview

我們是一家臨床階段的旨在發(fā)現(xiàn)和開發(fā)全新的首創(chuàng)的免疫藥物來恢復(fù)免疫系統(tǒng)正常功能從而治療癌癥和其它免疫相關(guān)疾病的生物制藥公司。我們基于整體來審視免疫系統(tǒng)而非針對(duì)特定免疫細(xì)胞類型，我們致力于關(guān)注理解生物學(xué)信號(hào)通路、細(xì)胞間相互作用及此等作用在免疫應(yīng)答中的功能。通過自主開發(fā)的FIND-IO(Functional, Integrated, NextCure Discovery in Immuno-Oncology)平臺(tái)，我們研究了多類細(xì)胞來發(fā)現(xiàn)并了解免疫細(xì)胞的靶點(diǎn)組成與功能以開發(fā)免疫治療藥物。我們同樣關(guān)注對(duì)現(xiàn)有治療沒有應(yīng)答的患者、在任何治療后均會(huì)進(jìn)展的患者以及患有現(xiàn)行療法無法惠及的癌癥患者。

我們致力于發(fā)現(xiàn)和開發(fā)全新的免疫藥物，即通過新穎或獨(dú)特的機(jī)制來治療特定的適應(yīng)癥。我們管線中領(lǐng)先的候選藥物NC318就是一個(gè)靶向新型的免疫調(diào)控類受體Siglec-15/S15的全新的藥物。2018年10月啟動(dòng)了NC318治療晚期或轉(zhuǎn)移型實(shí)體瘤患者的1/2期臨床，我們預(yù)期19年4季度完成該研究的1期部分并于20年4季度完成2期部分。進(jìn)度第二的候選藥物NC410，被設(shè)計(jì)通過阻斷白細(xì)胞相關(guān)的免疫球蛋白樣受體1(LAIR-1)介導(dǎo)的免疫抑制的新型免疫治療藥物，計(jì)劃于2019年4季度向米國FDA提交IND。

2018年11月與禮來簽署了一項(xiàng)多年的合作協(xié)議，致力于應(yīng)用FIND-IO平臺(tái)發(fā)現(xiàn)全新的腫瘤免疫靶點(diǎn)，并未我們和禮來提供排他性的協(xié)議合作開發(fā)抗體藥物。目前收到首付款2500萬刀現(xiàn)金和1500萬刀股權(quán)投資，同時(shí)臨床開發(fā)、注冊(cè)和銷售等里程碑付款合計(jì)不超過14億刀。

2 FIND-IO平臺(tái)

我們的FIND-IO能夠用自主專利的方法對(duì)原代免疫細(xì)胞和免疫譜系來源的細(xì)胞株(包括從患者體內(nèi)分離的T細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、DC和癌細(xì)胞后構(gòu)建的細(xì)胞株)中的免疫信號(hào)進(jìn)行功能檢測，使得可以鑒定出能被新型免疫治療藥物靶向來修復(fù)并保持抗腫瘤免疫活性的蛋白。我們已經(jīng)利用FIND-IO平臺(tái)鑒定出多個(gè)新型靶點(diǎn)，包括了那些在研發(fā)管線中被設(shè)計(jì)來靶向治療的。

FIND-IO平臺(tái)包括了三個(gè)整合的組份：第一部分包括了基因庫，也稱靶點(diǎn)庫，包含的基因編碼了一系列具有結(jié)構(gòu)多樣性的蛋白質(zhì)分子，可以插入在細(xì)胞表面的質(zhì)膜也可以分泌到細(xì)胞外；第二部分有一系列免疫和非免疫類型細(xì)胞組成，統(tǒng)稱為應(yīng)答細(xì)胞，用來評(píng)估靶點(diǎn)庫的功能效應(yīng)，其中免疫應(yīng)答細(xì)胞的類型包括從健康志愿者身上分離的原代免疫細(xì)胞和可以體外培養(yǎng)的各種免疫細(xì)胞株，而非免疫應(yīng)答細(xì)胞主要是腫瘤細(xì)胞；第三部分采用了一系列的輸出結(jié)果的集合來提示是否找到了抑制或刺激免疫反應(yīng)的新靶點(diǎn)。

