目前，國(guó)內(nèi)羅漢果Siraitia grosvenorii的繁殖大部分采取傳統(tǒng)的壓蔓與種薯種植等方法，但這些方法存在產(chǎn)量低，毒素積累多，退化快等缺點(diǎn)［1-4］。國(guó)內(nèi)對(duì)羅漢果組織培養(yǎng)的研究大部分是對(duì)羅漢果培養(yǎng)基的整體把握［2-5］，深入研究羅漢果快繁生根培養(yǎng)基的較少。對(duì)羅漢果組織培養(yǎng)的結(jié)果表明，吲哚丁酸（IBA）與6-芐氨基腺嘌呤（6-BA）配合使用對(duì)羅漢果不定芽的分化有明顯的促進(jìn)作用，IBA與6-BA等也是對(duì)羅漢果的莖段培養(yǎng)作用最大的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑［5］。對(duì)羅漢果生根培養(yǎng)的研究主要集中于各種不同激素濃度配比和培養(yǎng)基成分的影響。相關(guān)研究結(jié)果表明，植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑中萘乙酸（NAA）的處理相對(duì)于IBA的處理，根系分化早，根粗，盤根多，活性炭對(duì)羅漢果試管苗的增殖分化無(wú)明顯影響，但對(duì)試管苗的壯苗生長(zhǎng)及緩解玻璃化有較大促進(jìn)作用［6］。在研究青皮果系列羅漢果新品種 “永青1號(hào)”培養(yǎng)基和活性炭對(duì)組培苗生根壯苗的影響中，各因素影響程度從大到小依次為：培養(yǎng)基＞活性炭＞NAA＞蔗糖［7］。然而，對(duì)于研究不同活性炭種類和濃度對(duì)羅漢果快繁生根的影響較少。因此，本試驗(yàn)探究羅漢果快繁生根的最佳培養(yǎng)基，以及不同類型和濃度的活性炭對(duì)羅漢果快繁生根的影響；對(duì)比羅漢果根的分化時(shí)間、平均根長(zhǎng)、生根率等指標(biāo)，確定最合理的羅漢果快繁生根的處理方法。

1 材料與方法

1.1 材料

以羅漢果無(wú)根試管苗為培養(yǎng)材料，苗高均為2.5 cm左右，發(fā)育狀況良好，均帶一個(gè)節(jié)，葉色正常。培養(yǎng)基為青島高科園海博生物技術(shù)有限公司所生產(chǎn)的B5培養(yǎng)基，北京康倍斯科技有限公司生產(chǎn)的MS培養(yǎng)基。

1.2 無(wú)菌苗的獲得

將羅漢果的幼莖先用流動(dòng)的自來(lái)水沖洗30 min，將洗凈的羅漢果幼莖拿到超凈工作臺(tái)上消毒接種。將幼莖放到大燒杯中，加入75%酒精消毒10 s并不斷攪動(dòng)，將酒精倒掉，再加入0.1%升汞溶液消毒10 min且不斷攪動(dòng)，然后用無(wú)菌水沖洗3次后將幼莖取出。在接種盤上將其剪切成僅帶一個(gè)節(jié)，約2.5 cm長(zhǎng)的莖段，接種入 MS＋I(xiàn)BA 0.5 mg／L＋6-BA 1.0 mg／L＋NAA 1.0 mg／L的培養(yǎng)基上，每個(gè)培養(yǎng)瓶接幼莖段3個(gè)，培養(yǎng)3周左右，可獲得長(zhǎng)有5～6片真葉的羅漢果無(wú)菌苗，以新長(zhǎng)出的幼莖作為供試材料［8］。

1.3 誘導(dǎo)分化生根培養(yǎng)基的配制和培養(yǎng)

誘導(dǎo)生根基礎(chǔ)培養(yǎng)基為 MS、1／2MS、B5、1／2B5，分別添加IBA 0.5 mg／L，6-BA 1.0 mg／L，NAA 1.0 mg／L，蔗糖30 g／L，瓊脂5 g／L，直徑為2.0 mm左右的粗顆?；蚍勰罨钚蕴浚钚蕴繚舛仍O(shè)置為0、0.5、1.0和1.5 g／L，p H 值為5.8～6.0，分裝在培養(yǎng)瓶中，每個(gè)培養(yǎng)瓶培養(yǎng)基50 m L高壓蒸汽滅菌，將預(yù)處理的幼莖分別接入不同的培養(yǎng)基中，每瓶接2個(gè)莖段，不同變量重復(fù)5次，即每個(gè)變量的植株共10株。溫度27℃，光照強(qiáng)度2 500 Lx，光照時(shí)間12 h／d條件下培養(yǎng)30 d［6］。

