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免疫組織化學(xué)技術(shù)基本原理：通過免疫學(xué)中抗原抗體結(jié)合反應(yīng)，用特異性抗體（單克隆或多克?。z測(cè)組織、細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的抗原物質(zhì)，形成抗原―抗體復(fù)合物；此復(fù)合物上帶有事先標(biāo)記的標(biāo)記物，通過與標(biāo)記物相對(duì)應(yīng)的檢測(cè)系統(tǒng)，如酶底物顯色反應(yīng)可使之呈現(xiàn)某種顏色，從而可檢測(cè)組織細(xì)胞內(nèi)的抗原，以達(dá)到診斷、鑒別診斷和研究的目的。 免疫組織化學(xué)（IHC）在近十余年來已在國內(nèi)廣泛開展，幾乎所有的病理科在日常工作中都需做幾項(xiàng)甚至幾十項(xiàng)IHC來輔助病理診斷，IHC已整合入外科病理（診斷病理），成為醫(yī)院病理科不可缺少的輔助技術(shù)，它不僅能使病理診斷更精確，更有肋于腫瘤的正確分類分型，還能預(yù)測(cè)某些腫瘤的預(yù)后和提供治療的依據(jù)[1]?；鶎俞t(yī)院病理科近幾年也在陸續(xù)開展，自從去年我科開展免疫組化以來，診斷水平大大提高，且對(duì)臨床科室的發(fā)展起到了推動(dòng)作用。但基層醫(yī)院由于病種相對(duì)較少，人員少，因此要尋找一個(gè)比較適合、簡單的方法才是行之有效的，而即用型抗體，尤其適合基層醫(yī)院。
1、即用型抗體的優(yōu)點(diǎn) 1.1 使用方便。
1.2 對(duì)于不具備或基本不懂免疫組化技術(shù)的人，只要按照說明書的方法使用，也能獲得理想的結(jié)果。
1.3 不需要配置多種昂貴的微量加樣器。
1.4 特別適合于基層單位。
2、即用型抗體缺點(diǎn) 2.1 價(jià)格較濃縮型抗體貴。
2.2 即用型抗體不可作為常備貯存抗體。
3、抗體的選擇 抗體選擇原則：形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)+抗體特性，形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)=病理醫(yī)生的診斷水平，抗體特性=特異性+敏感性。
目前常用的抗體分為四大類： 3.1 上皮性標(biāo)記物。 3.2 間葉性標(biāo)記物。 3.3 神經(jīng)及神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)記物。 3.4 淋巴細(xì)胞標(biāo)記物。 3.5 B細(xì)胞標(biāo)記物。 3.6 其它。
4、免疫組化在病理診斷和研究中的作用[2] 4.1 判定細(xì)胞屬性，以協(xié)助診斷，通過細(xì)胞屬性的判定，確定腫瘤的來源如CK（細(xì)胞角蛋白）陽性提示腫瘤為上皮源性腫瘤，通過特定抗體標(biāo)記出細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的抗原成分，如CK是上皮性標(biāo)記，前列腺特異性抗原（PAS）僅見于前列腺上皮，甲狀腺球蛋白（Tg）抗體時(shí)甲狀腺濾泡性癌的敏感標(biāo)記，而降鈣素抗體是甲狀腺髓樣癌的特有標(biāo)記。膠質(zhì)腫瘤GFAP（膠質(zhì)纖維酸性蛋白）陽性；平滑肌肌動(dòng)蛋白陽性提示腫瘤為平滑肌源性；黑色素瘤、軟組織透明細(xì)胞瘤呈HMB45（黑色素相關(guān)抗原）和melan-A（黑色素A）陽性；血管源性腫瘤CD34（內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記物）陽性；胃腸道間質(zhì)瘤CD117（原癌基因蛋白產(chǎn)物）陽性；B細(xì)胞淋巴瘤CD20和CD79a陽性。
4.2 鑒定病變性質(zhì)通過標(biāo)記Ig輕鏈（κ、λ）可區(qū)分部分B細(xì)胞性淋巴瘤與B細(xì)胞反應(yīng)性增生，前者常表達(dá)單一的Ig輕鏈（κ+/λ+），后者常為多克隆Ig輕鏈（κ+、λ+），而標(biāo)記bcI-2蛋白在區(qū)別濾泡性淋巴瘤和反應(yīng)性濾泡增生有相當(dāng)意義。在濾泡性淋巴瘤，90%以上腫瘤性濾泡細(xì)胞有bcI-2的高表達(dá)；而在濾泡反應(yīng)性增生時(shí)，濾泡反應(yīng)中心的細(xì)胞不表達(dá)bcI-2蛋白，而套細(xì)胞則表達(dá)。
