中國釀酒師筆記第十一期《主要看氣質(zhì)（上）》主要講述了香氣化合物測定儀器 7890B+5977A氣相色譜-質(zhì)譜儀以及相關(guān)操作，下篇結(jié)合在操作中的實踐經(jīng)驗主要就其在測定香氣化合物時遇到的常見問題和相對應(yīng)的解決方案做簡要介紹。

一、7890B氣相色譜儀

1.進(jìn)樣口——隔墊和襯管

先從進(jìn)樣口說起，進(jìn)樣口一般會出現(xiàn)問題的是隔墊和襯管。

◎ 隔墊

進(jìn)樣口的隔墊是一種耐高溫、惰性和柔韌性較好的硅橡膠制品。它是一個中間有伸縮性孔的密封墊，可以將氣路系統(tǒng)與外界環(huán)境分隔開，從而避免外界空氣從進(jìn)樣口處進(jìn)入氣路系統(tǒng)。

正常情況下，隔墊被穿刺100次就需更換隔墊，如果隔墊長時間不換，會導(dǎo)致氣路系統(tǒng)密封性變差，前進(jìn)樣口壓力一直升不上去，并且可能會導(dǎo)致樣品損失，柱流量下降，出現(xiàn)鬼峰等問題。所以測定樣品時，如果遇到進(jìn)樣口壓力一直升不上去的情況，就要考慮更換隔墊。

◎ 襯管

襯管是進(jìn)樣口的核心，樣品在襯管中汽化，襯管是石英制品，能夠保證整體受熱均勻，并且其表面平滑，不易吸附樣品中的成分。

我們測定香氣化合物時使用的進(jìn)樣口襯管，一般是不帶玻璃棉的。因為我們使用的頂空固相微萃取的萃取頭比較長，如果使用帶玻璃棉的襯管，進(jìn)樣時萃取頭會插入玻璃棉，進(jìn)而被吸附從而折斷。以前只認(rèn)為加了玻璃棉，會使得香氣成分被吸附，從而檢測不準(zhǔn)確，后來有一朋友，測定香氣時忘記更換襯管，導(dǎo)致了萃取頭折斷在玻璃棉中。

在更換進(jìn)樣口隔墊和襯管時需要用干凈的鑷子，并且配帶手套，防止雜質(zhì)進(jìn)入系統(tǒng)，影響樣品的檢測。

進(jìn)樣口隔墊

襯管（不帶玻璃棉—上；帶玻璃棉—下）

最近遇到一個比較搞笑的問題，更換完進(jìn)樣口隔墊后，安裝好進(jìn)樣口，編輯好序列準(zhǔn)備進(jìn)樣。樣品前處理結(jié)束后，機(jī)器報錯，然后就停止運行了。重復(fù)了好幾次都是上述情況，咨詢工程師后，問題仍然沒有解決，然后減小CTC運行時間，盯著CTC運行后發(fā)現(xiàn)進(jìn)樣口導(dǎo)針器裝反了，導(dǎo)致萃取頭無法插入進(jìn)樣口。

導(dǎo)針器

2.色譜柱

有些型號不同的色譜柱，孔徑也會不同，一般是0.25 mm 和 0.32 mm。在更換色譜柱后，要在儀器的操作系統(tǒng)中，及時更改色譜柱的型號。如果更換色譜柱前后內(nèi)徑一致，會對樣品的檢測影響較小，如果更換柱子前后的內(nèi)徑不同，會使得進(jìn)入柱子的流量和壓力不同，導(dǎo)致樣品檢測不準(zhǔn)確，所以此時及時更改色譜柱的型號就變得非常重要。

色譜柱

色譜柱安裝時，需要對色譜柱兩端進(jìn)行切割，切割長度在5cm左右，防止柱子兩頭的污染物進(jìn)入質(zhì)譜，降低檢測的靈敏度。此外柱子切割位置一定要平整，并且要預(yù)留4~6 mm進(jìn)入進(jìn)樣口的分流平板。色譜柱伸出傳輸線的距離在1~2mm。

氣相與質(zhì)譜傳輸線

傳輸線設(shè)定溫度一定要小于色譜柱耐受的最高溫度，且要大于等于柱溫箱的最高設(shè)定溫度，防止樣品在傳輸線內(nèi)冷凝。

3.色譜圖

樣品經(jīng)過色譜柱檢測后會在電腦上呈現(xiàn)出色譜圖，如果檢測的過程中有什么問題也會在色譜圖中得到反應(yīng)，我們以常見的平頭峰、拖尾峰和前伸峰為例。