1.4 觀察記錄統(tǒng)計(jì)結(jié)果

每天觀察不同處理羅漢果無(wú)菌苗生根情況，以眼可辨認(rèn)的根為準(zhǔn)，并且記錄最早生根時(shí)間、生根數(shù)量。30 d后，測(cè)定根長(zhǎng)，并且計(jì)算生根率和根長(zhǎng)，生根率（%）＝生根植株數(shù)／總植株數(shù)×100，平均根長(zhǎng)＝（所有根長(zhǎng)度和／生根數(shù)）［9］。數(shù)據(jù)利用DPS數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行LSD差異性分析。

秦明月啊一聲，心想羅伽在搞什么名堂？口中忙解釋說(shuō)：“沒(méi)有啊，我真不知道這事，盧局你看，現(xiàn)在事情這么多，我哪有什么心情去搞什么聚會(huì)啊。”

2 結(jié)果與分析

2.1 基礎(chǔ)培養(yǎng)基對(duì)生根的影響

不添加活性炭的情況下，培養(yǎng)30 d后，MS、1／2MS、B5、1／2B5等培養(yǎng)基的羅漢果莖段生根情況見(jiàn)表1。最早生根的為1／2MS培養(yǎng)基，接種后5 d就開(kāi)始生根，但生根率不高，培養(yǎng)30 d生根率為50%；B5培養(yǎng)基中生根率最高，達(dá)到60%，且生根數(shù)量也最多，平均根長(zhǎng)最長(zhǎng)（p＜0.05）。因此，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，對(duì)羅漢果莖段生根最有利的為B5培養(yǎng)基。

第三、加快推進(jìn)社會(huì)體育改革，構(gòu)建社區(qū)體育發(fā)展機(jī)制。經(jīng)過(guò)十幾年體育改革發(fā)展，我國(guó)體育社會(huì)化進(jìn)度在加快，體育體制開(kāi)始分化，社會(huì)普及程度較高的足球、籃球、排球等項(xiàng)目實(shí)現(xiàn)職業(yè)化發(fā)展。計(jì)劃經(jīng)濟(jì)體制下的“單位體育”逐漸向社區(qū)體育轉(zhuǎn)變，體育社團(tuán)、體育協(xié)會(huì)、體育俱樂(lè)部等體育社會(huì)組織的發(fā)展，推動(dòng)社區(qū)體育發(fā)展，社區(qū)體育成為全民健身運(yùn)動(dòng)發(fā)展基本載體。

表1 無(wú)活性炭不同培養(yǎng)基羅漢果生根比較

注：表中同列數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示差異顯著（p＜0.05）。表2和表3同。

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2.2 添加粗活性炭對(duì)生根的影響

試驗(yàn)結(jié)果看出，添加粗活性炭0.5 g／L，不同培養(yǎng)基中羅漢果生根率均有提高；其中生根率最高的為B5培養(yǎng)基，生根率為90%，且生根率和生根數(shù)量與無(wú)活性炭處理差異極顯著（p＜0.01）。培養(yǎng)基中添加粗活性炭1.0 g／L，生根率最高的為B5培養(yǎng)基，最終生根率為100%，生根數(shù)量為24條，顯著（p＜0.05）高于其他培養(yǎng)基。添加粗活性炭1.5 g／L，4種培養(yǎng)基中生根率都出現(xiàn)了下降趨勢(shì)，可能高濃度的活性炭限制了植株對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，但B5培養(yǎng)基中生根率顯著（p＜0.05）高于其他培養(yǎng)基，除了 MS培養(yǎng)基，生根數(shù)量和平均根長(zhǎng)與其他培養(yǎng)基差異不明顯（p＞0.05）（見(jiàn)表2）。與其他的處理比較而言，在B5培養(yǎng)基中添加粗活性炭1.0 g／L適宜作為羅漢果莖段生根培養(yǎng)基。

