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法醫(yī)DNA鑒定實(shí)驗(yàn)常見問題解答

 leozhaoleo 2017-03-03

1、    Chelex配制需要注意哪些方面?     

推薦按每次檢驗(yàn)的實(shí)際消耗少量配制,迅速用完。不推薦一次配制較大的體積,長(zhǎng)時(shí)間使用。 

2、    Identifiler,Identifiler   Plus,Identifiler Direct試劑盒包含的基因座相同嗎,引物序列相同嗎?    

基因座相同,引物序列相同。    

3、    Identifiler   Plus可否用于建庫(kù)樣品的檢測(cè),同樣,Identifiler Direct等直擴(kuò)試劑盒可否用于案件樣品的檢測(cè)?    

每種試劑盒都是按其應(yīng)用,如案件和建庫(kù),進(jìn)行設(shè)計(jì)和優(yōu)化的,因此都有其針對(duì)性,不建議將建庫(kù)試劑盒用于案件檢測(cè),反之亦然。    

4、    Sinofiler與Huaxia試劑盒包含的基因座相同嗎,引物序列相同嗎?     

基因座相同,引物序列相同。   

5、    Yfiler與Yfiler   Direct試劑盒包含的基因座相同嗎,引物序列相同嗎?    

基因座相同,引物序列相同。  

6、    上面七款試劑盒,相同基因座的引物序列相同,這樣設(shè)計(jì)對(duì)案件檢測(cè)有哪些好處?    

好處在于對(duì)同一個(gè)體提供的檢材,相同基因座的檢測(cè)結(jié)果一定相同,極大的保持了檢測(cè)結(jié)果的一致性,便于以后的數(shù)據(jù)復(fù)核工作。

7、    新的CODIS多少基因座,包含哪些基因座?    

新的CODIS包括20個(gè)基因座:CSF1PO, D3S1358, D5S818, D7S820,   D8S1179, D13S317, D16S539, D18S51, D21S11, FGA, TH01, TPOX, vWA, D1S1656,   D2S441, D2S1338, D10S1248, D12S391, D19S433, D22S1045。  

8、    GlobalFiler試劑盒包含哪些基因座?    

GlobalFiler試劑盒包含所有新的CODIS基因座,和SE33,Amelogenin,DYS391以及Y   indel。

9、    GlobalFiler試劑盒使用幾色熒光?    

使用Thermo Fisher公司的六色熒光(J6),即6-FAM, VIC, NED,   TAZ, SID, LIZ。    

10、    GlobalFiler   Express及GlobalFiler試劑盒有區(qū)別有哪些?    

兩款試劑盒包含的基因座相同,但GlobalFiler   Express試劑盒用于建庫(kù)直擴(kuò)流程,而GlobalFiler用于案件檢測(cè)流程。GlobalFiler試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)體系為25ul,   GlobalFiler Express試劑盒試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)體系為15ul。 

11、    親子鑒定時(shí),單獨(dú)使用Identifiler或Sinofiler試劑盒對(duì)于出現(xiàn)的基因座不符合情況難以判斷結(jié)果,該如何操作?    

建議增加檢測(cè)的基因座數(shù),如同時(shí)使用Identifiler和Sinofiler,可將基因座增加到17個(gè)   (不包含性別基因座),如再增加GlobalFiler試劑盒,可將基因座增加至22個(gè)(不包含性別基因座)。   

12、    Yfiler Plus試劑盒包含哪些基因座?    

Yfiler   Plus試劑盒包含:DYS576,DYS389I,DYS635,DYS389II,DYS627,DYS460,DYS458,DYS19,GATA_H4,DYS448,DYS391,DYS456,DYS390,DYS438,DYS392,DYS518,DYS570,DYS437,DYS385a/b,DYS449,DYS393,DYS439,DYS481,DYF387S1a/b,DYS533。其中DYS576,DYS627,DYS518,DYS570,DYS449,   DYS387S1a/b 是快速突變基因座。    

13、    Yfiler Plus試劑盒使用幾色熒光?    

使用Thermo Fisher公司的六色熒光(J6),即6-FAM, VIC, NED,   TAZ, SID, LIZ。    

14、    Yfiler   Plus試劑盒是用于建庫(kù)檢測(cè)還是用于案件檢測(cè)?    

Yfiler Plus試劑盒在建庫(kù)直擴(kuò)檢測(cè)和案件檢測(cè)流程上均做過驗(yàn)證,全部流程都適用,但會(huì)選擇不同的循環(huán)參數(shù),詳見說明書。   

15、    Yfiler Plus試劑盒擴(kuò)增時(shí)間是多少?    

