一、試劑 1、PBS:0.01M磷酸鹽緩沖液 (pH7.4) 取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4·12H2O 3.63g或Na2HPO41.44g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml雙蒸水中,用鹽酸調pH值至7.4,加水定容至1L,常溫保存?zhèn)溆谩?/span> 2、固定液:4%多聚甲醛磷酸鹽緩沖液(pH7.4) (1)0.1M磷酸鹽緩沖液:取A液400ml與B液80ml混合后,調pH于7.4,再定容至500ml A液:0.1mol/L Na2HPO4(Na2HPO4·12H2O 35.8g加水定容至1000ml) B液:0.1mol/L NaH2PO4(NaH2PO4·2H2O 15.6g加水定容至1000ml) (2)4%多聚甲醛磷酸鹽緩沖液:取20g多聚甲醛溶于500ml 0.1M磷酸鹽緩沖液中,加熱并攪拌約2-3h后溶解 3、梯度酒精:100%、95%、80%、70%、50% 4、二甲苯 5、包埋劑:石蠟 6、防脫劑:多聚賴氨酸(PLL5g+蒸餾水1000ml)、APES(3-氨丙基-3-乙氧基甲硅烷) 7、抗原修復液:0.01M枸櫞酸緩沖液(PH 6.0),或0.01M檸檬酸鹽緩沖液(pH6.0) 取A液8ml與B液42ml混合后加水至400ml,調pH于6.0,再定容至500ml A液:0.1mol/L 檸檬酸(C6H8O7·H2O 21.01g加水定容至1000ml) B液:0.1mol/L 檸檬酸鈉(Na3C6H5O7·2H2O 29.41g加水定容至1000ml) 8、SP超敏免疫組化試劑盒(包括試劑A、B、C、D) 試劑A -- 阻斷劑:3%甲醇-H2O2溶液(30%H2O2和80%甲醇溶液配制) 試劑B -- 封閉液:正常非免疫動物血清 試劑C -- 二抗(辣根過氧化物酶標記) 試劑D -- SP(鏈霉親和素-過氧化物酶) 9、一抗(特異結合底物) 10、顯色劑:DAB試劑盒、蘇木素染液 11、封固液:中性樹膠 二、設備 恒溫箱(水浴鍋)、冰箱、通風櫥、切片機、黏附載玻片和蓋玻片、高壓鍋或微波爐、染色缸、顯微鏡、計算機圖像分析系統(tǒng)。 衡道醫(yī)學 知勢而為 成人達己 |
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