2.3 添加細(xì)活性炭對(duì)生根的影響

試驗(yàn)結(jié)果看出，添加細(xì)活性炭0.5 g／L后，供試4種培養(yǎng)基中生根率都有提高，與不添加活性炭處理有顯著差異（p＜0.05）；最高的為B5培養(yǎng)基，30 d以后最終生根率為90%，生根數(shù)量為29條，平均根長(zhǎng)為12 mm。添加細(xì)活性炭1.0 g／L后，4種培養(yǎng)基相對(duì)于添加0.5 g／L細(xì)活性炭生根率變化不明顯（p＞0.05），但平均根長(zhǎng)增加明顯；生根率最高的仍為B5培養(yǎng)基，最終生根率為100%，生根數(shù)為26條，平均根長(zhǎng)為20 mm。添加細(xì)活性炭1.5 g／L后，生根率最高的為MS培養(yǎng)基，最終生根率為80%，生根數(shù)為23條，平均根長(zhǎng)為23 mm；生根數(shù)和平均根長(zhǎng)與1／2 MS培養(yǎng)基和B5培養(yǎng)基無(wú)顯著性差異（p＞0.05）（見(jiàn)表3）。綜合比較來(lái)看，培養(yǎng)基中添加1.0 g／L細(xì)活性炭后，B5培養(yǎng)基適宜作為羅漢果莖段生根培養(yǎng)基。

2.3 遠(yuǎn)期療效 術(shù)后6個(gè)月，觀察組患者治療總有效率為93.8%遠(yuǎn)高于對(duì)照組的72.9%（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表2 不同培養(yǎng)基添加不同濃度粗活性炭對(duì)羅漢果生根的影響

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表3 不同培養(yǎng)基添加不同濃度細(xì)活性炭對(duì)羅漢果生根的影響

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3 結(jié)論與結(jié)論

試驗(yàn)結(jié)果表明，粗、細(xì)活性炭對(duì)羅漢果生根均有促進(jìn)作用，但添加粗活性炭的培養(yǎng)基較添加細(xì)活性炭誘導(dǎo)的根更粗，添加細(xì)活性炭的培養(yǎng)基誘導(dǎo)的根較粗活性炭處理更長(zhǎng)，根盤更大。生根率最高的培養(yǎng)基為細(xì)活性炭1.0 g／L＋B5培養(yǎng)基和粗活性炭1.0 g／L＋B5培養(yǎng)基，其最終生根率均為100%；生根數(shù)量最多的為細(xì)活性炭0.5 g／L＋B5培養(yǎng)基，最終生根數(shù)為29條，細(xì)活性炭1.0 g／L＋B5培養(yǎng)基，最終生根數(shù)為26條，兩者差異不明顯（p＞0.05）；最終平均根長(zhǎng)最長(zhǎng)的為細(xì)活性炭1.5 g／L＋MS培養(yǎng)基和細(xì)活性炭1.0 g／L＋1／2MS培養(yǎng)基，均為23 mm，細(xì)活性炭1.5 g／L＋B5培養(yǎng)基的根長(zhǎng)次之，為22 mm，三者差異不顯著（p＞0.05）。綜合來(lái)看，適宜的生根培養(yǎng)基為IBA 0.5 mg／L＋6-BA 1.0 mg／L＋NAA 1.0 mg／L＋蔗糖30 g／L＋瓊脂5 g／L＋細(xì)活性炭1.0 g／L＋B5培養(yǎng)基。

國(guó)內(nèi)植物組織培養(yǎng)技術(shù)方面的研究已較為全面，從原材料的選擇到各種培養(yǎng)基配方均有較為詳細(xì)的研究［1-2］，對(duì)羅漢果組織培養(yǎng)的研究大部分是對(duì)培養(yǎng)基的整體把握，深入研究羅漢果快繁生根培養(yǎng)基的較少。本試驗(yàn)比較不同培養(yǎng)基與不同活性炭濃度配比對(duì)羅漢果生根的影響，找出適宜的培養(yǎng)基條件，為羅漢果的生根培養(yǎng)基配方更合理更科學(xué)提供了一定的參考。

參 考 文 獻(xiàn)

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