Yfiler Plus試劑盒擴(kuò)增時(shí)間僅85分鐘,大大縮短PCR擴(kuò)增時(shí)間。    

16、    華夏白金試劑盒包含哪些基因座?    

華夏白金試劑盒包含23個(gè)常染色體 STR   基因座(D3S1358, vWA, D16S539, CSF1PO, TPOX,D8S1179, D21S11, D18S51, Penta E,   D2S441, D19S433, TH01, FGA, D22S1045,D5S818, D13S317, D7S820, D6S1043,   D10S1248, D1S1656, D12S391, D2S1338,Penta D)和兩個(gè)性別標(biāo)記基因座Y indel, Amelogenin。 

17、    華夏白金試劑盒使用幾色熒光?    

使用Thermo Fisher公司的六色熒光(J6),即6-FAM, VIC, NED,   TAZ, SID, LIZ。    

18、    華夏白金試劑盒是用于建庫(kù)檢測(cè)還是用于案件檢測(cè)?    

華夏白金試劑盒是用于建庫(kù)檢測(cè)的試劑盒。    

19、    華夏白金試劑盒擴(kuò)增時(shí)間是多少?    

華夏白金試劑盒擴(kuò)增時(shí)間僅45分鐘,大大縮短PCR擴(kuò)增時(shí)間。  

20、    同一檢材樣本,相同的STR基因座,使用不同公司試劑盒檢測(cè)時(shí),結(jié)果可能有差異?    

不同公司,采用的引物序列不同,對(duì)于某一樣品DNA,有可能在引物結(jié)合區(qū)域存在突變,導(dǎo)致PCR過程中引物無法退火,產(chǎn)生無效等位基因,最終導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不一致。

21、    目前公司五色和六色STR試劑盒可用的LIZ內(nèi)標(biāo)有哪些??jī)烧哂泻螀^(qū)? 

目前有GeneScan? 500 LIZ?分子量?jī)?nèi)標(biāo)和GeneScan? 600   LIZ?分子量?jī)?nèi)標(biāo)。LIZ  600可以用于所有五色STR熒光試劑盒,如ID   Plus,Yfiler試劑盒等及六色STR熒光試劑盒,如GlobalFiler,GlobalFiler Express, Yfiler   Plus,華夏白金試劑盒等;而LIZ 500建議用于五色STR熒光試劑盒,如ID Plus,Yfiler試劑盒等。

22、    3500遺傳分析儀可以用來檢測(cè)六色熒光試劑盒嗎,3130遺傳分析儀呢?    

3500系列遺傳分析儀需要將數(shù)據(jù)收集軟件(Data Collection   v1.0)升級(jí)成為v2.0及以上版本的軟件,而3130系列遺傳分析儀需要將數(shù)據(jù)收集軟件(Data Collection   v3.0)升級(jí)成v4.0軟件才可以檢測(cè)六色熒光試劑盒。    

23、    六色熒光試劑盒數(shù)據(jù)使用哪款數(shù)據(jù)分析軟件才能分析?    

必須使用GeneMapper? ID-X v1.4及以上版本軟件才能進(jìn)行正確分析。

24、    新定量試劑盒有哪些,作用分別是什么?    

新定量試劑盒包括Quantifiler? Trio Kit及Quantifiler? HP   Kit。Quantifiler?   Trio試劑盒用來定量人類總DNA量及男性DNA量,同時(shí)可以指示樣品的降解程度和抑制劑含量高低;而Quantifiler? HP   Kit定量人類總DNA量,同時(shí)可以指示樣品的降解程度和抑制劑含量高低。  

25、    新定量試劑盒(Trio、HP)與早期定量試劑盒(Human、Male和DUO)所適用的軟件版本是什么?    

新定量試劑盒(Trio、HP)只適用于HID   Real-Time PCR Analysis Software v1.2軟件。老定量試劑盒(Human、Male和DUO)適用于SDS系列版本軟件和HID   Real-Time PCR Analysis Software v1.0,v1.1及v1.2版本。 

26、    新定量試劑盒的擴(kuò)增時(shí)間是多少?    

新定量試劑盒的擴(kuò)增時(shí)間僅1小時(shí),比早期定量試劑盒擴(kuò)增時(shí)間縮短了半小時(shí)。

27、    新定量試劑盒與早期定量試劑盒相比有哪些優(yōu)勢(shì)?    

新定量試劑盒具有更好的抗抑制能力及更低的檢測(cè)靈敏度,低值5pg,同時(shí)新增加的降解指數(shù)可以有效判斷樣品的降解情況,從而使操作人員能更準(zhǔn)確地了解樣品信息,提高STR檢測(cè)成功率。   

28、    ProFlex PCR儀可提供哪些模塊?    