和其他的只關(guān)注單個(gè)參數(shù)或者單個(gè)細(xì)胞類型的篩選平臺(tái)不同，我們?cè)诙喾N細(xì)胞類型和多個(gè)功能中進(jìn)行了廣泛n的搜索，這樣設(shè)計(jì)的目的就是為了產(chǎn)生有生理學(xué)意義的結(jié)果。盡管TME中免疫反應(yīng)的內(nèi)部機(jī)制十分復(fù)雜并且處于動(dòng)態(tài)變化的階段，但我們的FIND-IO平臺(tái)在設(shè)計(jì)上已經(jīng)十分簡化并且有效。這個(gè)平臺(tái)通過多層面的整合模擬了生物學(xué)上的相互作用，來評(píng)估細(xì)胞間相互作用引起的免疫學(xué)功能，從而鑒定出新的免疫調(diào)節(jié)因子，找出那些可以被單抗或融合蛋白等免疫治療藥物靶向的蛋白。這些FIND-IO平臺(tái)下初篩出的潛在靶點(diǎn)經(jīng)過進(jìn)一步的可重復(fù)性、穩(wěn)健性、相關(guān)性和綜合性的特征分析后得到有用的結(jié)果，提升針對(duì)這些新型免疫調(diào)節(jié)因子開發(fā)治療藥物的可能性。這個(gè)方法意在達(dá)到我們一貫的宗旨：將目前的免疫治療的成功延伸到對(duì)現(xiàn)有療法無法獲益的環(huán)設(shè)身上并提升這部分患者的生存。

從操作角度，FIND-IO平臺(tái)的第一步就是將靶點(diǎn)文庫中的基因一個(gè)一個(gè)的轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞，從而使得宿主細(xì)胞表達(dá)這些文庫基因，最終蛋白質(zhì)表達(dá)在細(xì)胞表面或者分泌到附近空間。同時(shí)，宿主細(xì)胞經(jīng)改造表達(dá)一個(gè)與細(xì)胞功能相關(guān)的、有轉(zhuǎn)錄因子活性的報(bào)告基因，例如接上一個(gè)像RFP這樣的螢光蛋白的DNA來報(bào)告轉(zhuǎn)錄因子活性，所以一旦文庫基因表達(dá)的蛋白通過傳導(dǎo)合適的細(xì)胞信號(hào)后，會(huì)啟動(dòng)RFP的轉(zhuǎn)錄表達(dá)，就會(huì)檢測到紅色熒光。同樣的，免疫或非免疫的應(yīng)答細(xì)胞上經(jīng)改造也可以通過連接像GFP這樣的熒光蛋白的DNA來報(bào)告轉(zhuǎn)錄因子活性，所以一旦轉(zhuǎn)錄發(fā)生，就會(huì)檢測到GFP的信號(hào)。這樣就可以定量的測量兩類細(xì)胞的紅or綠色熒光信號(hào)，被稱作雙向信號(hào)，因此FIND-IO可以同時(shí)觀察宿主細(xì)胞和應(yīng)答細(xì)胞的信號(hào)事件。

FIND-IO平臺(tái)使得我們可以對(duì)包括T細(xì)胞、髓源細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、表皮癌細(xì)胞、漿細(xì)胞和多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞在內(nèi)的多種免疫或非免疫應(yīng)答細(xì)胞以及從健康供體分離的原代免疫細(xì)胞進(jìn)行選擇和篩選。對(duì)于每種細(xì)胞類型，我們對(duì)報(bào)告基因通路的活性、效應(yīng)器功能活性和對(duì)細(xì)胞死亡的影響進(jìn)行篩選，以鑒定在多類細(xì)胞中有共同或差別效應(yīng)的新型免疫調(diào)節(jié)類靶點(diǎn)。

此外，我們還能利用FIND-IO平臺(tái)聯(lián)合PD-1/PD-L1免疫檢查點(diǎn)這類特定通路，協(xié)同或疊加效應(yīng)的篩選，有助于發(fā)現(xiàn)潛在的聯(lián)合治療方案提升緩解率。

因此我們通過FIND-IO平臺(tái)旨在獲取一系列新型免疫治療藥物可以恢復(fù)正常免疫功能來治療癌癥和其它免疫相關(guān)疾病。雖然目前只聚焦于癌癥治療，但我們相信依靠專利化的技術(shù)和方法、對(duì)生物學(xué)信號(hào)通路的深刻理解和在免疫學(xué)及炎癥研究上的融合，為我們?cè)谔剿髌渌h(yuǎn)未被滿足需求的新型免疫治療藥物上提供了機(jī)遇。為了最大化該平臺(tái)的潛力，我們?cè)诖嘶A(chǔ)上進(jìn)一步開發(fā)了FIND-AI平臺(tái)，并拓展到篩選鑒定自身免疫疾病和炎癥領(lǐng)域的新靶點(diǎn)。

