兔子養(yǎng)殖：人工受精技術

1  采精方法

    采精是對兔子人工授精的首要一環(huán)。下面就手握假陰道采精和授精方法介紹如下:

1.1  假陰道的制作:用直徑5cm左右，長度8cm左右的硬塑料管一支，把兩端銼光，內裝與塑管內徑相仿的軟海綿一塊，將海綿沿直軸方向打一小孔，孔徑為0.5cm，孔口呈傘形。集精裝可用大號避孕套代替。

1.2  采精前的器械準備:將洗凈、消毒過的避孕套松開，裝入假陰道內胎中，使開口的一端翻轉，固定在外殼邊緣，有囊的一端露出內胎的另一端約1cm，注入50～60℃的溫水中，使海綿吸收，用溫度計蘸取生理鹽水或液石蠟，插入假陰道內4cm處測溫。當降至43℃左右時即可采精。測溫時要注意外界條件，如氣溫低、降溫快，內胎溫度高些；反之可低些。對公兔采精每ld僅采一次，如果兩次，第二次的精子則不成熟。

1.3  采精:采精的地點可在公兔籠內，左手拿一只母兔誘情，待公兔"爬背"時，右手呈43°角持假陰道放在母兔后腿中間，待公兔射精后，立即將假陰道孔口朝上，以防精液流失。

1.4  假陰道泣度對采精效果有直接影響。公兔陰莖對溫度極為敏感，低于40℃不易引起射精；過高溫度采精會養(yǎng)成嗜高溫的壞習慣，對精液品質也有影響。由于母兔的正常體溫在39～4O.5℃之間，因此，假陰道溫度以40～42℃之間為宜。

2  精液的檢查與稀釋

2.1  精液的檢查

2.1.1  外觀檢查:正常公兔的精液呈淡乳白色，具有特殊的腥味，也有少數兔子的精液不正常，混入尿液的色黃有臭味;生殖器有炎癥出血的帶紅色;清水樣的為無精子。兔子的精量很少，一般在0.2～2mL之間，平均為0.8mL。在實際應用中，一般以目測估計。

2.1.2  顯微鏡檢查:主要是精子密度的檢查和活力的評定。精子密度是指單位容積內所含有的精子數目。精子數的計算，直接關系到授精劑量中含有活精子數。在實踐中常用目測法。目測法是根據精子在視野中分布的概況，即精子與精子之間的距離評定為"密"、"中"、"稀"三種等級。這種方法雖是主觀評定，但簡便易行，實際工作中多采用此法。家兔的精子密度隨季節(jié)變化也十分明顯。

    精子活力是指精液中直線前進運動精子所占百分率。標記"0.9""0.8""0.7……"，分別代表90%、80%、70%……的精子具有前進運動力。這是一種主觀評定法，有經驗的技術員估計的結果往往很接近實際數。兔子的精子活力應在0.5級以上方可用于授精。如在0.5級以下則受精率很低。不同季節(jié)的精子活力差異也十分明顯，9至10月平均活力僅0.15級;12月至次年2月平均活力0.51級;3至5月平均活力0.61級。

2.2  精液的稀釋

    精液稀釋的目的首先是為了擴大精液量，增加輸精母兔只數，同時也是為了延長精子存活時間。在配制稀釋保存液時應當考慮下列因素。

2.2.1  營養(yǎng)成分:精子在代謝過程中主要是單方面的分解作用。成熟的精子不能通過同化作用將外界物質變成本身的成分。因此為了補充精子的能量消耗，只有用最簡單的營養(yǎng)物質，目前常用的是:果糖、山梨醇、甘油磷酸膽堿(GPC)和磷脂。

2.2.2 保護成分。緩沖物質――為了保持精液適當的pH值，常用檸檬酸鈉、酒石酸鉀鈉、磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉等。防冷擊保護劑――常用的有卵磷脂、卵黃、蛋白陳、乳類。制菌物質――常用青霉素(每lmL稀釋液加入500～1000單位)、鏈霉素(每lmL稀釋液加人500～1000μg)。

    家兔精子的理想稀釋液廣泛應用的是0.9%的氯化鈉或5%的葡萄糖溶液，稀釋倍數一般為9倍。稀釋時稀釋液的溫度應與精液等溫。稀釋液注大集精瓶(袋)的速度不能過快。注入后再用玻璃棒輕輕攪動，使其均勻混合。稀釋后的精液應作一次顯微鏡檢查，發(fā)現(xiàn)活力不強或死亡過多的精子則不能用作輸精。

3  輸精方法

    輸精就是將精液注入母兔的生殖道內，是人工授精的最后一環(huán)。

3.1  輸精器:可用玻璃輸精器，前端長l0cm左右的空心小玻管與2mL注射器相連，也可用實驗用滴管代替，每輸精一次應更換一支無菌輸精器。

3.2  輸耕母兔的選擇:應選擇健康無病，處于發(fā)情期的母兔進行授精，這對提高受胎率有很大益處。

3.3  刺激母兔排卵:母兔發(fā)情后，如無交配或其它蘊含物刺激則不會排卵。人工授精缺乏交配的刺激性。然而對母兔注射促排卵素3號卻有較好的促排卵效果，每只兔注射0.5μg，母兔輸精前后注射都同樣有效。

3.4  輸精:由助手抓住母兔的背部，使母兔臀部略朝上，輸精員持輸精器(如一人操作可一手抓兔，一手持輸精器)。取經過稀釋的精液O.5mL(約含精子1000萬個以上)慢慢插入母兔陰道內約6～7cm處即可輸精。輸精器及精液必須加溫至與兔子體溫相接近，輸精前可放在35℃的溫水中保溫。插入時應輕輕向前上方旋動，要邊旋邊進，切不可硬插，以免損傷生殖道。插入后可來回輕輕抽動和轉動幾次，有助于刺激子宮頸。抽出輸精器時也應慢慢地邊轉動邊抽出，以防精液隨輸精器溢出。抽出輸精器后，即由助手拍打一下兔子的臀部，使母兔受驚，以便精子吸人。

    每次輸稀釋過的精液需0.8mL，一只種公兔的精子稀釋后可輸入10只母兔。整個人工授精過程要求動作準確，無菌操作。