對(duì)法醫(yī)實(shí)驗(yàn)室,有3種加熱模塊可供選擇,其中包括3×32孔獨(dú)立模塊(滿足小通量實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行不同PCR反應(yīng)程序的需求)、96孔模塊和雙96孔高通量模塊。     

29、    使用案件試劑盒時(shí),陽(yáng)性質(zhì)控有時(shí)出現(xiàn)低峰或等位基因檢測(cè)不完全的情況,什么原因?    

在案件試劑盒25uL標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)體系中,陽(yáng)性質(zhì)控推薦的加樣量為10uL(0.1   ng/uL)。目前很多實(shí)驗(yàn)采用10或12.5 uL反應(yīng)體系中加入1 uL(0.1   ng/uL)的陽(yáng)性質(zhì)控,致使陽(yáng)性質(zhì)控DNA濃度太低,出現(xiàn)低峰或丟基因座的情況。建議加大陽(yáng)性質(zhì)控的量以獲得最佳實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 

30、    使用STR試劑盒進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)出現(xiàn)大片段基因座丟失的現(xiàn)象,9947A也出現(xiàn)這種情況,可能的原因有哪些?    

使用不規(guī)范耗材進(jìn)行PCR擴(kuò)增,反應(yīng)液蒸發(fā),體系減少導(dǎo)致。這種情況在使用小體系進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)尤為嚴(yán)重。請(qǐng)使用推薦的耗材進(jìn)行擴(kuò)增,并使用標(biāo)準(zhǔn)的25uL反應(yīng)體系進(jìn)行擴(kuò)增。

31、    遺傳分析儀配備UPS有什么好處?     

UPS在斷電后可以由電池供電,所以在斷電后還可以繼續(xù)使用儀器,避免由于外界不穩(wěn)定因素引起的儀器部件損壞;同時(shí),UPS還有穩(wěn)壓、濾波的功能,可以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定、可靠。 

32、    控制主機(jī)的電腦在維護(hù)中要注意哪些方面?     

不要更改計(jì)算機(jī)名,不要更改網(wǎng)卡IP地址的設(shè)置,不要安裝其它軟件。    

33、    連接遺傳分析儀的電腦為什么不能安裝第三方軟件以及殺毒軟件?    

第三方軟件的注冊(cè)碼信息會(huì)與Data   Collection軟件以及GeneMapper軟件的注冊(cè)碼發(fā)生沖突;另外,殺毒軟件會(huì)把Data   Collection軟件以及GeneMapper軟件的注冊(cè)碼當(dāng)成病毒清除掉,從而致使軟件不能正常啟動(dòng)。

34、    廠家擔(dān)保的毛細(xì)管使用次數(shù)是多少?     

16道毛細(xì)管為100次,4道為150次,8道和24道為160次。在擔(dān)保次數(shù)范圍內(nèi),如效期內(nèi)的毛細(xì)管本身出現(xiàn)質(zhì)量問題可以聯(lián)系當(dāng)?shù)氐募夹g(shù)支持進(jìn)行咨詢。  

35、    3500遺傳分析儀在更換新的毛細(xì)管之后需要進(jìn)行光譜校正嗎?    

需要進(jìn)行光譜校正,否則儀器無法運(yùn)行。

36、    甲酰胺應(yīng)該如何保存?     

首次使用時(shí),分裝成小管,–20°C進(jìn)行保存。分裝的量以2-3次用完為宜,避免反復(fù)凍融影響性能。

37、    POP4(35XX遺傳分析儀)384或960兩種型號(hào)的膠有時(shí)不夠預(yù)期的電泳樣品數(shù)目?    

可以滿足既定樣品數(shù)(384個(gè)樣品或60次進(jìn)樣/8道或20次進(jìn)樣/24道;960個(gè)樣品或120次進(jìn)樣/8道或50次進(jìn)樣/24道,以先到達(dá)的限定條件為準(zhǔn))進(jìn)行電泳,但如果排氣泡的次數(shù)超過4次或進(jìn)行其他向?qū)В╓izard)次數(shù)太多,造成過多的膠浪費(fèi),就無法達(dá)到既定樣品的數(shù)目。    

38、    POP4保質(zhì)期是多久?如何保存?    

31XX所使用的瓶裝POP4和35XX所使用的袋裝POP4保質(zhì)期均為9個(gè)月。2℃~ 8℃進(jìn)行保存,嚴(yán)禁–20℃保存。  

39、    剛從冰箱拿出來的POP膠有結(jié)晶,如何處理?    