3 研發(fā)管線

研發(fā)管線中進(jìn)展領(lǐng)先的NC318是靶向S15的單克隆抗體，S15在包括M2型巨噬細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞等在內(nèi)的免疫抑制型細(xì)胞上高表達(dá)，2015年陳列平博士的研究揭示了S15的免疫抑制特性。在臨床前研究中我們和其它研究者都發(fā)現(xiàn)S15可以促進(jìn)對(duì)T細(xì)胞增殖的抑制并且對(duì)T細(xì)胞功能起到負(fù)調(diào)控的作用。NC318被設(shè)計(jì)來阻斷S15介導(dǎo)的免疫抑制，恢復(fù)T細(xì)胞的正常功能及抗腫瘤活性。由于在多類腫瘤細(xì)胞中檢測到S15表達(dá)，我們相信NC318可以用來治療多種癌癥并且有著獨(dú)特的調(diào)控腫瘤免疫微環(huán)境的能力。此外，由于S15和PD-L1在腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)是不重合的，因此我們相信NC318可能適合治療那部分對(duì)anti-PD-1/PD-L1無應(yīng)答的患者。我們正在初步評(píng)估NC318治療晚期或轉(zhuǎn)移型實(shí)體瘤，包括卵巢癌、非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)和頭頸部鱗癌(HNSCC)等。

NC410是進(jìn)展排名第二的免疫治療項(xiàng)目，是一個(gè)設(shè)計(jì)來阻斷LAIR-1介導(dǎo)的免疫抑制的融合蛋白。LAIR-1除了表達(dá)在T細(xì)胞上以外，還經(jīng)常表達(dá)在DC(樹突狀細(xì)胞)等抗原呈遞細(xì)胞上，其結(jié)合彈性蛋白或者C1q能引起TME中免疫功能的缺失，包括T細(xì)胞功能和DC活性的下降。阻斷LAIR-1的結(jié)合后，NC410可以促進(jìn)T細(xì)胞的功能和DC活性從而引起特定的抗腫瘤反應(yīng)來清除癌細(xì)胞。我們正在開展支持進(jìn)行IND的研究，期望在20年1季度遞交IND并啟動(dòng)在晚期或轉(zhuǎn)移型實(shí)體瘤的1/2期研究。我們目前主要集中于研究NC410在卵巢癌、NSCLC和腎癌的治療機(jī)會(huì)。

4 腫瘤免疫相關(guān)背景

免疫系統(tǒng)有著強(qiáng)大的生物學(xué)機(jī)制抵御并保護(hù)機(jī)體免疫遭受病原體，如病毒、寄生蟲和細(xì)菌攻擊，同樣也能夠通過對(duì)在癌細(xì)胞上特異性或高表達(dá)的抗原的識(shí)別和反應(yīng)來起到監(jiān)測癌細(xì)胞的作用。免疫細(xì)胞和不斷擴(kuò)增的癌細(xì)胞之間復(fù)雜的關(guān)系能夠通過阻斷細(xì)胞間的相互作用來阻止免疫反應(yīng)，從而產(chǎn)生TME中的免疫抑制。這類現(xiàn)象一般稱作免疫逃逸，也就是腫瘤可以阻止特異性T細(xì)胞在TME中發(fā)揮功能或者接近腫瘤位點(diǎn)，使得腫瘤可以繼續(xù)擴(kuò)增從而疾病進(jìn)展。晚期的腫瘤細(xì)胞可以有著多種免疫逃逸機(jī)制，甚至各個(gè)腫瘤細(xì)胞之間也存在差異。

腫瘤微環(huán)境指的是腫瘤所在的細(xì)胞環(huán)境，組成還包括相鄰的血管和各類免疫細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、髓源炎癥細(xì)胞、淋巴細(xì)胞以及信號(hào)分子和細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)。TME中的免疫細(xì)胞類型包括T細(xì)胞、天然殺傷細(xì)胞(NK)、樹突狀細(xì)胞(DC)、巨噬細(xì)胞、髓源抑制性細(xì)胞和中性粒細(xì)胞。腫瘤通過和所處的微環(huán)境持續(xù)相互作用，腫瘤細(xì)胞可以像免疫細(xì)胞那樣表達(dá)被稱為檢查點(diǎn)的共抑制分子來引起免疫耐受，使得腫瘤可以逃避宿主的免疫響應(yīng)從而無限擴(kuò)增。除了調(diào)節(jié)免疫功能外，TME中的免疫細(xì)胞也會(huì)加快形成支持癌細(xì)胞生長和演化的促腫瘤發(fā)生微環(huán)境。

