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如果王寶強(qiáng)有生物實(shí)驗室的朋友......

 解螺旋 2020-08-27


作者:解螺旋.葉子

如需轉(zhuǎn)載請注明來源:解螺旋·醫(yī)生科研助手

導(dǎo)語

要說本周最火的話題是什么,非王寶強(qiáng)莫屬,其熱度以超越了奧運(yùn)會。作為科研助手的解螺旋,這次不談八卦,只談科學(xué)。

之前有消息說,寶寶帶孩子做親子鑒定:確認(rèn)無血緣關(guān)系!但后面的內(nèi)容就太不專業(yè)了,什么DNA相似度2%~8%,報告有這么說的嗎?純粹是瞎搞。今天葉子就從科學(xué)的角度來說說親子鑒定。

 

在中國古代,最早的“綠帽子王”就是千古一帝秦始皇,他爸,贏異人。他被丞相呂不韋帶上了綠帽子(其實(shí)可以反過來說),以至于嬴政的親爹是誰到現(xiàn)在還是個歷史懸案。而在電視劇《尋秦記》里,項少龍為了幫嬴政爭奪太子,用了滴血驗親的辦法來證明嬴政是贏異人的兒子。

那這滴血驗親就是最早的“親子鑒定”手段,那這個究竟靠不靠譜呢?當(dāng)然不靠譜,如果這個有用,還要復(fù)雜的DNA鑒定干嘛,這只是我們祖先一廂情愿的想象而已。
 
好了,上面也說了,現(xiàn)在的親子鑒定主要是靠DNA鑒定,更準(zhǔn)確的說是STR鑒定。此方法靠著高靈敏度、高鑒別能力、標(biāo)準(zhǔn)化分型等優(yōu)勢,壟斷了DNA鑒定的市場。根據(jù)老孟的遺傳法則,成對染色體DNA一半是來自于父親,另一半來自于母親。對于多個位點(diǎn)的檢測后,如果有至少三個位點(diǎn)的數(shù)值不符合,就說明無親緣關(guān)系。
正規(guī)的親子鑒定機(jī)構(gòu)
和很多人以為的不同,絕大多數(shù)醫(yī)院不會做親子鑒定。正規(guī)的親子鑒定機(jī)構(gòu),必須有“法醫(yī)物證鑒定資質(zhì)”,可以通過當(dāng)?shù)厮痉ň止倬W(wǎng)查詢。一般價格在幾百到幾千不等。需要個人提供樣本,包括以下幾種:
 
毛發(fā)采集

  • 準(zhǔn)備好一張白紙。

  • 從頭上拔下毛發(fā)(動作要迅速,最好兩根一起拔),用肉眼觀察毛發(fā)根部是否帶有一個半透明的膠囊狀物體。取下的頭發(fā)不能用手去接觸毛囊,用A4紙包好放入信封,在信封表面標(biāo)記上樣本所屬人的身份和姓名。每人需要15-20根。


血痕采集

  • 用針輕刺皮膚表面(手指尖、耳垂、腳后跟以及身體表面任何部位),待血流出時,用準(zhǔn)備好的紗布(大小藥店均有出售)輕輕擦拭,在其表面留下5-6個如同黃豆大小的血印即可。

  • 將其用白紙或則信封包好,不能用塑料袋裝。在信封表面標(biāo)記上樣本所屬人的身份和姓名。注:采血的人半年之內(nèi)沒輸過別人的血,兩年之內(nèi)沒進(jìn)行過骨髓移植。


口腔粘膜采集

  • 從藥店購買單頭消毒棉簽,每人三根。拿起一根棉簽伸進(jìn)口腔在臉頰內(nèi)側(cè)的肌肉壁上來回刮,讓棉頭充分濕潤,刮拭20下。第二根在另一側(cè)刮拭20下。第三根左右各刮拭10下后拿出。

  • 將其用白紙或則信封包好,在信封表面標(biāo)記上樣本所屬人的身份和姓名。注:不能用塑料袋裝。


只要夫妻雙方同意,將這些給了鑒定機(jī)構(gòu)付錢就可以做。

但如果是要瞞著一方做,怎么辦呢?如果你認(rèn)識生物實(shí)驗室里的人,那就好辦啦,以下是protocol。
生物實(shí)驗室“特色”方法
第一步:DNA提取
 
把樣本細(xì)胞核中所含有DNA提取出來,然后進(jìn)行一定的純化,化除樣本中的雜質(zhì)。
 
第二步:PCR擴(kuò)增
 
PRC的中文名為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),簡單的說,PCR擴(kuò)增這一步就是把我們所需要的片段通過酶促反應(yīng),放大到通過某些專用儀器可以看到的程度。
 
第三步:后PCR反應(yīng)
 
這一步主要是上測序儀檢測的準(zhǔn)備階段,將雙鏈的DNA打開,加一些檢測用的的內(nèi)標(biāo),主要是用來標(biāo)記檢測的片段長度。
 
目前所用的測序儀,并非全基因組測序儀,而是高通量測序儀,最快可以一天內(nèi)出結(jié)果。

第四步:毛細(xì)管測序儀檢測
 
由于DNA帶有電荷,通過毛細(xì)管電泳的方法,不同片段DNA長度的電泳速度不同,在同樣的電壓,同樣的電泳時間下,泳動的距離不同,這些長短不同距離可以通過前期加入的內(nèi)標(biāo)測量分辨出來,同時可通過一定的軟件顯示在電腦上,方便檢測人員處理和分析數(shù)據(jù)。
 
第五步:分析數(shù)據(jù),出具報告
 
一般是測3個人的,然后母子父子聯(lián)合對比結(jié)果,孩子的一對等位基因理論上是一個來自母親一個來自父親,軟件會分析出多少個位點(diǎn)相同或不同。 該結(jié)果一般會告訴你是否可排除生物學(xué)父親。如果排除,說明不是親子;不排除,說明可能是親子。
 
鑒定結(jié)果計算
目前主要測13個STR基因座,檢測這些遺傳標(biāo)記排除無關(guān)男子的累進(jìn)機(jī)會,叫做累計非父排除率(CPE)
 
漢族人群13個STR基因座的PE和CPE的值

 

也就是說,當(dāng)這13個STR全部相同時,兩者為父子的概率為99.9966415%?,F(xiàn)在的為了讓檢驗更準(zhǔn)確,在CPE≥99.95%時,會進(jìn)行父權(quán)相對機(jī)會(RCP)的計算。
 

RCP值是一個概率含義,從理論上而言,永遠(yuǎn)達(dá)不到100%。實(shí)際上RCP值是鑒定人對判定親生父子關(guān)系的一種“把握度”。目前學(xué)術(shù)界比較一致的意見是RCP≥99.99%作為判定親生關(guān)系的界限。即在CPE在≥99.99%的前提下,鑒定人有99.99%的“把握”認(rèn)為這兩者為父子關(guān)系。

比如,某親子鑒定案的CPI為2497,則其RCP為
RCP=2497/(2497+1) * 100% = 99.96%

10個STR基因座PI值

 
 

美國Paternity Inclusion會議推薦標(biāo)準(zhǔn)

當(dāng)然除了以上這種方式外,還有種更簡單直接的方法。

 
看臉

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