POP膠里含有高濃度的尿素,低溫容易造成尿素的結(jié)晶,從冰箱拿出后室溫放置一段時(shí)間,晶體會(huì)消失,可以正常使用。 

40、    電泳時(shí)Ladder加樣頻率是如何規(guī)定的?    

按以下推薦進(jìn)行加樣:   

41、    GeneMapper? ID-X v1.3及v 1.4軟件可以安裝在Microsoft? Windows? 7 Professional嗎?    

GeneMapper? ID-X v1.3及v1.4版本的軟件可以安裝在Microsoft? Windows? 7   Professional操作系統(tǒng)中,但必須是32位的操作系統(tǒng)。同時(shí),v1.3版本的軟件也可以安裝在Windows Vista? Business,Windows XP Professional ,32位的操作系統(tǒng)中,v1.4版本的軟件也可以安裝在Windows XP   (SP3),32位的操作系統(tǒng)中。   

42、    GeneMapper? ID-X v1.5對(duì)安裝配置的要求?    

軟件安裝在Windows? 7 Professional(SP1),   64位操作系統(tǒng)中,不支持在Microsoft? Windows? 10 Professional系統(tǒng)上進(jìn)行安裝。

建議電腦配置如下:    

– i3-3240 CPU @ 3.40GHz or newer    

– 8 GB RAM    

– 10 GB available on boot drive     

– DVD-ROM drive    

– 10/100 NIC with RWU (internal) or above installed    

– TCP/IP installed    

– Supported Operating Systems    

– Windows? 7 Professional, 64-bit (Service Pack 1)   

43、    GeneMapper? ID-X   系列軟件(如v1.4,v1.5)可以安裝在中文操作系統(tǒng)中嗎?

只支持英文操作系統(tǒng)的安裝。

44、    GeneMapper? ID-X 軟件為什么不能重復(fù)安裝?    

每個(gè)軟件均有唯一序列號(hào)(Registration   Code),如果在同一局域網(wǎng)內(nèi)同時(shí)安裝一個(gè)序列號(hào)的軟件,軟件之間會(huì)發(fā)生沖突,致使軟件無法使用。  

45、    35XX與之前31XX和310遺傳分析儀電泳生成的文件格式相同嗎?    

不相同。31XX和310遺傳分析儀電泳生成的文件格式為.fsa,而35XX遺傳分析儀電泳生成的文件格式為.hid。    

46、    GeneMapper? ID-X   哪款軟件可以分析后綴為.hid的文件?    

GeneMapper? ID-X v1.2及以上版本的軟件可以分析.hid和.fsa的文件;而之前版本的軟件,包括GeneMapper? ID-X   v1.0,v1.0.1,v1.1和GeneMapper? ID 3.2.1,3.3軟件只能分析.fsa的文件。  

47、    GeneMapper? ID-X如何升級(jí)到最新版本(v1.5)?    

如果是GeneMapper? ID-X v1.3及以下版本,需要付費(fèi)購(gòu)買升級(jí)包;如果是GeneMapper? ID-X   v1.4,可以免費(fèi)升級(jí)。具體請(qǐng)咨詢當(dāng)?shù)劁N售人員。

48、    同一樣品數(shù)據(jù)用GeneMapper   ID 3.2.1或3.3分析沒有問題,但用GeneMapper? ID-X專家系統(tǒng)軟件分析就不能通過,什么原因?    

GeneMapper? ID 3.2.1、3.3和GeneMapper? ID-X專家系統(tǒng)都屬于數(shù)據(jù)分析軟件,但每款軟件的限定條件不同,GeneMapper? ID-X專家系統(tǒng)軟件設(shè)定的條件更為嚴(yán)格些,因此對(duì)數(shù)據(jù)質(zhì)量的要求更高,結(jié)果更精確。    

49、    使用GeneMapper? ID-X軟件如何導(dǎo)出CODIS表格?    

樣品分析好后,不含有OL及其他雜峰,在GeneMapper? ID-X軟件界面的Table  Setting下拉菜單選擇CODIS Export,然后將要導(dǎo)出的樣品的Specimen   Category選擇Forensic Unknown(或根據(jù)實(shí)驗(yàn)室具體檢材類型選擇),然后點(diǎn)擊File > Export Table for   CODIS。    

50、    需要備份哪些數(shù)據(jù)?     

建議必須備份的數(shù)據(jù)是后綴為.fsa或.hid的原始樣品文件,樣品分析后生成的.ser文件可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的要求確定是否需要備份。     

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