目前癌癥研究和藥物開發(fā)聚焦于重塑TME并克服免疫抑制，檢查點(diǎn)抑制劑就是一類設(shè)計(jì)來消除腫瘤對(duì)免疫系統(tǒng)抵抗的藥物。目前開發(fā)免疫檢查點(diǎn)抑制劑治療多種癌癥，也是基于通過逆轉(zhuǎn)檢查點(diǎn)對(duì)免疫系統(tǒng)的負(fù)調(diào)控來重新激活免疫系統(tǒng)識(shí)別并攻擊腫瘤這一證據(jù)。靶向PD-1、PD-L1和CTLA-4等檢查點(diǎn)的治療藥物已經(jīng)在多類腫瘤的臨床中顯示了顯著的結(jié)果并因此獲批治療多種惡性腫瘤。然后雖然這些檢查點(diǎn)抑制劑近來取得了成功，但是療效依然有限制，據(jù)估計(jì)大約60-70%的癌癥患者，包括黑色素瘤、腎細(xì)胞癌、結(jié)直腸癌、NSCLC、尿路上皮癌和HNSCC在內(nèi)，都無法對(duì)檢查點(diǎn)抑制劑單藥產(chǎn)生應(yīng)答，許多未產(chǎn)生應(yīng)答的患者攜帶的很多都是“冷腫瘤”，即沒有足夠的T細(xì)胞浸潤識(shí)別腫瘤；除此之外，還有的患者在接受這些檢查點(diǎn)抑制劑治療也會(huì)產(chǎn)生抵抗。因此這些療效的限制凸顯了在現(xiàn)有腫瘤免疫治療外，研究并鑒定出腫瘤免疫逃逸機(jī)制中的新靶點(diǎn)和新通路的重要性。

5 NC318的背景及相關(guān)數(shù)據(jù)

NC318是以高親和力、特異性結(jié)合人S15的單克隆抗體，我們?cè)谂R床前研究中發(fā)現(xiàn)阻斷S15可以提升免疫應(yīng)答并且在多種動(dòng)物模型中得到炎癥。我們相信NC318有助于通過靶向巨噬細(xì)胞或表達(dá)S15的腫瘤細(xì)胞來促進(jìn)抗腫瘤療效。我們擁有NC318排他性的全球權(quán)益。

5.1 S15背景

S15是一類屬于免疫球蛋白超家族中唾液酸結(jié)合免疫球蛋白樣凝集素(Siglec)家族的一員，通常表達(dá)在免疫系統(tǒng)中除了T細(xì)胞以外的其它多數(shù)白細(xì)胞上。Siglec能夠識(shí)別并結(jié)合哺乳動(dòng)物細(xì)胞表面的唾液酸從而影響免疫細(xì)胞的信號(hào)通路。多個(gè)Siglec家族成員可以幫助免疫細(xì)胞區(qū)分自我與非我成分，并調(diào)控免疫反應(yīng)。2015年陳列平博士團(tuán)隊(duì)用TCAA發(fā)現(xiàn)了S15的免疫抑制特性：S15通常表達(dá)在TME中有著高度免疫抑制性的腫瘤細(xì)胞以及M2型巨噬細(xì)胞上。

M2型巨噬細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞上的S15似乎通過結(jié)合T細(xì)胞上的受體(注：還未鑒定出)來抑制T細(xì)胞的增殖和功能，從而減弱抗腫瘤免疫效應(yīng)。有證據(jù)顯示，S15可能通過與髓系細(xì)胞的作用來促進(jìn)它們的增殖與分化，進(jìn)一步通過分泌IL-6、IL-1b和TNF-a等促腫瘤或免疫抑制類細(xì)胞因子來維持整個(gè)TME的免疫抑制。下圖顯示，不管是M2型巨噬細(xì)胞還是腫瘤細(xì)胞，只要表達(dá)S15，都會(huì)引起免疫抑制性TME，促進(jìn)腫瘤生長。

NC318的作用機(jī)制就是通過阻止S15引起的免疫抑制來促進(jìn)抗腫瘤活性。如下圖所示，通過靶向M2型巨噬細(xì)胞和S15+ 腫瘤，NC318的這種設(shè)計(jì)可以下調(diào)促腫瘤相關(guān)的炎癥因子、促進(jìn)T細(xì)胞增殖并恢復(fù)T細(xì)胞功能，從而減少并殺死腫瘤。

在臨床前研究中，我們發(fā)現(xiàn)S15表達(dá)在多類腫瘤的TME中的腫瘤細(xì)胞和M2巨噬細(xì)胞上，包括了肺癌、卵巢癌和黑色素瘤；相反正常組織中S15的表達(dá)極低。我們的分析結(jié)果顯示，在腫瘤上S15呈現(xiàn)出獨(dú)特的表達(dá)譜并且期功能完全獨(dú)立于PD-L1之外。左圖展示了在200多份NSCLC患者樣本中S15相對(duì)于PD-L1的表達(dá)情況，結(jié)果主要鑒定出3類群體：PD-L1- S15-、PD-L1+S15-和PD-L1-S15+，結(jié)果提示腫瘤細(xì)胞上S15的表達(dá)并不和PD-L1重疊。而在右邊的圖中，我們相信NC318會(huì)給PD-L1-S15+患者帶來新的治療選擇，這部分患者通常不會(huì)從anti-PD-1/PD-L1治療中獲益。這些結(jié)果與我們旨在為無法從現(xiàn)有療法中獲益的腫瘤患者開發(fā)新型藥物來恢復(fù)正常的免疫功能、提供區(qū)別于現(xiàn)有方案的有效治療的初衷是一致的。

