研究共分為2個隊(duì)列，分別為FMI隊(duì)列和CGDB（真實(shí)世界臨床基因數(shù)據(jù)庫，Real-World Clinico-Genomic Database，圖1）隊(duì)列。其中FMI隊(duì)列入組820例進(jìn)行過PD-L1表達(dá)檢測的肺腺癌患者，采用FoundationOne^? Assay對其進(jìn)行全面基因組分析（CGP檢測），檢測流程見下圖2。計算每百兆測序基因的非驅(qū)動體細(xì)胞突變數(shù)，定義為TMB，并將其分為兩組：TMB低（低和中等，<=20 mut/mb）和tmb高（="">20 mut/Mb）。

圖1. CGDB數(shù)據(jù)庫：整合自Flatiron臨床數(shù)據(jù)和Foundation Medicine 基因檢測數(shù)據(jù)

圖2. FoundationOne Assay檢測流程 

CGDB隊(duì)列中入組接受免疫治療的1310例晚期NSCLC患者的臨床數(shù)據(jù)和NGS檢測數(shù)據(jù)，這些患者接受的免疫治療藥物包括帕博利珠單抗、納武利尤單抗和Atezolizumab。在CGDB數(shù)據(jù)庫中，根據(jù)影像學(xué)、病理學(xué)和臨床證據(jù)評估患者的腫瘤進(jìn)展?fàn)顟B(tài)。對于接受過多線免疫治療的患者，根據(jù)其第一次接受免疫治療后的進(jìn)展情況計算PFS。 

在CGDB隊(duì)列接受免疫治療的1310例NSCLC患者中，以TMB作為分層因素，對比TMB高組和TMB低組患者的PFS，結(jié)果顯示兩組存在顯著差異，mPFS分別為6.08個月 vs 2.79個月，P<>

圖3. CGDB隊(duì)列中，TMB作為NSCLC免疫治療的療效預(yù)測標(biāo)志物 

根據(jù)患者接受免疫治療的療效，分為3組：完全緩解/部分緩解（CR/PR）組、疾病穩(wěn)定（SD）組和疾病進(jìn)展（PD）組。3組患者的TMB中位值分別為9.57、7.83和6.09 mut/Mb。對3組患者的TMB進(jìn)行兩兩比較，CR/PR組對比SD組，TMB無顯著差異（P=0.057）；CR/PR組對比PD組，TMB有顯著差異（P<>

圖4. 根據(jù)接受免疫治療患者的療效分析TMB特征 

在FMI肺腺癌隊(duì)列的820例患者中，PD-L1表達(dá)陰性和陽性的患者分別為441例和379例。根據(jù)卡方檢驗(yàn)對比兩組患者的不同基因比較的P值和OR。下圖僅標(biāo)記了錯誤發(fā)生率（FDR）<5%的基因（基于benjamini &="" hochberg="">

圖5. FMI肺腺癌隊(duì)列中，不同PD-L1表達(dá)組患者基因特征對比 

下圖a、b、c、d分別比較了STK11、EGFR、MET、BRAF不同突變狀態(tài)患者的PFS。結(jié)果顯示，STK11突變患者對比STK11野生型患者的PFS存在顯著差異，mPFS分別為2.46個月 vs 3.12個月，P=0.0089；EGFR突變患者對比EGFR野生型患者的PFS也存在顯著差異，mPFS分別為2.4個月 vs 3個月，P=0.0029；MET exon14跳躍突變患者對比MET exon14野生型患者的PFS無差異，mPFS分別為2.7 個月 vs 2.96個月，P=0.86；BRAF突變對比BRAF野生型患者的PFS無差異，mPFS分別為4.6個月 vs 2.936個月，P=0.17。

圖6. 不同基因突變狀態(tài)患者的PFS對比（Kaplan-Meier曲線）

TMB已經(jīng)成為預(yù)測免疫治療療效最具統(tǒng)計學(xué)意義的基因預(yù)測指標(biāo)。對比免疫治療后表現(xiàn)為PD的患者，取得CR/PR的患者具有顯著更高的TMB。相比于TMB低的患者，高TMB患者具有顯著更長的mPFS，提示高TMB與NSCLC接受免疫治療更好的療效相關(guān)。STK11突變多見于PD-L1表達(dá)陰性的患者，且相比于STK11野生型的患者，STK11突變者接受免疫治療的PFS顯著更短。這也與既往報道的研究結(jié)果一致，STK11突變與冷腫瘤微環(huán)境相關(guān)，預(yù)示著患者接受免疫治療后療效較差。EGFR突變者表現(xiàn)出與STK11突變者相似的現(xiàn)象，多見于PD-L1表達(dá)陰性的患者，相比于EGFR野生型患者，接受免疫治療的療效更差。此外，EGFR突變還與更低的TMB相關(guān)。在人群分析中發(fā)現(xiàn)，MET exon14剪接點(diǎn)突變的患者多見于PD-L1高表達(dá)人群；然而，MET exon14突變者接受免疫治療并沒有顯示出顯著更好的療效。BRAF活化突變者，多見于PD-L1表達(dá)陽性者，這類患者接受免疫治療的mPFS更長，后續(xù)需要進(jìn)行更多的研究評估這類患者接受免疫治療是否能夠獲益。這一研究采用真實(shí)世界的臨床基因數(shù)據(jù)庫，整合了患者CGP檢測結(jié)果和接受免疫治療的療效，可以讓我們驗(yàn)證既往已知的研究結(jié)果，并探尋可能預(yù)測免疫治療耐藥或敏感性的新型基因標(biāo)志物。

近年來，免疫治療在NSCLC中大放異彩，已經(jīng)獲批用于晚期NSCLC一線或二線治療。然而，免疫治療的總體有效率相對較低，亟需探尋潛在的療效預(yù)測標(biāo)志物。研究提示，TMB和一些驅(qū)動基因突變狀態(tài)與免疫治療療效相關(guān)。在上述研究中，研究者分析了真實(shí)世界臨床實(shí)踐中接受免疫治療的NSCLC隊(duì)列，并將患者CGP檢測的結(jié)果與免疫治療療效進(jìn)行關(guān)聯(lián)，探尋基因?qū)用嫔峡赡茴A(yù)測免疫治療療效的指標(biāo)。與既往報道結(jié)果一致，TMB高的患者對比TMB低的患者，免疫治療的療效更優(yōu)；STK11突變和EGFR突變患者，相比于野生型患者免疫治療療效更差。后續(xù)，尚需進(jìn)行更多研究，進(jìn)一步評估癌癥相關(guān)基因在免疫治療療效上的預(yù)測價值。此外，隨著越來越多潛在療效預(yù)測標(biāo)志物的出現(xiàn)，我們需要明確標(biāo)志物組合在免疫治療療效上的預(yù)測價值，以期實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)免疫治療。