4.3 發(fā)現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移灶某些癌的早期轉(zhuǎn)移有時(shí)與淋巴結(jié)內(nèi)竇性組織細(xì)胞增生不易區(qū)別。常用組織病理學(xué)方法要在一個(gè)組織中認(rèn)出單個(gè)轉(zhuǎn)移性腫瘤細(xì)胞或幾個(gè)細(xì)胞時(shí)不可能的，而采用免疫組化方法（如用上皮性標(biāo)志則十分有助于微?。ò┺D(zhuǎn)移灶的發(fā)現(xiàn)。對(duì)轉(zhuǎn)移性腫瘤也可借助免疫組化標(biāo)記尋找原發(fā)瘤，如骨組織內(nèi)有前列腺特異性抗原陽性細(xì)胞，提示前列腺癌轉(zhuǎn)移。
4.4 探討腫瘤起源或分化表型人們對(duì)一些來源不明的腫瘤長期爭論不休，最后通過免疫組化標(biāo)記取得共識(shí)。如顆粒性肌母細(xì)胞瘤，曾被認(rèn)為時(shí)肌源性的，但該腫瘤肌源性標(biāo)記陰性，而神經(jīng)源性標(biāo)記陽性，證明為神經(jīng)來源可能來自神經(jīng)鞘細(xì)胞。分化很差的腫瘤病理上常按細(xì)胞形態(tài)分為梭形細(xì)胞腫瘤、小圓細(xì)胞腫瘤等，通過多種標(biāo)記的聯(lián)合應(yīng)用，也可能確定來源。
4.5 確定腫瘤分期判斷腫瘤是原位還是浸潤及有無血管、淋巴管侵襲與分期密切相關(guān)。常用病理方法判斷有時(shí)是十分困難的，但用免疫組化法可獲得明確結(jié)果。如采用層粘連蛋白和Ⅳ型膠原的單克隆抗體可清楚顯示基膜的主要成份，一旦證實(shí)上皮性癌突破基膜，就不是原位癌。而是浸潤癌，其預(yù)后是不同的。如乳腺肌上皮缺失加上基膜突破，就是浸潤性癌。用第八因子相關(guān)蛋白、D2-40等顯示血管和淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的標(biāo)記物則可清楚顯示腫瘤對(duì)血管或淋巴管的浸潤。對(duì)許多腫瘤的良惡性鑒別及有無血管或淋巴管浸潤，這是主要的鑒別依據(jù)，同時(shí)也有治療及預(yù)后意義。
4.6 免疫組化標(biāo)記中與預(yù)后有關(guān)的標(biāo)記物大致可分為三類： ① 類固醇激素受體：如雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）等，它們與乳腺癌的關(guān)系已獲公認(rèn)，性激素受體陽性者內(nèi)分泌治療效果較好，預(yù)后也較好。相似的結(jié)果也見于子宮內(nèi)膜癌和卵巢癌。
② 腫瘤基因標(biāo)記物；如癌基因CerB2,P53蛋白等，在腫瘤中高度表達(dá)者預(yù)后較差；而nm23蛋白高度表達(dá)者，腫瘤轉(zhuǎn)移率較低，預(yù)后較好。
③ 細(xì)胞增殖性標(biāo)記物：如表皮生長因子受體（EGFR）、Ki67等，表達(dá)指數(shù)越高，表明其增殖指數(shù)越活躍，惡性度增高，預(yù)后不良，其中以惡性淋巴瘤、乳腺癌較為明顯。而且在乳腺癌的研究中發(fā)現(xiàn)Ki-67、EGFR陽性者，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高，并與激素受體的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。
4.7 輔助的疾病診斷和分類人體的免疫性疾病，主要是自身免疫性疾病，如腎小球腎炎、皮膚自身免疫性疾病等，可用免疫組化方法對(duì)組織細(xì)胞內(nèi)的免疫球蛋白、補(bǔ)體、免疫復(fù)合物等進(jìn)行檢測(cè)以輔助診斷。某些免疫組化的分類及分型也是在免疫組化的基礎(chǔ)上建立的。內(nèi)分泌腫瘤如垂體前葉腺瘤，根據(jù)其分泌功能可分為生長激素腺瘤、泌乳素腺瘤等10型；胰導(dǎo)細(xì)胞瘤的功能分類為胰導(dǎo)素瘤、高血糖素瘤等6種；惡性淋巴瘤根據(jù)瘤細(xì)胞表面標(biāo)記不同可分為T細(xì)胞性、B細(xì)胞性。腎小球腎炎的免疫學(xué)分類亦需免疫組化或免疫熒光技術(shù)。
4.8 尋找感染病因人體疾病的致病微生物中有的在常規(guī)病理檢查中不易發(fā)現(xiàn)，尤其是病毒性致病微生物，由于其分子水平的結(jié)構(gòu)，在細(xì)胞水平上難以發(fā)現(xiàn)，通過免疫組化方法則可明確發(fā)現(xiàn)病原體抗原部位以及定量，如巨細(xì)胞病毒（CMV）、人乳頭狀瘤病毒（HPV）、單純皰疹病毒（HSV）、乙型肝炎病毒（HBV）等，已有商品化標(biāo)記物幫助解決病因診斷問題等。
4.9 指導(dǎo)疾病的治療如乳腺癌c-erbB-2（+++）是用赫賽?。℉erceptin）治療的指征；胃腸道間質(zhì)瘤CD117（+）提示可用格列衛(wèi)治療。
參考文獻(xiàn) [1] 劉彤華。免疫組織化學(xué)規(guī)范化的問題[J].中華病理學(xué)雜志，2008. [2] 戴光強(qiáng)，龔西。診斷病理學(xué)分冊(cè)[M].合肥：安徽科學(xué)技術(shù)出版社，2001.
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