檢測過程中，色譜圖出現(xiàn)平頭峰，說明柱子中的樣品過載。這時候可以對樣品進(jìn)行分流進(jìn)樣或稀釋。我們一般使用頂空固相微萃取進(jìn)樣，因萃取頭對揮發(fā)性化合物吸附有限度，所以頂空固相微萃取進(jìn)樣普通果酒和葡萄酒時，一般不用擔(dān)心樣品過載的問題。如果進(jìn)樣為白蘭地等高度酒的話，會因為酒精度過高導(dǎo)致萃取頭飽和、柱子過載，從而出現(xiàn)平頭峰，這種情況下就需要對樣品進(jìn)行稀釋。

平頭峰

檢測過程中，色譜圖出現(xiàn)拖尾峰，可能的原因有四：

（1）進(jìn)樣口的溫度太高或者太低造成的，需要調(diào)整合適的進(jìn)樣口溫度；

（2）載氣的流速過小，需要增大載氣的流速；

（3）襯管或者色譜柱被污染，需要更換襯管或者對色譜柱進(jìn)行老化；

（4）若剛更換柱子后就出現(xiàn)峰拖尾，可能是因為在更換柱子時，切口不平整造成的。

拖尾峰

檢測過程中，色譜圖出現(xiàn)前伸峰，有可能是色譜柱過載，需要是稀釋樣品或者增加分流比，也有可能是柱溫箱初始溫度太低，或者柱流量太低，需要增加初始溫度，以及增大柱流量。

二、5977A質(zhì)譜儀

談到質(zhì)譜儀，首先要說的是質(zhì)譜儀的調(diào)諧，調(diào)諧對質(zhì)譜儀非常重要，當(dāng)機(jī)器開機(jī)抽真空一段時間后，需要對質(zhì)譜進(jìn)行調(diào)諧，調(diào)諧報告主要考察6點：

（1）輪廓圖中的峰形要平滑對稱，在旁邊能很明顯的看到同位素離子峰，例如在219m/z旁邊有220m/z的離子峰；

（2）峰寬要求相近且適宜，自動調(diào)諧的峰寬在0.6±0.1之間；

（3）峰的個數(shù)，通常峰的個數(shù)小于200；

（4）目標(biāo)離子相對豐度，以69m/z的相對豐度作為對照，219m/z的相對豐度在70%~150%之間，502m/z的相對豐度大于3%；

（5）水分小于20%，氮氣和氧氣小于10%，氮氧水的含量越小越好，越小的話，儀器的靈敏度越好，如果氮氧比較高，且在3.5:1左右，說明儀器可能存在漏氣的情況；

（6）EM電壓，顯示的是電子倍增器的電壓，當(dāng)EM電壓大于3000時，需要更換電子倍增器。

 調(diào)諧文件

通常情況下，我們最注重的是空氣和水分的含量，以及EM電壓值，當(dāng)質(zhì)譜存在漏氣時，需要擰緊氣相和質(zhì)譜傳輸線連接處的螺絲。因傳輸線溫度在280℃，需要對傳輸線降溫后再進(jìn)行操作，防止金屬在高溫下操作時變形。如果質(zhì)譜長時間抽真空后，空氣和水的比值仍然較高，我們一般讓機(jī)器空跑幾個樣品，再進(jìn)行調(diào)諧。

EM電壓過高時，說明離子源比較臟，可以通過烘烤MSD的方法來清洗一下離子源，香氣測定過程中，我們所使用樣品較干凈，所以對EM電壓造成的影響比較小。

使用氣相色譜—質(zhì)譜儀做樣品檢測時，如遇到問題，首先不要把問題想的太復(fù)雜。檢查方法的設(shè)置是否正確，儀器的運行是否正常，進(jìn)樣口、柱溫箱、傳輸線設(shè)置是否有問題，柱流量是否合適。如果剛更換柱子后就出現(xiàn)問題，要考慮柱子更換過程有沒有不規(guī)范的操作。仍然解決不了的問題，嘗試運行之前能夠正確運行的方法，觀察機(jī)器是否運行正常，并且根據(jù)儀器提供的運行日志，查找問題所在，如若自行無法解決，可以聯(lián)系工程師，描述問題，遠(yuǎn)程指導(dǎo)解決。