什么？老師您不信。且聽我解析下面這篇文獻(xiàn)。

這是一篇2018年剛發(fā)表在Nature Communications（IF=12.124）的文章，還是用我們經(jīng)典的ABCD四要素模式來(lái)分析。但是這次的A基因是個(gè)“老”基因，能發(fā)表高分文章的主要原因是，找到了“老”基因發(fā)揮功能的新機(jī)制。

我們先解讀一下題目：Snail promotes ovarian cancer progression by recruiting myeloid-derived suppressor cells via CXCR2 ligand upregulation.題目依然是A基因通過(guò)B信號(hào)通路在C疾病中發(fā)揮D功能的經(jīng)典模式。這樣的思路非常清晰明確，涵蓋了文章的所有要點(diǎn)，建議各位老師的課題標(biāo)書與論文撰寫，也按照這樣的模式。

A基因、C疾病的由來(lái)：

C疾病：本文章的研究腫瘤為卵巢癌。課題研究的選題方向，取決于醫(yī)生所在的領(lǐng)域。

A基因：眼睛尖的老師可能已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了，Snail基因，不就是大名鼎鼎的上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition, EMT）過(guò)程中扮演關(guān)鍵角色的轉(zhuǎn)錄因子嗎。是的，正是這個(gè)Snail轉(zhuǎn)錄因子。該基因已被廣泛認(rèn)為不僅可誘導(dǎo)EMT進(jìn)程，與干細(xì)胞特性產(chǎn)生與維持、細(xì)胞生存與凋亡等生物學(xué)過(guò)程相關(guān)。

作者前期研究發(fā)現(xiàn)，卵巢癌中間充質(zhì)亞型（mesenchymal subtype）病例的預(yù)后較其他亞型更差，而且腫瘤浸潤(rùn)的CD8+淋巴細(xì)胞（CD8+ TILs）數(shù)量更少。因此，作者想要揭示，在EMT進(jìn)展過(guò)程中，發(fā)揮關(guān)鍵角色的Snail轉(zhuǎn)錄因子，影響腫瘤細(xì)胞免疫逃避的具體機(jī)制。

首先，作者通過(guò)臨床病理樣本及TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)，確認(rèn)了Snail基因表達(dá)水平，與卵巢癌病例的EMT進(jìn)程，以及病例的預(yù)后有顯著相關(guān)性（Fig1）。

Fig1

隨后，作者通過(guò)RNAi-慢病毒技術(shù)，將Snail在卵巢癌細(xì)胞中敲減表達(dá)后，檢測(cè)了細(xì)胞中的EMT marker: CDH1和Vimentin。并確認(rèn)Snail敲減可降低卵巢癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力。在免疫缺陷小鼠與免疫健全小鼠中，分別將敲減了Snail的細(xì)胞皮下接種至小鼠，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，Snail抑制腫瘤進(jìn)展的能力與腫瘤免疫相關(guān)（Fig2）。而敲減Snail后腫瘤中浸潤(rùn)的骨髓來(lái)源抑制性細(xì)胞（Myeloid-derived suppressor cells，MDSCs）增多（Fig3）。而MDSCs被認(rèn)為是負(fù)向調(diào)控免疫應(yīng)答的重要細(xì)胞群。

Fig2

Fig3

為了闡述Snail發(fā)揮免疫抑制功能的具體機(jī)制，作者干擾了Snail后，利用表達(dá)譜芯片尋找Snail下游的差異表達(dá)基因，并對(duì)差異表達(dá)基因進(jìn)行功能與通路富集。通過(guò)表達(dá)譜芯片確定了下游的方向：CXCL1，CXCL2和CXCL5。通過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了Snail與CXCL1，CXCL2，CXCL5的分子表達(dá)相關(guān)性Fig4）。通過(guò)WB驗(yàn)證及NF-kB通路抑制劑，以及雙熒光報(bào)告實(shí)驗(yàn)，證明Snail通過(guò)NF-kB通路，以直接結(jié)合至啟動(dòng)子區(qū)域的方式，促進(jìn)CXCL1和CXCL2的表達(dá)。

Fig4

Fig5

是不是看的急不可待了，想要把“老基因”再翻出來(lái)做一做？道法三千，為“老”基因找到有創(chuàng)新性的機(jī)制方向，才能發(fā)揮出科研的價(jià)值。而這也是“老”基因研究的難點(diǎn)。

更多科研資訊和產(chǎn)品詳情，點(diǎn)擊下方直達(dá)