5.2 S15靶點(diǎn)的驗(yàn)證

我們相信S15代表了一類治療癌癥的新靶點(diǎn)，因此在臨床前研究的小鼠模型中敲除了編碼S15的基因來評(píng)估S15被抑制后的影響。在這些研究中，我們發(fā)現(xiàn)：缺失了S15的小鼠總體上發(fā)育正常，提示S15的抑制并沒有引起對(duì)正常細(xì)胞的不良事件。隨后的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，相比野生型小鼠，敲除了S15的小鼠顯示了增強(qiáng)的抗原特異的T細(xì)胞活性，而僅僅條件性敲除髓源細(xì)胞上S15的小鼠也有著和完全敲除的小鼠類似的增強(qiáng)的抗原特異性的T細(xì)胞活性，提示巨噬細(xì)胞在S15介導(dǎo)的免疫抑制中的關(guān)鍵角色。同時(shí)相比野生型小鼠，完全敲除和條件性敲除的小鼠的抗原特異性T細(xì)胞有著顯著的升高并且保持更長的生存期。下圖是在完全敲除和條件性敲除的小鼠脾臟中發(fā)現(xiàn)了相比野生型顯著升高的抗原特異性T細(xì)胞(這里按OVA+ CD8+ T細(xì)胞占整個(gè)CD8+T細(xì)胞比值來測算)：20% vs <2%。這些結(jié)果都提示，S15在介導(dǎo)免疫抑制中起到了關(guān)鍵作用，而S15的缺失或者抑制可以恢復(fù)正常的免疫功能。

我們同樣評(píng)估了膠質(zhì)母細(xì)胞瘤模型的S15敲除小鼠相比野生型小鼠的腫瘤進(jìn)展情況：可以看出，敲除組的腫瘤進(jìn)展明顯延遲，相應(yīng)的在生存期有著顯著的延長。

為了研究那些對(duì)PD-1/PD-L1治療無應(yīng)答患者對(duì)S15抑制獲益的可能性，我們?cè)谂R床前實(shí)驗(yàn)中在B16.GMCSF黑色素瘤模型中評(píng)估S15敲除的結(jié)果。為了研究那些對(duì)PD-1/PD-L1治療無應(yīng)答患者對(duì)S15抑制獲益的可能性，我們?cè)谂R床前實(shí)驗(yàn)中在B16.GMCSF，這個(gè)被證明對(duì)anti-PD-1黑色素瘤模型中評(píng)估S15敲除的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)相比野生型小鼠，敲除了S15的小鼠有著更強(qiáng)的抗腫瘤效應(yīng)，因此總生存期也更長。這個(gè)研究提示NC318在對(duì)檢查點(diǎn)抑制劑未產(chǎn)生應(yīng)答的患者中可能有著治療的潛力。

5.3 1/2 期臨床數(shù)據(jù)

2018年10月，我們啟動(dòng)了NC318單藥治療晚期或轉(zhuǎn)移型實(shí)體瘤的1/2期臨床研究，這項(xiàng)FIH研究旨在評(píng)估NC318的安全性和可耐受下，確認(rèn)最大耐受劑量(MTD)、藥理學(xué)活性劑量(PAD)并檢測初步療效。開始時(shí)14天1個(gè)療程，療程內(nèi)每日接受NC318給藥，同時(shí)也會(huì)根據(jù)PK、PD、標(biāo)志物、安全性數(shù)據(jù)以及研究者反饋來調(diào)整不同劑量的給藥計(jì)劃。

