一区二区三区日韩精品-日韩经典一区二区三区-五月激情综合丁香婷婷-欧美精品中文字幕专区

分享

解開分泌型熒光素酶的神秘面紗

 艾美捷科技 2019-12-17

作為報告基因,熒光蛋白(如綠色熒光蛋白(GFP)及其變體紅色熒光蛋白(RFP)和黃色熒光蛋白(YFP)或者生物熒光素酶(如螢火蟲熒光素酶(Firefly luciferase,F(xiàn)luc)海參熒光素酶(Renilla luciferase,Rluc))已成為研究基因調控、抗*藥*活性考察、基因突變分析、生物成像、DNA雜交分析及實時監(jiān)測腫瘤發(fā)生*展情況等生物過程的潛在有效分析工具。


但GFP等熒光蛋白的靈敏性相比于熒光素酶要低很多,而且GFP在細胞內容易累積,使其不適合實時監(jiān)測?,F(xiàn)有的生物熒光素酶中,F(xiàn)luc發(fā)光時需要輔助因子ATP和Mg2+,Rluc雖然不依賴于ATP和Mg2+等輔助因子,但光子產量較低,另外Fluc和Rluc均不能分泌表達,監(jiān)測酶活性時需要裂解細胞,操作繁瑣且不能實現(xiàn)對實驗現(xiàn)象的連續(xù)觀察。
近年,發(fā)現(xiàn)的一種來源于海洋橈腳類動物Gaussia princeps的Gaussia 分泌型熒光素酶是體內已知*小的可自然分泌的熒光素酶。因其可分泌、易于監(jiān)測、靈敏度過、半衰期短、可進行活細胞或生物體實時監(jiān)測等特性,在研究蛋白質-蛋白質相互作用、蛋白定位、小干擾RNA(siRNA)沉默技術、腫瘤模型藥*治*評價、監(jiān)測啟動子活性、實時監(jiān)測腫瘤發(fā)生*展情況和高通量藥*篩選等中得到廣泛應用。通過報告基因載體,Gaussia可用于哺乳動物細胞表達。表達后的Gaussia為單條肽鏈的單體酶,其分子較?。?85aa),且具有分泌性信號肽,因此可通過內質網分泌到細胞外。該熒光素梅催化底物腔腸素的氧化反應并且發(fā)光(480nm),該反應無需ATP參與。

分泌型雙熒光素酶檢測試劑盒,貨號:LF031
Secrete-Pair? Dual Luminescence Assay Kit用于檢測雙報告系統(tǒng)中Gaussia Luciferase (GLuc)和Secreted Alkaline Phosphatase (SEAP)的活性。GLuc和SEAP都是分泌型蛋白,無需裂解細胞就能從培養(yǎng)基中獲得實驗樣本。
分泌型單熒光素酶檢測試劑盒,貨號:LF061
試劑盒提供兩種用于Gluc分析的緩沖液。Buffer GL-S含有穩(wěn)定劑,彌補了Gluc信號快速衰退的缺點,可用于穩(wěn)定活性分析。Buffer GL-H適用于檢測低表達量的Gluc活性,可以提供更高的靈敏度。
熒光素酶報告基因載體,貨號:ZX101

與其他熒光素酶相比,使用Gaussia 作為報告基因有更多的優(yōu)勢:
1. 分泌型熒光素酶,可直接取上清檢測,無須裂解細胞;
2. 發(fā)光強度高,是其它熒光素酶的1千倍;
3. 反應無須ATP,不受ATP影響;
4. 穩(wěn)定性高,對溫度、PH值等耐受性強。


分泌型堿性磷酸酶(secreted alkaline phos-phatase,SEAP)是人胎盤堿性磷酸酶的突變體,*大特點是能由表達細胞分泌到細胞外,檢測時可在不破壞細胞的情況下,任意時間點取細胞培養(yǎng)上清液進行重復、動態(tài)的檢測,常作為熒光素酶檢測過程中信號標準化的內參。
GeneCopoeia 提供預制和定制的 GLuc-ON? 啟動子克隆,包括單報告基因載體系統(tǒng)和雙報告基因載體系統(tǒng)。單報告基因載體系統(tǒng)以 Gluc 作為啟動子的報告基因;雙報告基因載體系統(tǒng)以 Gluc 作為啟動子報告基因,以SEAP作為信號標準化的內參,可在活細胞中對超過 20,000 種人和 18,000 種小鼠啟動子進行實時活性分析。

    本站是提供個人知識管理的網絡存儲空間,所有內容均由用戶發(fā)布,不代表本站觀點。請注意甄別內容中的聯(lián)系方式、誘導購買等信息,謹防詐騙。如發(fā)現(xiàn)有害或侵權內容,請點擊一鍵舉報。
    轉藏 分享 獻花(0

    0條評論

    發(fā)表

    請遵守用戶 評論公約

    類似文章 更多

    成人日韩视频中文字幕| 久久久精品区二区三区| 亚洲精品一二三区不卡| 高清一区二区三区四区五区 | 午夜国产福利在线播放| 欧美av人人妻av人人爽蜜桃| 国产原创中文av在线播放 | 日本美国三级黄色aa| 国产偷拍精品在线视频| 日韩一本不卡在线观看| 青青操视频在线观看国产| 免费观看一区二区三区黄片| 久久精品久久精品中文字幕| 欧美午夜国产在线观看| 美女激情免费在线观看| 国产永久免费高清在线精品| 欧美人妻少妇精品久久性色| 国产精品尹人香蕉综合网| 午夜精品一区二区三区国产| 欧美一二三区高清不卡| 蜜桃传媒视频麻豆第一区| 好吊妞视频这里有精品| 亚洲精品中文字幕熟女| 美女被后入福利在线观看| 久久精品亚洲情色欧美| 亚洲欧美国产网爆精品| 真实偷拍一区二区免费视频| 久久老熟女一区二区三区福利| 香蕉网尹人综合在线观看| 亚洲欧美日韩在线看片| 国产亚洲精品岁国产微拍精品| 亚洲第一视频少妇人妻系列| 五月婷婷综合缴情六月| 国产内射一级一片内射高清视频| 亚洲av熟女一区二区三区蜜桃 | 日韩人妻少妇一区二区| 成人精品日韩专区在线观看| 色婷婷激情五月天丁香| 精品女同在线一区二区| 欧美精品一区二区水蜜桃| 久久精品偷拍视频观看|