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天吶!過濾與HPLC還有這關(guān)系?

 船長ytvyfxoqu2 2018-12-28

在日常生活中你是不是經(jīng)常看到這些。。。

生活用水的凈水器

早起的純純的豆?jié){

最美的男醫(yī)生(身上的過濾器)

等等如此這些

那么

今天,咱們分享的主題就是膜分離


膜分離其主要分類有反滲透、微濾、超濾、納濾擴(kuò)散滲析、電滲析、氣體分離、滲透蒸發(fā)、控制釋放等。

通俗點(diǎn)可以稱之為過濾


最近總有實(shí)驗(yàn)員跟老趙頭抱怨。。。


實(shí)驗(yàn)猿:最近很衰,液相泵柱塞密封漏了、單向閥堵了、自動(dòng)進(jìn)樣器針座堵了&針座密封漏了、柱壓飆升了、檢測器流通池爆了。。。

老趙頭:可憐的娃,為嘛受傷的總是你。。。

你的實(shí)驗(yàn)缺個(gè)很重要的步驟,你缺一樣神器!

實(shí)驗(yàn)猿:長生晷?山河錐?功德筆?還是鎮(zhèn)魂燈?

老趙頭:NO NO NO 不是這些圣器,而是過濾神器。你的流動(dòng)相過濾了嗎?你的樣品離心過濾了嗎?

實(shí)驗(yàn)猿:沒有啊,用啥過濾???

老趙頭:你不衰,天理難容?。?!

來老趙頭給你科普下:

膜分離技術(shù)是1960年前后開發(fā)、20世紀(jì)70年代開始實(shí)用化的。隨著其用途不斷擴(kuò)大,近年來已迅速發(fā)展成為大型化的分離裝置,廣泛用于海水淡化、潔凈水、純水和超純水制造、廢水處理等眾多領(lǐng)域(咱們在《唯水機(jī)與女子難養(yǎng)也》中也提到過多種膜分離技術(shù))。膜分離是利用固膜或液膜的選擇性滲透作用而分離氣體或液體混合物的一種方法。


固膜分離有超濾、微孔過濾、反滲透、氣體滲透分離等。液膜分離則往往是模擬生物膜的結(jié)構(gòu)和功能。膜分離簡單的說就是篩分,即利用膜表面孔的機(jī)械篩分原理,將不同大小的物質(zhì)分離開,達(dá)到分離、純化、濃縮的目的。

那么,跟我們的液相實(shí)驗(yàn)相關(guān)的膜分離在流動(dòng)相、過濾器、濾膜材質(zhì)的選取上又有哪些要求呢?


什么樣的溶劑才能進(jìn)液相系統(tǒng)?

下圖是老趙頭在Thermo  U3000系列HPLC泵模塊說明書中摘錄的關(guān)于流動(dòng)相的要求,其他品牌也液相要求也是一樣的。


那問題來了HPLC級(jí)別的溶劑是啥樣的呢?

液相色譜儀中的過濾組件都以什么?

不同品牌含有的過濾組件不同。以下是常見的過濾組件:

溶劑吸濾頭


              

在線過濾器


過濾白頭


混合器過濾片


可選配過濾芯


液相色譜儀中各種堵或者漏的問題很大一部分原因是由于顆粒雜質(zhì)導(dǎo)致的,因此對進(jìn)入液相色譜儀系統(tǒng)的所有溶劑和樣品進(jìn)行過濾是非常必要的。


那么問題又來了:

很多時(shí)候我們是“只買貴的不買對的亦或是一味追求價(jià)格低廉”,如何選擇對的濾膜呢?往下看。


濾膜的材質(zhì)種類如何選擇?

根據(jù)以下標(biāo)準(zhǔn)選擇過濾器或者過濾膜:

1. 樣品基質(zhì)與過濾膜和套管的化學(xué)相容性;

2.樣品的顆粒大小和數(shù)量;

3. 膜與樣品組分之間潛在的相互作用(結(jié)合);

4.特殊應(yīng)用領(lǐng)域,例如預(yù)過濾器與無機(jī)離子的認(rèn)證要求。


表1 過濾膜一般特性和兼容應(yīng)用的一般指南



表2 膜材質(zhì)化學(xué)兼容性表

如何根據(jù)樣品量選擇合適的過濾器?

針對不同的樣品量、不同的基質(zhì)選擇合適的過濾器,如下圖所示。


1.過濾系統(tǒng):少而精(50-600ul)又需要批量處理的樣品

2.針頭濾器:樣品制備、溶液過濾、特殊應(yīng)用

3.大體積樣品過濾:

(1)正壓過濾器,處理樣品量500ml-5L。

                    

(2)負(fù)壓過濾,是對100ml至15L培養(yǎng)基或緩沖液進(jìn)行除菌過濾的方便之選。

                   

一張圖概括下,如何選擇合適的濾膜


總結(jié)一下吧:

過濾不但可以保護(hù)色譜系統(tǒng)和色譜柱,延長柱子的使用壽命,改善數(shù)據(jù)的精確度。還可以消除摩擦產(chǎn)生顆粒而引起的壓力波動(dòng)和無規(guī)律的雜質(zhì)引起的基線波動(dòng),消除由于存在氣泡對檢測系統(tǒng)的干擾。因此通常采用微孔濾膜(Membrane)來過濾流動(dòng)相,使用針頭濾器(Filter)來過濾樣品就尤為重要。


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內(nèi)容來源:作者:老趙頭,為實(shí)驗(yàn)與分析撰稿人;編輯:小析姐。

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