該研究分成2部分，1期部分設(shè)計(jì)來劑量遞增和安全性擴(kuò)張，旨在確認(rèn)PAD和MTD，其中前者指引起最大生物學(xué)效應(yīng)的劑量，包括免疫活化標(biāo)志物的升高或者免疫抑制標(biāo)志物的降低，后者包括了給藥流程中的優(yōu)化劑量及可耐受劑量的最大給藥次數(shù)，我們預(yù)期這部分在19年4季度完成。截止至19年3月31日，10種不同腫瘤的21名患者按照8 mg、24 mg、80 mg和240 mg 4個(gè)劑量組接受給藥，如果這些劑量種沒有發(fā)現(xiàn)劑量相關(guān)毒性(DLT)，我們將會(huì)進(jìn)進(jìn)一步擴(kuò)展到400mg和800mg劑量給藥。目前NC318的可耐受性很好，沒有發(fā)現(xiàn)藥物相關(guān)的嚴(yán)重不良事件和劑量相關(guān)毒性。我們?cè)?/span>1例受試者的研究過程中，觀察到了可能是NC318相關(guān)的淀粉酶和脂肪酶瞬時(shí)的逐步升高，分別3級(jí)和4級(jí)，但在72小時(shí)內(nèi)停止任何輸液得以解決；其它的可能和NC318相關(guān)的安全性事件基本都是研究者評(píng)估的瞬時(shí)無癥狀檢查結(jié)果或1級(jí)AE。療效方面，截止至19年3月31日，在13名至少接受過1次給藥的患者中，1例確認(rèn)PR，另6例確認(rèn)SD，6例PD，確認(rèn)為PR的患者來自8mg劑量組、目前依舊在組，而6例確認(rèn)SD的患者分別來自8mg和80mg劑量組、其中4人依舊在組。此外還有8名患者在組，只是在截止日前還未接受過影像學(xué)評(píng)估。2期研究部分計(jì)劃檢測相關(guān)的療效指標(biāo)以及各個(gè)瘤種的應(yīng)答率。在這部分，我們將入組那些S15表達(dá)升高的腫瘤類型，包括卵巢癌、NSCLC和HSNCC或是其它PD-L1低表達(dá)的惡性腫瘤，預(yù)期于20年4季度結(jié)束這部分研究。

我們根據(jù)穩(wěn)健的生物標(biāo)志物策略來設(shè)計(jì)正在開展的臨床，通過藥效標(biāo)志物的幫助來評(píng)估NC318的臨床活性。在目前的研究中，我們會(huì)提取患者在治療前和治療中的外周血和全血樣本，用于免疫細(xì)胞類群的分析和界定，同樣也會(huì)分析T細(xì)胞受體克隆來檢測治療引起的抗原特異性T細(xì)胞亞群克隆擴(kuò)增的證據(jù)?；谶@些新數(shù)據(jù)，我們會(huì)開展與研究目標(biāo)相關(guān)的進(jìn)一步分析，包括細(xì)胞因子的流式分析。而在2期部分，除了NC318第1次給藥前，我們也會(huì)在第3次給藥完成后至少完成1次腫瘤活檢樣本的取樣，用來研究NC318治療相關(guān)的免疫反應(yīng)或抵抗。我們還會(huì)通過組織病理、免疫組化或其它探索性方法來檢測組織，評(píng)估炎癥與效應(yīng)T細(xì)胞群體的標(biāo)志物以及可能和NC318治療的安全性、應(yīng)答或抵抗相關(guān)的生長、信號(hào)、凋亡及其它類似的標(biāo)志物。我們相信這樣的生物標(biāo)志物策略可以更好的監(jiān)測臨床試驗(yàn)并且有助于形成未來的臨床研究甚至臨床實(shí)踐(如果批準(zhǔn))中的治療策略。

5.4 S15+腫瘤模型中的臨床前數(shù)據(jù)

常用的同系小鼠模型的腫瘤細(xì)胞通常并不表達(dá)S15，為了研究靶向S15的抗體的療效，我們制備了腫瘤細(xì)胞上表達(dá)S15的小鼠模型：首先在體外將小鼠骨髓細(xì)胞定向分化成S15陽性的M2型巨噬細(xì)胞，隨后種植到S15陰性的CT26結(jié)腸癌小鼠模型體內(nèi)。這些小鼠分別用靶向S15的抗體5G12和對(duì)照處理，其中5G12也就是NC318的親本鼠源抗體，二者整體功能上相似。在多個(gè)臨床前研究中，我們?cè)u(píng)估了5G12的安全性和有效性，發(fā)現(xiàn)5G12在阻斷S12信號(hào)后能夠恢復(fù)抗腫瘤免疫功能。下圖顯示，接受5G12處理的小鼠相比對(duì)照，腫瘤更小，同時(shí)生存期也延長。

我們也同樣制備了表面表達(dá)S13的腫瘤細(xì)胞株：在S15陽性的小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞株中，我們觀察到相比對(duì)照組，接受5G12處理28天后的小鼠有著更少的肺結(jié)節(jié)，說明5G12延遲了腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移。

