緩沖液（Buffer solution）通常是由「弱酸及其共軛堿」或「弱堿及其共軛酸」緩沖對(duì)所組成的溶液，能夠在加入一定量其他物質(zhì)時(shí)減緩pH的改變。以生物實(shí)驗(yàn)中最常用的一種緩沖液PBS為例，是由Na₂HPO₄、KH₂PO₄組成的緩沖對(duì)，在PH5.8-8.0范圍內(nèi)有較強(qiáng)的緩沖能力。

緩沖溶液的選擇與計(jì)算

為了保證緩沖溶液有足夠強(qiáng)的緩沖能力，在配制緩沖溶液時(shí)，需要做到：

1）為使共軛酸堿對(duì)的濃度比接近于1，應(yīng)根據(jù)所需要維持的pH范圍選擇合適的緩沖對(duì)，使其中的弱酸的_PKa等于或接近于所要求的pH，例如，生物培養(yǎng)液中需用_PH=7.0的緩沖溶液，已知H₂PO₄^-的pKa₂=7.21，因此，H₂PO₄—HPO₄^2-是可以選擇的合適的緩沖對(duì)。如若配制_PH=9.0的緩沖溶液，則可選擇NH₃·H₂O-NH₄Cl緩沖對(duì)（pKa（NH4+）=9.25）?？梢娙跛岬?/span>Ka是選擇緩沖溶液的主要依據(jù)，表中列出了幾種常用的緩沖溶液。

常用緩沖溶液濃度及pH范圍

緩沖溶液的作用與使用中的注意事項(xiàng)

緩沖溶液的作用是在有限的范圍內(nèi)調(diào)整溶液的pH值使待測(cè)溶液的酸度符合分析方法所規(guī)定的范圍，例如，苯酚在堿性介質(zhì)及鐵氰化鉀存在下，可與4-氨基安替比林反應(yīng)生成橙紅色的安替比林染料，為了防止芳香胺類的干擾以pH在10士0.2時(shí)最為適宜。為此，就需要在待測(cè)溶液中加入氨一氯化錢緩沖溶液調(diào)整和控制待測(cè)溶液的pH為10.0士0.2。

※在實(shí)際工作中有些分析人員由于不大了解緩沖溶液的作用機(jī)理，當(dāng)所配制和使用的緩沖溶液與規(guī)定的數(shù)值不相符時(shí)，為使緩沖溶液達(dá)到要求，就用鹽酸或氫氧化鈉等強(qiáng)酸、強(qiáng)堿進(jìn)行調(diào)節(jié), 以為這樣做可以使緩沖溶液盡快達(dá)到所需要的pH值，然而，結(jié)果卻適得其反，這樣的溶液pH值雖然調(diào)對(duì)了，可是它的緩沖體系卻被破壞了，作用也就失去了，緩沖溶液一般都是由弱酸及其弱酸鹽或是弱堿及其弱堿鹽組成的一對(duì)共軛體。

使用緩沖溶液的注意事項(xiàng)：不少緩沖溶液都含有易揮發(fā)組分，如，氨-氯化銨中的氨酷酸-醋酸鈉中的醋酸。現(xiàn)在，不少實(shí)驗(yàn)室引入了定量加液器，用定量加液器加試劑，具有簡便準(zhǔn)確誤差恒定的特點(diǎn)，特別是在做成批樣品時(shí)更顯出它的優(yōu)越性，不少同志也喜歡用它來加緩沖液，但是，應(yīng)注意緩沖液不能長久存放在定量加液器中，因該器皿不密閉，易造成氨的揮發(fā)（醋酸-醋酸鈉緩沖液中的醋酸也同理），從而，導(dǎo)致溶液失效，正確的做法是緩沖液應(yīng)適量配制，使用后及時(shí)密閉并置于低溫中保存。

各種緩沖溶液的配制方法，絕對(duì)史上最全。。。

三羥甲基氨基甲烷緩沖液（pH8.0）取三羥甲基氨基甲烷12.14g，加水800mL，攪拌溶解，并稀釋至1000mL，用6mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至8.0，即得。

三羥甲基氨基甲烷緩沖液（pH8.1）取氯化鈣0.294g，加0.2mol/L三羥甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至8.1，加水稀釋至100mL，即得。

