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Giemsa染色法

 詩園夢田 2014-02-17

1 染色原理 編輯本段

  Giemsa染色法 :吉姆薩染液由天青,伊紅組成染色原理和結(jié)果與瑞特染色法基本相同。嗜酸性顆粒堿性蛋白質(zhì),與酸性染料伊紅結(jié)果,染粉紅色,稱為嗜酸性物質(zhì);細胞核蛋白和淋巴細胞胞漿為酸性,與堿性染料美藍或天青結(jié)合,染紫藍色,稱為嗜堿性物質(zhì);中性顆粒呈等電狀態(tài)與伊紅和美藍均可結(jié)合,染淡紫色,稱為中性物質(zhì)。

  PH對細胞染色有影響。細胞各成分均不蛋白質(zhì),由于蛋白質(zhì)系兩性電解質(zhì),所帶電荷隨溶液PH而定,在偏酸性環(huán)境中下在電荷增,易與伊紅結(jié)合,染色偏紅;在偏三性環(huán)境中負電荷增多,易與美藍或天青結(jié)合,染色 偏藍。因此細胞染色對氫離子濃度十分敏感,染色用正經(jīng)片必須清潔,無酸堿污染。配制頊特液必須用優(yōu)質(zhì)甲醇,稀釋染色必須用緩沖液,沖洗用水應(yīng)近中性,否則可導(dǎo)致各種細胞染色反應(yīng)異常,以致識別困難,甚至造成錯誤。

2 介紹 編輯本段

  MGG由May-Grunwald染料和Giemsa染料組成。前者化學(xué)名為曙紅亞甲基藍Ⅱ,對胞質(zhì)著色較好;后者對胞核著色較好。因此MGG染色,可兼兩者的優(yōu)點,常用于細胞涂片染色。

  

2.1 1.染液配制

I液的配制:

  包囊的Giemsa染色

  邁格染料 lg

  甲醇 100ml

  在研缽內(nèi)用少量純甲醇將染料充分研磨成均勻一致的懸液,倒人燒瓶中,加入其余的甲醇后置入37℃溫箱4-6小時,每隔半小時研磨半小時,然后放入深棕色瓶內(nèi),在室溫下保存,2周后使用。臨用前取上液40ml,加純甲醇20ml混合用作工作液。

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  姬氏染粉 0.6g

  甘油 50ml

  甲醇100ml

  將姬氏染粉溶于甘油內(nèi),在研缽內(nèi)研磨3-4小時,使之磨勻,加入純甲醇后攪拌均勻,放入深棕色瓶內(nèi),室溫下保存,2周后即可使用。

  磷酸緩沖液配制:1%磷酸氫二鈉20ml,l%磷酸二氫鈉30ml,加蒸餾水至1000ml,調(diào)整pH 6.4-6.8(用蒸餾水代替緩沖液,效果亦佳)。

  

2.2 2.染色步驟

(1)自然干燥的細胞涂片(預(yù)先滴加甲醇固定更好)水平置于染色架上。

  (2)將I液(用緩沖液或蒸餾水5-10倍稀釋)滴蓋涂片上,lO-30分鐘。

  (3)倒棄涂片上的I液,自來水漂洗干凈。

  (4)立即滴蓋Ⅱ液(用緩沖液或蒸餾水5-10倍稀釋)在涂片上染色10-30分鐘。

  (5)倒棄涂片上的Ⅱ液,自來水漂洗干凈。

  (6)趁濕加蓋片或待干后鏡檢。

  

2.3 3.染色結(jié)果

MGG染色將細胞核染成紫紅色,細胞質(zhì)和核仁染成藍紫色。

  

2.4 4.MGG染色特點

染色方法簡單,且兼有瑞氏、姬氏兩種染色的優(yōu)點,并且涂片可保存十多年而不退色。MGG染色對胞質(zhì)胞核染色效果均較好,結(jié)構(gòu)清晰,所染細胞亦比HE染色的細胞大;同時對細菌、霉菌及膽固醇結(jié)晶的顯示也很清楚。因此適用于淋巴造血系統(tǒng)的細胞標(biāo)本、胸腹水、穿刺標(biāo)本等。尤其對鑒別惡性淋巴瘤的類型,MGG染色更有幫助。

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