通過體外實(shí)驗(yàn)，我們已經(jīng)知道了S15可以引起IL-1b、IL-6和TNF-a等促炎癥和促腫瘤生長的細(xì)胞因子的升高。人外周血單核細(xì)胞(PBMC)與S15共同孵育時(shí)，能夠檢測到促炎和促腫瘤因子的升高，提示了免疫抑制的微環(huán)境。但是下圖所示，當(dāng)PBMC與S15蛋白和5G12或NC318共孵育時(shí)，促炎和促腫瘤因子的量相比PBMC與S15蛋白和對(duì)照抗體共孵育下降；同時(shí)5G12和NC318也提升了T細(xì)胞的增殖和產(chǎn)生INF-γ的能力。這些數(shù)據(jù)提示，5G12和NC318有著扭轉(zhuǎn)S15介導(dǎo)的免疫抑制的能力。

6 NC410的背景及臨床前研究

NC410是LAIR-2的融合蛋白，以天然可溶性形式存在，通過與LAIR-1的競爭阻斷LAIR-1介導(dǎo)的免疫抑制。多個(gè)臨床前研究的結(jié)論也支持我們關(guān)于消除或阻斷LAIR-1的結(jié)合可以恢復(fù)多種免疫細(xì)胞的正常功能的認(rèn)識(shí)。我們的轉(zhuǎn)化研究也顯示，NC410可以阻斷LAIR-1與結(jié)合伴侶的相互作用來促進(jìn)T細(xì)胞和DC細(xì)胞功能來恢復(fù)正常的抗腫瘤免疫活性。我們相信NC410有潛力惠及那些無法從現(xiàn)有治療中獲益的患者，這與我們的策略也是一致的。我們同樣也擁有NC410的排他性的全球權(quán)益。

6.1 腫瘤中LAIR通路的背景

LAIR-1是表達(dá)的T細(xì)胞和包括單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞等其它免疫細(xì)胞亞型上的共抑制性受體，其結(jié)合伴侶包括特定的膠原蛋白和補(bǔ)體1q(C1q)。

正常條件下，膠原蛋白形成的骨架可以為組織提供支撐和保護(hù)，而C1q作為天然免疫的成分可以保護(hù)宿主免于感染或入侵。而在病理?xiàng)l件下，膠原蛋白和C1q通常受到上調(diào)后高表達(dá)，比如在TME及腫瘤位點(diǎn)附近的免疫細(xì)胞器，這些否是對(duì)腫瘤產(chǎn)生免疫反應(yīng)的重要位點(diǎn)；然后LAIR-1結(jié)合膠原蛋白或C1q后通常會(huì)引起免疫抑制。我們的臨床前研究顯示，LAIR-2也能和LAIR-1結(jié)合包括彈性蛋白和C1q在內(nèi)的同樣配體，但這是一個(gè)分泌型蛋白，不同于LAIR-2這類膜蛋白，另外LAIR-2也能夠以比LAIR-1更高的親和力去結(jié)合那些配體的相同區(qū)域。由于LAIR-2結(jié)合這些受體后并不會(huì)引起免疫抑制，因此LAIR-2可以作為LAIR-1的有效誘餌蛋白。

在TME中的極端條件下，膠原蛋白和C1q通常以膜蛋白的形式過表達(dá)在腫瘤細(xì)胞上或腫瘤細(xì)胞周圍的細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)，同時(shí)天然的LAIR-2的水平不足以完全結(jié)合表達(dá)升高的膠原蛋白和C1q，使得LAIR-1結(jié)合的升高，從而引起免疫抑制、腫瘤的免疫逃逸和生長。

NC410是通過模擬天然LAIR-2的誘餌效應(yīng)、開發(fā)來阻斷LAIR-1介導(dǎo)的免疫抑制的全新免疫治療蛋白藥物。而用NC410治療就是旨在利用體內(nèi)天然的LAIR-2調(diào)節(jié)系統(tǒng)的優(yōu)勢，將人體免疫功能保持在正常非病理狀態(tài)之下。

NC410在作用機(jī)制上阻止了LAIR-1結(jié)合配體后的免疫抑制并促進(jìn)抗腫瘤免疫活性，下圖中，當(dāng)TME中存在LAIR-2和NC410時(shí)，會(huì)以比LAIR-1更高的親和力結(jié)合膠原蛋白和C1q，避免了LAIR-1結(jié)合后引起的免疫抑制效應(yīng)，促進(jìn)了T細(xì)胞和DC的功能并從而恢復(fù)了抗腫瘤免疫活性。

6.2 臨床前數(shù)據(jù)

我們?cè)谠诙鄠€(gè)模型中開展了評(píng)估NC410活性的臨床前研究，結(jié)果證實(shí)了通過消除或阻斷LAR-1結(jié)合膠原蛋白或C1q可以在恢復(fù)T細(xì)胞和髓源細(xì)胞在內(nèi)的多類細(xì)胞的正常免疫功能，從而激活T細(xì)胞和抗腫瘤免疫。