三羥甲基氨基甲烷緩沖液（pH9.0）取三羥甲基氨基甲烷6.06g，加鹽酸賴氨酸3.65g、氯化鈉5.8g、乙二胺四醋酸二鈉0.37g，再加水溶解使成1000mL，調(diào)節(jié)pH值至9.0，即得。

烏洛托品緩沖液，取烏洛托品75g，加水溶解后，加濃氨溶液4.2mL，再用水稀釋至250mL，即得。

巴比妥緩沖液（pH7.4） 取巴比妥鈉4.42g，加水使溶解并稀釋至400mL，用2mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.4，濾過，即得。

巴比妥緩沖液（pH8.6） 取巴比妥5.52g與巴比妥鈉30.9g，加水使溶解成2000mL，即得。

巴比妥－氯化鈉緩沖液（pH7.8）取巴比妥鈉5.05g，加氯化鈉3.7g及水適量使溶解，另取明膠0.5g加水適量，加熱溶解后并入上述溶液中。然后用0.2mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH

磷酸鹽緩沖液（pH2.5）取磷酸二氫鉀100g，加水800mL，用鹽酸調(diào)節(jié)pH至2.5，用水稀釋至1000mL。磷酸鹽緩沖液（pH5.0）取0.2mol/L磷酸二氫鈉溶液一定量，用氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH值至5.0，即得。

磷酸鹽緩沖液（pH5.8）取磷酸二氫鉀8.34g與磷酸氫二鉀0.87g，加水使溶解成1000mL，即得。

磷酸鹽緩沖液（pH6.5）取磷酸二氫鉀0.68g，加0.1mol/L氫氧化鈉溶液15.2mL，用水稀釋至100mL，即得。

磷酸鹽緩沖液（pH6.6）取磷酸二氫鈉1.74g、磷酸氫二鈉2.7g與氯化鈉1.7g，加水使溶解成400ml，即得。

磷酸鹽緩沖液（含胰酶）（pH6.8）取磷酸二氫鉀6.8g，加水500mL使溶解，用0.1mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至6.8；另取胰酶10g，加水適量使溶解，將兩液混合后，加水稀釋至1000mL，即得。

磷酸鹽緩沖液（pH6.8）取0.2mol/L磷酸二氫鉀溶液250mL，加0.2mol/L氫氧化鈉溶液118mL，用水稀釋至1000mL，搖勻，即得。

磷酸鹽緩沖液（pH7.0）取磷酸二氫鉀0.68g，加0.1mol/L氫氧化鈉溶液29.1mL，用水稀釋至100mL，即得。

磷酸鹽緩沖液（pH7.2），取0.2mol/L磷酸二氫鉀溶液50mL與0.2mol/L氫氧化鈉溶液35mL，加新沸過的冷水稀釋至200mL，搖勻，即得。

磷酸鹽緩沖液（pH7.3）取磷酸氫二鈉1.9734g與磷酸二氫鉀0.2245g，加水使溶解成1000mL，調(diào)節(jié)pH值至7.3，即得。

磷酸鹽緩沖液（pH7.4）取磷酸二氫鉀1.36g，加0.1mol/L氫氧化鈉溶液79mL，用水稀釋至200mL，即得。

磷酸鹽緩沖液（pH7.6）取磷酸二氫鉀27.22g，加水使溶解成1000mL，取50mL，加0.2mol/L氫氧化鈉溶液42.4mL，再加水稀釋至200mL，即得。

磷酸鹽緩沖液（pH7.8）甲液：取磷酸氫二鈉35.9g，加水溶解，并稀釋至500mL。乙液：取磷酸二氫鈉2.76g，加水溶解，并稀釋至100mL。取上述甲液91.5mL與乙液8.5mL混合，搖勻，即得。

磷酸鹽緩沖液（pH7.8～8.0） 取磷酸氫二鉀5.59g與磷酸二氫鉀0.41g，加水使溶解成1000mL，即得。

甲酸鈉緩沖液（pH3.3）取2mol/L甲酸溶液25mL，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氫氧化鈉溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75mL，用水稀釋至200mL，調(diào)節(jié)pH值至3.25～3.30，即得。