我們?cè)隗w外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，用NC410阻斷LAIR-1結(jié)合膠原蛋白或C1q，可以扭轉(zhuǎn)免疫抑制并恢復(fù)PBMC(含T細(xì)胞)和髓源細(xì)胞在內(nèi)的免疫細(xì)胞的正常功能。我們?cè)?/span>20 μg/mL膠原蛋白基礎(chǔ)上分別加 0 μg/mL、10 μg/mL和100 μg/mL NC410和PBMC混合孵育，另外也在10 μg/mLC1q基礎(chǔ)上分別加 0 μg/mL、10 μg/mL和100 μg/mL NC410和髓源細(xì)胞混合孵育。結(jié)果如下圖，NC410在高水平膠原蛋白或C1q存在下能以劑量依賴的形式促進(jìn)PBMC中免疫細(xì)胞或髓源細(xì)胞的活化。

在另外的臨床前細(xì)胞研究中，我們發(fā)現(xiàn)NC410能促進(jìn)細(xì)胞因子IL-2和TNFα的升高，預(yù)示著免疫功能得到提升；此外同時(shí)將NC410和人T細(xì)胞注射到免疫缺陷小鼠體內(nèi)可以提升CD4+和CD8+ T細(xì)胞含量的升高。

而在其它的腫瘤模型的研究中，我們發(fā)現(xiàn)阻斷LAIR-1介導(dǎo)的免疫抑制可以延長生存。此外，我們構(gòu)建了小鼠模型監(jiān)測體內(nèi)抗原特異性反應(yīng)的定位，發(fā)現(xiàn)NC410的抗腫瘤活性通常與TME中局部升高的抗原特異性T細(xì)胞。在抗原特異性腫瘤模型的EL6淋巴瘤小鼠中，我們監(jiān)測體重隨日期的變化作為腫瘤生長的替代指標(biāo)，如圖所示，NC410處理后的小鼠攜帶了更小的腫瘤，提示NC410有著潛在的抗腫瘤活性。

我們同樣檢測了T細(xì)胞對(duì)雞卵清白蛋白的特異性，結(jié)果是相比對(duì)照組，NC410處理的小鼠分別在脾臟和淋巴結(jié)中觀察到特異性T細(xì)胞全局性和局部性占比的升高，我們相信這些數(shù)據(jù)能夠支持TME中及周邊的免疫應(yīng)答。

另外，當(dāng)PBMC被移植到P815肥大細(xì)胞腫瘤小鼠模型中時(shí)，我們觀察到NC410在體內(nèi)引起了T細(xì)胞的升高，并且這種升高與腫瘤生長的延遲有相關(guān)性。下圖可以看出，在第13天時(shí)NC410以劑量依賴的形式引起了CD8+T細(xì)胞數(shù)目的升高并與腫瘤體積的縮小一致。

6.3 NC410的臨床開發(fā)計(jì)劃

我們和其它研究者通過分析基因組和蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)LAIR-1的表達(dá)水平在包括腎癌、結(jié)直腸癌、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、肺癌、尿路上皮癌和卵巢癌等多類癌癥中與生存率負(fù)相關(guān)，這些分析結(jié)果支持NC410靶向治療上述適應(yīng)癥的可行性。我們正在對(duì)來自不同實(shí)體瘤的樣本開展擴(kuò)大化的篩選工作，鑒定出在癌細(xì)胞或者免疫浸潤細(xì)胞表面表達(dá)LAIR-1的腫瘤。來指導(dǎo)患者的最終篩選進(jìn)行人體臨床研究。目前我們正在進(jìn)行支持IND申報(bào)的工作并期望在20年1季度遞交IND并啟動(dòng)在晚期或轉(zhuǎn)移型實(shí)體瘤的1/2期研究。

7 其它在研項(xiàng)目

除了NC318和NC410之外，我們還在進(jìn)行其它潛在的新型免疫調(diào)節(jié)藥物的臨床前評(píng)估。其中有一個(gè)抗體靶向了B7家族中一個(gè)新成員，在臨床前研究中，這個(gè)抗體在體內(nèi)顯示了高度可重復(fù)的、強(qiáng)效的抗腫瘤活性，可能參與了TME中重要的免疫調(diào)節(jié)通路，能與NC318和NC410形成互補(bǔ)。該抗體的靶點(diǎn)在腫瘤細(xì)胞上和S15、PD-L1都沒有重合，這也和我們的宗旨：專注于對(duì)現(xiàn)有療法不應(yīng)答或進(jìn)展亦或是患現(xiàn)有療法無法惠及的腫瘤的患者相一致。