鄰苯二甲酸鹽緩沖液（pH5.6）取鄰苯二甲酸氫鉀10g，加水900mL，攪拌使溶解，用氫氧化鈉試液（必要時(shí)用稀鹽酸）調(diào)節(jié)pH值至5.6，加水稀釋至1000mL，混勻，即得。

氨－氯化銨緩沖液（pH8.0）取氯化銨1.07g，加水使溶解成100mL，再加稀氨溶液（1→30）調(diào)節(jié)pH值至8.0，即得。

氨－氯化銨緩沖液（pH10.0）取氯化銨5.4g，加水20mL溶解后，加濃氯溶液35mL，再加水稀釋至100mL，即得。

硼砂－氯化鈣緩沖液（pH8.0）取硼砂0.572g與氯化鈣2.94g，加水約800mL溶解后，用1mol/L鹽酸溶液約2.5mL調(diào)節(jié)pH值至8.0，加水稀釋至1000mL，即得。

硼砂－碳酸鈉緩沖液（pH10.8～11.2）取無水碳酸鈉5.30g，加水使溶解成1000mL；另取硼砂1.91g，加水使溶解成100mL。臨用前取碳酸鈉溶液973mL與硼砂溶液27mL，混勻，即得。

硼酸－氯化鉀緩沖液（pH9.0）取硼酸3.09g，加0.1mol/L氯化鉀溶液500mL使溶解，再加0.1mol/L氫氧化鈉溶液210mL，即得。

醋酸鹽緩沖液（pH3.5）取醋酸銨25g，加水25mL溶解后，加7mol/L鹽酸溶液38mL，用2mol/L鹽酸溶液或5mol/L氨溶液準(zhǔn)確調(diào)節(jié)pH值至3.5（電位法指示），用水稀釋至100mL，即得。

醋酸－鋰鹽緩沖液（pH3.0）取冰醋酸50mL，加水800mL混合后，用氫氧化鋰調(diào)節(jié)pH值至3.0，再加水稀釋至1000mL，即得。

醋酸－醋酸鈉緩沖液（pH3.6） 取醋酸鈉5.1g，加冰醋酸20mL，再加水稀釋至250mL，即得。

醋酸－醋酸鈉緩沖液（pH3.7）取無水醋酸鈉20g，加水300mL溶解后，加溴酚藍(lán)指示液1mL及冰醋酸60～80mL，至溶液從藍(lán)色轉(zhuǎn)變?yōu)榧兙G色，再加水稀釋至1000mL，即得。

醋酸－醋酸鈉緩沖液（pH3.8）取2mol/L醋酸鈉溶液13mL與2mol/L醋酸溶液87mL，加每1mL含銅1mg的硫酸銅溶液0.5mL，再加水稀釋至1000mL，即得。

醋酸－醋酸鈉緩沖液（pH4.5） 取醋酸鈉18g，加冰醋酸9.8mL，再加水稀釋至1000mL，即得。

醋酸－醋酸鈉緩沖液（pH4.6）取醋酸鈉5.4g，加水50mL使溶解，用冰醋酸調(diào)節(jié)pH值至4.6，再加水稀釋至100mL，即得。

醋酸－醋酸鈉緩沖液（pH6.0）取醋酸鈉54.6g，加1mol/L醋酸溶液20mL溶解后，加水稀釋至500mL，即得。

醋酸－醋酸鉀緩沖液（pH4.3） 取醋酸鉀14g，加冰醋酸20.5mL，再加水稀釋至1000mL，即得。

醋酸－醋酸銨緩沖液（pH4.5）取醋酸銨7.7g，加水50mL溶解后，加冰醋酸6mL與適量的水使成100mL，即得。

醋酸－醋酸銨緩沖液（pH6.0） 取醋酸銨100g，加水300mL使溶解，加冰醋酸7mL，搖勻，即得。

磷酸－三乙胺緩沖液:取磷酸約4mL與三乙胺約7mL，加50％甲醇稀釋至1000mL，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.2，即得。

磷酸鹽緩沖液:取磷酸二氫鈉38.0g，與磷酸氫二鈉5.04g，加水使成1000mL，即得。

磷酸鹽緩沖液（pH2.0）甲液：取磷酸16.6mL，加水至1000mL，搖勻。乙液：取磷酸氫二鈉71.63g，加水使溶解成1000mL。取上述甲液72.5mL與乙液27.5mL混合，搖勻，即得。

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